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紫杉醇联合IFNα-2b明显增强对K652细胞的诱导凋亡作用
紫杉醇是一种作用于微管的广谱天然抗癌药,目前主要用于治疗实体瘤,能缓解多种进展期实体瘤.但用于治疗髓系白血病效果较差.我们通过实验发现紫杉醇联合INFα-2b对K652细胞的诱导凋亡及杀伤作用均明显增强.实验的主要方法为:(1)将K562细胞浓度调为2×105/ml后接种于96孔板上,每孔100μl,分为4组,空白对照组不加药物,另设一组单独加入100u/ml INFα-2b作为干扰素INFα-2b对照组,均设4个复孔,A组加入浓度分别为20、50、100μmol/L的紫杉醇100μl,B组分别加入上述浓度的紫杉醇及1000u/ml的INFα-2b 100μl,A组及B组每浓度均设4个复孔.在细胞培养箱中设37℃、5CO2%培养48h待检测.
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抗氧化剂和糖皮质激素抑制缺氧／复氧时肾小球血管内皮细胞ICAM-1的表达
细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-l，ICAM-1)主要在内皮细 胞表达，作为白细胞β2整合素家族的配体在中性粒细胞与内皮细胞紧密结合和随后进入 缺血组织中起重要作用。通过降低ICAM-1的表达会减轻缺血／再灌注损伤，这点已在多个 脏器的动物实验中得到证实。已有研究发现糖皮质激素和抗氧化剂，能降低细胞因子刺激下 升高的ICAM-1，本研究旨在探讨抗氧化剂二硫代氨基甲酸吡 咯烷(pyrrolidine dithiocar bamate，PDTC)和糖皮质激素中的地塞米松(Dexamethasone，Dex)对缺氧／再给氧(hypoxia ／reoxygenation，H／R)条件下对体外肾小球血管内皮细胞ICAM-1表达的影响。1 材料与方法 (1)试剂 纯化抗鼠CD54单克隆抗体(IgG)和FITC标记抗鼠IgG二抗(深圳晶美生物工程有限 公司)，Dex和PDTC(美国SIGMA公司)，RPMI 1640细胞培养基(美国GIBCOBRL公司)，小牛血清 (杭州四季青生物公司)。 (2)细胞培养 小鼠肾小球血管内皮细胞株ESDO由长征医院肾内科提供。复苏后，加入 含20％灭活小牛血清的1640培养液，25 cm细胞培养瓶生长，待1～2 d细胞长满瓶底后，以1 08/L浓度接种传代。细胞存活率用台盼蓝染色判断。 (3)方法 向氧分压可调控的Queue细胞培养箱中注入95％的氮气和5％的CO2混合气体 ,使氧分压为零，为缺氧条件。注入空气和5％CO2混合气体为再给氧。缺氧时间为l0 h， 再给氧时间为6 h，PDTC的浓度为50 μmol/L、5 μmol/L，Dex为l00 μmol/L、1 μmo l /L，分别在缺氧前30 min和再给氧时加入。ICAM-1表达的测定：将生长成单层的内皮细 胞用0．2%EDTA在37℃消化l0 min，PBS洗涤后，调整浓度为108/L。取调整好的细胞悬液l 00 μl,加入CD54单克隆抗体20 μl，混匀后室温避光孵育30 min，加FITC标记IgG二抗2 μl 孵育30 min，PBS洗涤2次，固定。阴性对照以FITC标记的同型抗体代替。24 h内EPICS-XL 型流式细胞仪(美国Coulter公司产品)检测。每个样本分析5000个细胞，结果以阳性细胞的 百分率(％)表示。
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呼吸道标本嗜血杆菌培养及其耐药性分析
为了解呼吸道感染嗜血杆菌情况及其对抗生素耐药性,2000年10月至2002年4月,我们对317例呼吸科住院患者的痰标本或咽拭子进行嗜血杆菌分离培养鉴定和药敏试验.现将结果报告如下.临床资料:317例中,男193例、124例,年龄3～81岁、平均年龄64岁.方法:将痰或咽拭子标本接种于含有V、X因子的嗜血杆菌专用巧克力培养基(法国生物梅里埃公司)中,置10%CO2培养箱中(美国QueneCO2细胞培养箱),35℃培养18～24小时;挑选灰白色、圆形、光滑、半透明菌落.依照全国临床检验操作规程鉴定流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌.药敏试验用ATB-NH药敏卡(法国生物梅里埃公司)进行鉴定,按NCCLS标准判断耐药性.
