首页 > 文献资料
-
羟基红花黄色素A对高糖作用下视网膜微血管内皮细胞增殖的影响
目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对高糖培养下恒河猴脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)增殖及血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达的影响.方法:取体外培养的RF/6A细胞,分为NG+H0组(含有5.5mmol/L葡萄糖,HSYA的浓度为0mg/L)及HG+H0、HG+H18、HG+H37、HG+H73组(各组中均含有22mmol/L葡萄糖,HSYA的浓度分别为0,18,37,73mg/L).培养24,48和72h,分别使用噻唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖的活性.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组中RF/6A细胞中VEGF mRNA的表达.结果:MTT检测结果表明,HSYA作用48h,HG+H37、HG+H73组细胞吸光度值均明显低于HG+H0组(P<0.01),随着HSYA浓度的增加,各组吸光度值降低.作用72h,HG+H18、HG+H37和HG+H73组细胞吸光度值均明显低于HG+H0组(P<0.01),随着HSYA浓度的增加,各组吸光度值降低,HG+H73组抑制作用明显,其细胞吸光度值明显低于HG+H18和HG+H37组(分别为P<0 01和P<0.05).RT-PCR实验结果表明:与HG+H0组相比,作用48h,HG+H37、HG+H73对RF/6A细胞VEGF mRNA表达的抑制作用显著(P<0.01);而作用72h,HG+H18、HG+H37和HG+H73对高糖诱导的VEGF mRNA的表达均有抑制作用(P<0.01).结论:HSYA能够抑制高糖诱导的RF/6A细胞的增殖并下调高糖所致的VEGF mRNA表达升高,提示其可能机制是通过VEGF途经来实现的.
关键词： 糖尿病性视网膜病变 视网膜微血管内皮细胞 细胞增殖 羟基红花黄色素A -
HPLC法测定九味牛黄丸中羟基红花黄色素A和胆红素的含量
目的 建立HPLC测定九味牛黄丸中羟基红花黄色素A、胆红素含量的检测方法,为九味牛黄丸的质量控制提供依据.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱:Nertsil OPS-SP柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙腈-7 mL·L-1磷酸溶液(26∶4∶70);检测波长:410 nm.结果 羟基红花黄色素A在26.50~132.50 μg、胆红素在10.04~50.20 μg范围内呈良好线性关系;平均回收率:羟基红花黄色素A为96.6%,胆红素为95.6%;RSD:羟基红花黄色素A为0.9%,胆红素为1.3%.结论 该方法简便准确,重复性好,精密度高,可用于九味牛黄丸中羟基红花黄色素A和胆红素的含量测定.
-
HPLC法测定雪莲药酒中羟基红花黄色素A的含量
目的 建立HPLC法测定雪莲药酒中羟基红花黄色素A含量的方法 .方法 高效液相色谱法.色谱柱:KromasilODS-1(250 mm×4.6 mm,5μm)I以甲醇-乙腈-0.7%磷酸(26:2:72)为流动相;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:403nm;柱温:40℃;进样量:10μL.结果 在进样量0.050 6～0.404 8μg范围内,羟基红花黄色素A色谱峰面积有良好的线性关系,标准曲线方程为:A=-78 589C+2 890 724.12,r=0.999 9(n=2),RSD为1.63%(n=5),重现性RSD为0,49%(n=6),平均回收率(n=9)为98.5%,RSD为1.67%.结论 方法 简便、准确,可用于雪莲药酒的质量控制.
-
羟基红花黄色素A对紫外线致人皮肤细胞系损伤的保护作用
目的 评价羟基红花黄色素A(HSYA)对紫外线(UVA、UVB)辐射损伤人表皮细胞(Hacat)和皮肤成纤维细胞(ESF)的保护作用.方法 建立体外紫外线辐射损伤模型,采用MTT法检测培养皮肤细胞活性,分别采用生化测定与ELISA法检测不同剂量HSYA对紫外损伤模型中活性氧(ROS)和金属基质蛋白酶-1(MMP-1)表达水平的影响.结果 UVA、UVB照射后,ESF、Hacat细胞活性显著下降,ROS、MMP-1表达水平明显上升.细胞培养液加入10,20和40 μmol·L-1的HSYA,可不同程度降低UVA、UVB处理后ESF和Hacat细胞中ROS与细胞外MMP-1表达水平.结论 HSYA可抑制紫外线诱导ESF、Hacat细胞氧化损伤,对抗皮肤光老化具有一定的保护作用.
-
红花中羟基红花黄色素A含量测定方法的改进
目的 改进现有红花质量标准中羟基红花黄色素A含量测定色谱系统中色谱峰易变形的缺陷,并建立一个新的高效液相色谱方法.方法 采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈-0.4%的磷酸溶液(30:2:68)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为403nm.结果 羟基红花黄色素A在0.03264～0.1984mg/ml范围内呈良好的线性关系(R2=1), 回收率为100.37%(n=5),RSD为0.9%.结论 本法准确,专属性好,可用作控制红花的质量.
-
羟基红花黄色素A对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用
目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对Mpp+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率;二乙酸二氯荧光素盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量;罗丹明123 (Rhodamine123)染色法检测细胞线粒体膜电位;Western blot法检测Cyt-C、Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达.结果 1 mmol/L MPP+处理SH-SY5Y细胞48h后,细胞存活率显著降低,并诱导细胞产生凋亡,凋亡率达(38.6±1.8)％.而HSYA(15、60、120 μmol/L)预处理1h,可明显增加SH-SY5Y细胞存活率(P＜0.001),并能有效抑制Mpp+诱导的细胞调亡(P＜0.01);可明显抑制Mpp+诱导的细胞内ROS的增加(P＜0.001);也能有效抑制Mpp+诱导的细胞线粒体膜电位的降低(P＜0.01).120 μmol/L HSYA预处理能显著性增加Bcl-2/Bax比值(P＜0.01);能够明显抑制Mpp+诱导的胞质Cyt-C的释放(P＜0.05)和Caspase-3、Caspase-9的高表达(P＜0.05,P＜o.05).结论 HSYA预处理能明显提高Mpp+诱导的SH SY5Y细胞损伤的细胞存活率,可有效抑制细胞调亡的发生,其机制可能与抑制细胞线粒体凋亡途径有关.
-
大孔树脂法制备红花中羟基红花黄色素A
目的建立红花中羟基红花黄色素A(hydroxysaf lor yel ow A,HSYA)的制备方法。方法红花水提液浓缩后上D101型大孔树脂,在水和10%乙醇部分得到HSYA,采用高效液相色谱法(HPLC)进行了含量测定。结果从700g红花药材中分离得到6.5687gHSYA,纯度达到96.86%。结论此方法操作简单,可作为HSYA的制备工艺。
-
丹参素和羟基红花黄色素A促血管新生及抗大鼠心肌梗死作用研究
目的 探讨丹参素和羟基红花黄色素A促血管新生及抗大鼠心肌梗死的作用.方法 结扎冠状动脉左前降支法,建立大鼠心肌梗死模型,随机将造模成功的大鼠共75只进行分组,分别为假手术组、模型组、丹参素组羟基红花黄色素A组及联合组,各15只,于术后1～7 d尾静脉注射给药,1次/d,比较五组大鼠心功能.结果 模型组大鼠左心室收缩压、左心室舒张末期压力、左心室压力大变化速率与假手术组相比,差异明显,P<0.05;单用及配伍丹参素、羟基红花黄色素A组与假手术组和模型组左心室收缩压、左心室舒张末期压力、左心室压力大变化速率比较,差异明显,P<0.05;而联合丹参素、羟基红花黄色素A与单用相比,左心室收缩压、左心室舒张末期压力、左心室压力大变化速率差异不明显,P>0.05.结论 与丹参素和羟基红花黄色素A单用相比,丹参素和羟基红花黄色素A利于进一步改善大鼠心功能,研究价值较高.
-
二十味肉豆蔻片中羟基红花黄色素A的HPLC测定
目的：建立测定藏药20味肉豆蔻片中羟基红花黄色素A含量的高效液相色谱方法。方法：色谱柱：Kromasil-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm，大连依利特有限公司生产)；流动相：甲醇∶乙腈∶0.7％磷酸(V∶V∶V＝26∶2∶72)；流速：0.80 mL/min；检测波长：403 nm；柱温：室温。结果：羟基红花黄色素A在15.6～104μg(r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率99.81%, RSD为0.31%(n=6)。结论：该方法简便、快速、准确、重现性好，为藏药复方中测定羟基红花黄色素A提供了可靠的方法。
-
HPLC法同时测定舒心宁片中羟基红花黄色素A、阿魏酸的含量
目的:建立舒心宁片中羟基红花黄色素A和阿魏酸的质量控制方法.方法:采用反相高效液相色谱法迸行定量分析,用Waters×Bridge C8柱,乙腈-0.1％磷酸-四氢呋喃(18:80:2)为流动相,体积流量为1.0ml/min,检测波长为340 nm.结果:羟基红花黄色素A和阿魏酸的线性范围为11.06～110.60μg/ml,平均加样回收率为101.08％,RSD为1.97％(n=6);阿魏酸的线性范围为4.84～48.4μg/ml,平均加样回收率为99.85％,RSD为2.28％(n=6).结论:此法简便、准确,具有良好的重复性和回收率,适用于舒心宁片的质量控制.
-
十八味诃子利尿丸中小伞虎耳草的TLC鉴别及羟基红花黄色素A的HPLC测定
目的:建立十八味诃子利尿丸的定性定量方法.方法:通过薄层色谱对小伞虎耳草进行定性鉴别,采用HPLC测定羟基红花黄色素A的含量.结果:通过TLC法可鉴别小伞虎耳草活性成分原儿茶酸的特征斑点;羟基红花黄色素A在(0.46 ～2.31)μg范围内线性良好,r=0.999 9.结论:建立的鉴别方法专属性强,定量方法准确,可有效控制该药的质量.
-
HPLC 法测定七味红花殊胜丸中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立HPLC法测定七味红花殊胜丸中羟基红花黄色素A的含量.方法:采用InertsilOPS - SP(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液(26:2:72),流速1 mL·min -1,柱温25℃；进样量:10μL,检测波长为403nm.结果:羟基红花黄色素A在进样量范围为(0.0265～0.132)μg时,与峰面积线性关系良好；回收率为99.7％,RSD为0.7％.在选定的条件下,羟基红花黄色素A获得较好分离.结论:该方法简便可行、灵敏准确、能用于七味红花殊胜丸中羟基红花黄色素A的测定.
-
HPLC测定二十六味通经散中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立高效液相色谱法测定二十六味通经散中羟基红花黄色素A含量的方法.方法:色谱柱为Elite-ODS(5μm,4.6mm×250 mm),流动相:甲醇-水-磷酸(27730.05),流速:1.0mL/min,检测波长为403nm,柱温:室温.结果:羟基红花黄色素A线性浓度范围在0.0464μg～0.1392μg,r=0.9995,平均回收率为99.87%,RSD=0.10% (n=9).结论:本方法简单准确,重复性好,可作为二十六味通经散的质量控制方法.
-
HPLC法测定九味渣驯丸中的羟基红花黄色素A的含量
目的:建立九味渣驯丸中羟基红花黄色素A含量的测定方法.方法:采用HPLC法,色谱条件:依利特Hypersil - ODS C18柱(250mm×4.6mm)与Sunfire C18柱(250mm ×4.6mm)色谱柱；流动相:甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液(26(∶)2(∶)72)；检测波长:403nm；柱温30℃,流速:0.8mL/min.结果:羟基红花黄色素A回归方程Y =3024.10X +6.69,R=0.9999(n =6)；线性范围:(2.41 ～24.1)μg/mL,平均回收率为98.49％(RSD=1.64％,n=9).结论:本方法结果稳定、可靠,操作简便,可作为九味渣驯丸的质量控制标准.
-
吉红1号红花黄色素提取及成份分离鉴定
目的:提取吉红1号红花黄色素并分离鉴定其成份.方法:采用溶剂提取和柱层析法分离纯化红花黄色素,利用质谱和核磁共振仪确定分子结构.结果:从吉红1号提取出的黄色素中分离出来的成份有羟基红花黄色素A、红花黄色素B、6-羟基-3,6-二葡萄糖山奈酚甙、6-羟基-3-芦丁-6-葡萄糖山奈酚甙.
-
羟基红花黄色素A的提取及含量测定
目的:对羟基红花黄色素A进行提取工艺改进.方法:采用ZTC-Ⅱ型澄清剂甲、D-4020型大孔吸附树脂和Sephadex LH-20柱层析法,从红花中提取分离羟基红花黄色素A单体,采用高效液相色谱法(HPLC)测定羟基红花黄色素A的含量.结果:采用HPLC法测定羟基红花黄色素A的平均含量为97.3%.结论:此工艺具有成本低、纯度较高的优点,可以作为羟基红花黄色素A的提取工艺使用.
-
红花有效成分提取工艺研究
目的:筛选红花有效成分的提取工艺.方法:以RP-HPLC法测定红花提取物中羟基红花黄色素A为定量指标,应用单因素及均匀实验设计,筛选红花有效成分的提取工艺.结果:以水为提取溶媒,回流2次,每次20 min,每次加水量为药材量的13倍.每克红花药材中提取的羟基红花黄色素A含量高.结论:提取工艺稳定、可行.
-
澄清剂对红花水提液的除杂研究
目的:考察澄清剂对红花中羟基红花黄色素A含量的影响.方法:以反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定红花提取物中羟基红花黄色素A含量,应用正交实验设计,考察澄清剂对红花中羟基红花黄色素A含量的影响.结果:水提液浓缩比例为1:2,加入ZTC8 %澄清剂甲,羟基红花黄色素A含量为1.62%.结论:澄清剂对红花中羟基红花黄色素A含量的影响小.
-
大黄酸和羟基红花黄色素A单用及配伍对慢性肾病的保护作用研究
目的 通过对大鼠左侧输尿管结扎(UUO)的动物损伤模型,探讨大黄酸(rhein)和羟基红花黄色素A(HSYA)单用及配伍对肾脏保护的抗炎作用机制.方法 采用UUO造慢性肾病损伤动物模型,将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、rhein治疗组[100 mg/(kg·d)]、HSYA治疗组[50 mg/(kg·d)]和rhein[100 mg/(kg·d)]+HSYA[50 mg/(kg·d)]治疗组.给药14d后处死大鼠,采用试剂盒测定各组大鼠治疗前及治疗后血清中血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定治疗前及治疗后血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)表达水平,通过HE染色观察肾组织变化.结果 与模型组相比,rhein和HSYA单用及配伍组血清中Scr和BUN表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).TNF-α、IL-6、IL-1β及MCP-1表达亦明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01),同时肾组织病理学变化亦得到改善,且配伍的效果优于单用.结论 rhein和HSYA单用及配伍均能对UUO导致的炎症损伤发挥一定的肾保护作用,配伍效果更好,其作用机制与抗炎作用有关.
-
RP-HPLC法同时测定红花中羟基红花黄色素A与红花黄色素A的含量
目的:建立红花中羟基红花黄色素A与红花黄色素A的含量测定方法.方法:采用Akasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.4%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0～30 min,10%A;30～50 min,15%A;50～55 min,25%A;55～60 min,10%A),流速0.7 mL·min~(-1),检测波长403 nm,柱温30℃.结果:羟基红花黄色素A、红花黄色素A进样量的线性范围分别为0.451～1.05 μg(r=0.9993)和0.278～0.650 μg(r=0.9996)(n=5);平均加样回收率(n=6)分别为100.6%和103.0%.结论:本方法快速、灵敏,重复性好,适用于红花中羟基红花黄色素A与红花黄色素A的含量测定.
