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MAPK信号转导通路在人参多糖诱导白血病K562细胞凋亡中的作用
目的 探讨人参多糖诱导白血病K562细胞凋亡的机制.方法 将对数生长期K562细胞分成对照组和人参多糖组,对照组细胞常规培养,人参多糖组细胞培养体系中加入人参多糖0.4 g/L.各组细胞培养48 h后,流式细胞术和Hoechst33258染色法检测K562细胞凋亡情况；RT-PCR检测细胞p38、JNK基因表达；采用免疫荧光实验检测细胞中p-p38、p-JNK蛋白表达,测定Caspase-3的活性；Western blotting检测细胞中p38、JNK、p-p38、p-JNK、cleaved Caspase-3蛋白的变化.结果 与对照组比较,人参多糖组K562细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),出现明显的细胞核固缩现象,K562细胞p38 mRNA与JNK mRNA明显增多.免疫荧光检测显示,p-p38、p-JNK、cleaved Caspase-3表达明显增强且向胞核转移；Western blotting检测显示,人参多糖组K562细胞p38、JNK总蛋白无明显变化(P＞0.05); p-p38、p-JNK、cleaved Caspase-3有增加的趋势(P＜0.05).结论 人参多糖能促进K562细胞凋亡,其作用可能是通过影响MAPK信号传导通路实现的.
关键词： 人参多糖 人红白血病K562细胞 细胞凋亡 MAPK信号传导通路 P38 JNK -
MAPK信号传导通路与肠损伤后黏膜上皮修复
肠上皮细胞是肠道黏膜屏障的重要组成部分.各种病理因素均可介导肠上皮细胞损伤,造成其功能的可逆或不可逆丧失.创伤、失血性休克、肠移植、肠栓塞、大面积烧伤、严重感染、肠道炎症性疾病等均有肠损伤这一病理过程.因此,更深入了解肠上皮细胞损伤机制,采取有针对性保护措施,将为临床提供更好治疗手段和策略.
关键词： 肠损伤 MAPK信号传导通路 ERK JNK p38MAPK -
激素难治性溃疡性结肠炎合并巨细胞病毒感染的研究进展及中医药治疗新思路
溃疡性结肠炎(UC)是直肠黏膜层和黏膜下层的连续性炎症,通常先累及直肠,逐渐向全结肠蔓延,呈慢性反复发作的过程[1].临床上UC表现多表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便和里急后重等[2].其发病机制尚未明确,大多认为与遗传、环境、免疫等因素相关,主要是遗传易感者在环境的作用下启动了免疫和非免疫系统,导致免疫炎症反应的发生,肠黏膜屏障被破坏[-4].根据我国IBD诊治共识[5],难治性UC可定义为对激素、免疫抑制剂治疗无效或激素依赖或不能耐受激素的UC.国内外多项研究表明,难治性UC多与巨细胞病毒(CMV)感染有关[6-7].无论是血清学水平还是病理组织学水平,在难治性UC中,CMV阳性率往往大于CMV阴性率,CMV阳性患者激素耐药率远高于CMV阴性患者.现将激素难治性UC合并CMV感染的研究情况及中医药治疗新思路综述如下.
关键词： 激素难治性溃疡性结肠炎 巨细胞病毒 MAPK信号传导通路 中医药 -
NLRC4在儿童败血症中的作用研究
目的 检测NLRC4在败血症儿童血液中的表达,并研究NLRC4在细胞因子产生中的重要性,以及脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞中NLRC4表达的信号传导通路,并研究LPS对巨噬细胞中NLRC4表达的影响.方法 1.采用逆转录-定量聚合酶链反应和Western blot分析法,测定败血症组(n=42)和对照组(n=40)儿童NLRC4的mRNA和蛋白质表达水平;2.在体外使用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞,并测定NLRC4及细胞因子表达水平,以研究LPS对NLRC4表达的调节作用;3.在LPS诱导下使用NLRC4 siRNA转染RAW264.7细胞,并再次测定NLRC4及细胞因子表达水平,研究NLRC4对产生炎症细胞因子的影响;4.阻断MAPK信号传导通路,测定NLRC4的表达水平.结果 1.与对照组相比,败血症组NLRC4的mRNA及蛋白质表达水平显著增加;2.NLRC4表达水平随着细胞使用含LPS的培养基培养时间的延长及浓度的增高而显著增加;3.在LPS诱导下经NLRC4 siRNA转染后的RAW264.7细胞中,IL-1β和IL-18的产生明显增加;4.阻断MAPK信号传导通路后,NLRC4的表达水平显著降低.结论 NLRC4在败血症儿童血清中的表达增加;Western blot的结果表明在RAW264.7细胞中LPS以时间和剂量依赖性方式诱导NLRC4表达;ELISA结果显示,通过NLRC4 siRNA转染RAW264.7细胞增强了LPS对IL-1β和IL-18产生的作用;LPS诱导NLRC4的表达水平与MAPK信号传导通路有关.
关键词： 败血症 NLRC4 脂多糖(LPS) MAPK信号传导通路 -
TAL对慢支模型大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响及部分机制研究
目的 探讨枇杷叶三萜酸(TAL)对慢支模型(CB)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)活性及凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 应用BCG联用LPS的方法复制大鼠CB模型,采用体内外给药的方法,观察TAL及MAPK 3条通路对CB大鼠AM 凋亡及活性的影响.MTT法检测细胞活性,电镜观察AM凋亡,流式细胞技术检测AM凋亡率及AM中凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达.Western blot法检测AM中ERK蛋白磷酸化水平.结果 ① 与正常对照组比较,模型大鼠支气管肺泡灌洗液中AM数增加(P<0.01),而TAL灌胃给药可抑制模型大鼠异常增多的AM数量(P<0.01).② 慢支模型组AM活性较正常组相比明显增强(P<0.01),TAL可抑制CB模型组大鼠AM的活性(P<0.05).③ 与正常组比较,模型大鼠AM凋亡率明显降低 (P<0.01);TAL给药组及ERK通路抑制剂PD98059组AM凋亡率较模型组比较升高(P<0.05,P<0.01).而JNK通路抑制剂Curcumin组AM凋亡率降低(P<0.05).④ 模型大鼠AM ERK磷酸化水平明显升高(P<0.01);TAL(5 mg·L~(-1))体外给药可抑制慢支大鼠AM内ERK MAPK通路的磷酸化 (P<0.05).⑤模型大鼠AM Bax表达明显降低而Bcl-2表达升高 (P<0.01),TAL给药组可降低慢支大鼠AM Bcl-2表达,升高Bax表达.结论 慢支模型大鼠AM活性增强、凋亡减少,TAL可诱导AM凋亡,抑制AM活性,使AM 内Bcl-2/Bax的表达趋于平衡.ERK、JNK MAPK信号传导通路参与慢支大鼠AM凋亡的调节,JNK MAPK信号通路促进AM凋亡而ERK MAPK信号通路抑制AM凋亡.TAL的促AM凋亡作用可能与其抑制慢支大鼠AM ERK MAPK信号通路的磷酸化活化、调节Bcl-2/Bax的表达有关.
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EV71型手足口病患儿外周血树突状细胞及细胞因子产生的调节机制研究
目的 探讨肠道病毒EV71型感染对树突状细胞(DC)成熟凋亡、DC中信号传导通路激活、细胞因子释放的作用机制.方法 收集肠道病毒EV71型感染患儿40例,分为20例轻症型组及20例重症型组,正常对照组儿童20例.流式细胞仪检测各组儿童外周血DC表面标志分子CD11c、CD86、CD80和CD83表达的百分比;采用Western blot法检测DC中MAPK信号传导通路分子磷酸化水平;ELISA法检测同期血清中细胞因子的水平.结果 随着EV71感染程度的加深,外周血DC中标志着细胞成熟的表面标志分子水平均有增加,CD83及CD80尤为显著;MAPK信号传导通路的活化程度逐渐加强;细胞因子水平的表达显著升高.结论 EV71感染可促进树突状细胞成熟凋亡、激活MAPK信号传导通路并增加细胞因子的释放,MAPK信号传导通路在EV71感染的DC中发挥显著调控作用.
关键词： 肠道病毒EV71 树突状细胞 MAPK信号传导通路 细胞因子 -
溶血磷脂酸抑制顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡机制的研究
目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)抑制顺铂(DDP)诱导卵巢癌细胞凋亡的机制.方法:体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV3,选用促分裂素原活化蛋白激酶( MAPK)信号传导通路特异性阻断剂PD98059,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定DDP、DDP+ LPA和DDP+ LPA+ PD98059对SKOV3细胞增殖活性的影响；应用Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞；应用实时荧光定量PCR (RT-PCR)测定单用LPA或合用PD98059对SKOV3细胞环氧化酶-2(COX-2)表达的影响；应用流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡及细胞周期的变化.结果:LPA对DPP抑制卵巢癌细胞增殖有拮抗作用,且增加S期细胞比率；联合应用PD98059后,卵巢癌细胞生长受抑制,S期比率降低,而凋亡小体产生增多.RT-PCR结果显示,LPA能促进COX-2表达(P＜0.05),而合用PD98059后COX-2表达降低(P＜0.05).结论:LPA通过MAPK信号传导通路抑制顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡,且与COX-2表达有关.
关键词： 溶血磷脂酸 卵巢肿瘤 MAPK信号传导通路 细胞凋亡 -
溶血磷脂酸促卵巢癌细胞增殖机制的研究
目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)促进卵巢癌细胞增殖的机制.方法 体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV3,选用促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路特异性阻断剂PD98059,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定LPA和PD98059对SKOV3细胞增殖活性的影响;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定LPA单独或合用PD98059对SKOV3细胞表达环氧化酶-2(COX-2)的影响;应用流式细胞仪(FCM)测定细胞的凋亡及细胞周期的变化.结果 LPA(浓度＞10 μmol/L)以剂量依赖方式促进SKOV3细胞增殖,PD98059抑制LPA促增殖作用(P＜0.05).RT-PCR结果显示,LPA能促进COX-2的表达(P＜0.05),而合用PD98059后COX-2的表达降低(P＜0.05).FCM结果显示,LPA能促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加S期比率,而合用PD98059后LPA促增殖作用消失,且G0/G1期比率升高,S期比率降低.结论 LPA通过MAPK信号传导通路促进卵巢癌细胞增殖,且与COX-2表达有关.
关键词： 溶血磷脂酸 卵巢肿瘤 MAPK信号传导通路 增殖 -
糖皮质激素的信号转导系统
糖皮质激素(glycocorticoid,GC)是由肾上腺皮质分泌的甾体激素,糖皮质激素具有调节免疫、代谢、渗透压、生长发育等多种生理和药理作用,并参与行为和认知过程的调节.就糖皮质激素受体(GR)因子在GC信号通路中的地位、组成与分类、作用机制与结构特点、与临床疾病的关系及GR的新研究进展作一综述.
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MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,我国乳腺癌发病率呈逐年增高趋势,在部分大城市已居女性恶性肿瘤发病率之首.MAPK通路是细胞内重要的信号传导途径,在细胞的恶性转化和肿瘤的发生发展中起重要作用;MAPK主要包括以下四类:细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38激酶以及大丝裂原活化蛋白激酶(BMK1/ERK5).其中ERK的激活与细胞增殖有关,JNK与细胞应激和细胞凋亡有关,p38与炎症反应有关,BMK1/ERK5可能与细胞增殖、细胞周期有关.据研究它的激活与多种恶性肿瘤发生有关~([1]).研究MAPK通路与乳腺癌的关系,有助于了解乳腺癌的发病机制,可能对乳腺癌治疗有意义.本文对MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展综述如下.
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内皮祖细胞与MAPK信号传导通路
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞,尤其是骨髓来源的EPCs在心脏修复、临床肢体缺血的治疗、冠状动脉痰病的治疗、脑中风治疗、改善血管移植物通畅率、改善糖尿病患者的血管形成能力、作为基因治疗导向栽体和靶细胞及抑制肿瘤血管生成等方面具有广阔的应用前景.细胞因子、炎症因子、激素以及药物等可以通过多种细胞信号传导通路影响EPCs的迁移、分化、增值和凋亡,其中丝裂原活化蛋白酶(MAPK)信号传导通路是近几年国内外研究热点.本文就EPCs的生物功能与MAPK信号传导通路的关系进行了综述.
关键词： 内皮祖细胞 MAPK信号传导通路
