首页 > 文献资料
-
粘附分子和中性粒细胞在烧伤早期心脏和肝脏损害中的作用
本项目研究的目的主要是探讨严重烧伤早期粘附分子和中性粒细胞在心脏和肝脏损害中的作用,进一步阐明烧伤后脏器损害的发病机制,特别是粘附分子和中性粒细胞在其中的关键作用,为烧伤后脏器损害的防治提供理论依据.项目采用多种现代化实验技术,如RT-PCR、原位杂交、流式细胞仪分析、激光共聚焦荧光显微镜、微管吸吮技术、免疫组化技术、细胞培养和细胞-ELISA等技术,从脏器、细胞及分子水平多层次的进行了研究,主要结果如下:
-
胃癌细胞固有荧光特征初探
目的:探讨正常胃上皮细胞和不同分化程度胃癌细胞的细胞内固有荧光特征性生物物质来源.方法:通过激光共聚焦显微镜比较2种不同分化程度的胃癌细胞株和正常胃上皮细胞株在波长500～530 nm的固有荧光表现:以罗丹明123(Rodamine123)对细胞内线粒体进行染色,观察细胞同有荧光的位置分布;采用氧化呼吸链阻断剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)阻断细胞氧化呼吸反应,测定细胞内固有荧光强度变化.结果:波长500～530 nm的细胞固有荧光主要来自于细胞线粒体内,不同分化程度的胃癌细胞株荧光强度都明显弱于正常上皮细胞株.CCCP作用于细胞可提高该波长范围细胞内的荧光强度.结论:细胞在500～530 nm波段固有荧光减弱的特征可能有助于诊断胃癌,该固有荧光的生物物质来源可能是参与线粒体内氧化呼吸作用的重要辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH).
关键词： 胃癌 固有荧光 激光共聚焦荧光显微镜 -
多重间接免疫荧光技术的建立及其在肝癌样本多种抗原检测中的应用
目的 建立一种适合在肝癌组织同一冰冻切片上同时检测多种蛋白的多重间接免疫荧光染色法.方法 用间接免疫荧光法联合激光扫描共聚焦显微镜技术对肝癌组织第一组4种蛋白进行染色和图像采集;用同源种属IgG Fab抗体封闭;联合化学试剂(β巯基乙醇/十二烷基苯磺酸钠/盐酸胍/氢硼酸钠)清除法洗脱染料和抗体;再次对第二组4种蛋白进行染色和成像;用软件叠加两轮图像染色结果.结果 激光光谱分离技术可以实现多达8种蛋白的共染结果;IgG Fab抗体可以封闭非特异性染色;联合化学合剂清除第一轮抗体后,可在同一切片中进行第二轮染色.结论 成功建立了在同一肿瘤组织标本同时检测多重标志物的方法.
关键词： 多重间接免疫荧光 激光共聚焦荧光显微镜 冰冻切片
