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未经促排卵的未成熟卵母细胞行体外成熟治疗不孕症的临床研究
目的探讨未经任何药物刺激的未成熟卵母细胞行体外成熟(IVM)治疗不孕症的临床价值.方法 40例不孕患者接受54个IVM周期,其中多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者26例,经其他辅助生育技术失败14例.在未采用任何药物刺激的前提下,于月经周期的第9～12天,在超声引导下经阴道对两侧卵巢内直径≤10 mm的卵泡进行穿刺取卵.对取出卵母细胞于体外培养24～48 h,待第一极体出现后,进行卵母细胞质内单精子注射(ICSI),18 h后观察受精情况,继续培养24～48 h,直至胚胎移植,移植前行激光辅助胚胎孵化.结果 54个IVM周期中,有7个周期取消,取消率为13%;共移植周期47个,共获得未成熟卵母细胞857个,平均每周期18.2个.体外培养48 h后,卵母细胞成熟率为73.7%(632/857),正常受精率为75.3%(476/632),卵裂率为91.2%(434/476).移植日子宫内膜厚度平均为8.9 mm,平均移植胚胎4.3个(2～6个);1例生化妊娠,19例临床妊娠,每取卵周期的临床妊娠率为35%(19/54),每移植周期的临床妊娠率为40%(19/47).26例PCOS不孕患者共移植周期34个,1例生化妊娠,15例临床妊娠,每移植周期的临床妊娠率为44%(15/34). 结论未经促排卵药物刺激的卵母细胞行IVM用于治疗各种原因的不孕症,尤其是PCOS不孕患者,是一种有效的治疗方法.
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未成熟卵母细胞体外成熟培养治疗多囊卵巢综合征不孕患者的妊娠结局
新生儿肺炎死亡,其余至今未发现明显畸形.10例早产,占21.3%(10/47),36例足月产,占76.6%(36/47),1例过期妊娠.新生儿平均出生体重2972 g,低体重儿17例,占26.2%(17/65).结论 多囊卵巢综合征不孕患者行未成熟卵母细胞IVM培养后,虽然获得了较高的临床妊娠率,而且早期流产率、异位妊娠率、妊娠并发症发生率、围产儿死亡及新生儿缺陷的发生率等不高,但多胎妊娠、早产、低出生体重儿发生率较高.
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体内成熟与体外成熟的卵母细胞纺锤体位置及其与胚胎发育的关系
目的 研究体内成熟与体外成熟卵母细胞的纺锤体位置及其与胚胎发育的关系.方法 对134个体内成熟卵母细胞在卵母细胞胞质内单精子注射法(ICSI)操作时用纺锤体实时观察仪进行纺锤体位置的观察,体内成熟卵母细胞来自单纯因男性不育而进行ICSI治疗的患者15例(体内成熟组).另外对45个体外成熟的卵母细胞观察纺锤体位置,体外成熟卵母细胞来自因多囊卵巢综合征致不孕而进行治疗的患者5例(体外成熟组).纺锤体的位置按照其与第一极体之间的角度不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ级.并观察两组成熟卵母细胞的受精及其胚胎发育情况.结果 体内成熟组和体外成熟组患者的卵母细胞中可观察到纺锤体的分别占83.6%(112/134)和82.2%(37/45).体内成熟组患者卵母细胞纺锤体的位置Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ级分别为22.4%、55.2%、3.0%、3.0%、16.4%,体外成熟组则分别为17.8%、51.1%、8.9%、4.4%、17.8%,两组各级间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).在体内成熟组卵母细胞中,纺锤体离第一极体较近(Ⅰ级)者受精率较高(93.3%),显著高于其他各级(分别为73.0%、2/4、1/4、63.6%,P＜0.05).结论 体内成熟与体外成熟卵母细胞间纺锤体位置未见显著差异;纺锤体的位置与卵母细胞受精率有一定相关性.
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不同培养体系对猪卵母细胞体外发育潜力的影响
目的:研究猪卵母细胞体外成熟的佳条件,为用体细胞核移植的方法生产转基因克隆猪提供大量优质的MⅡ期卵母细胞.方法:采用猪卵母细胞体外成熟技术,研究了不同激素组合、猪卵泡液、半胱氨酸和颗粒细胞对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响.结果与结论:以15 U/ml PMSG+20 U/ml hCG成熟率高,为(70.0±3.30)%,显著高于15 U/ml FSH+30 U/ml LH、10 U/ml PMSG+10 U/ml hCG[成熟率分别为(45.6±5.10)%,(60.0±3.30)%],添加激素能促进卵母细胞的分裂,添加15%的猪卵泡液成熟率高,为(86.7±3.35)%,显著高于5%,10%和20%组[成熟率分别为(73.3±3.35)%,(71.2±5.08)%和(70.0±6.70)%],添加猪卵泡液促进了激活卵母细胞的分裂,在培养基中添加半胱氨酸和颗粒细胞,实验组和对照组成熟率差异不显著(P>0.05),但孤雌激活后卵裂率显著提高(P<0.05).
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赠卵IVF-ET技术相关伦理问题的再思考
赠卵体外受精-胚胎移植（IVF-ET）技术的发展为卵巢储备功能低下及卵巢功能衰竭的患者带来生育希望的同时也带来了许多新的伦理问题。解决和协调赠卵IVF-ET技术的发展与伦理原则之间的冲突是确保技术合理应用的前提。卵子供需失衡，赠卵者经济补偿额度设定，赠/受卵者条件，以及匿名双盲子代告知的制度是目前的热点伦理问题。针对上述问题系统的回顾文献，提出了相应的解决办法：增加配子捐赠途径同时发展卵子冷冻技术是目前解决卵子供需冲突的办法之一；赠卵补偿额度可根据地区发展水平以及卫生经济学研究结果决定；随着各中心妊娠率的提高可考虑适当放宽对捐赠者卵子个数的要求；赠卵IVF前对受卵者进行全面评估以保障受者和子代的利益；匿名双盲可于合适时机揭盲。
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IVF-ET失败后补救性ICSI的系统评价
目的 探讨常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)受精失败后补救性卵母细胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的临床价值.方法 计算机检索1990年1月—2009年2月Ovid MEDLINE,EMBASE及CNKI等数据库中关于IVF-ET受精失败后行补救性ICSI所有相关随机对照试验(RCT)研究文献,同时手工检索纳入文献的参考文献.对终获取的文献进行质量评价后行Meta分析.结果 终纳入文献10篇,7篇为补救性ICSI与正常ICSI的RCT研究,3篇为早期补救性ICSI与晚期补救性ICSI的RCT研究,文献质量B级及C级各5篇.①补救性ICSI组较正常ICSI组受精率、卵裂率及妊娠率低,异常受精率高,差异均有统计学意义(P＜0.05).②早期补救性ICSI组较晚期补救性ICSI组受精率、优质胚胎率及妊娠率高,差异有统计学意义(P＜0.05)；异常受精率低、卵裂率高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 晚期补救性ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率均较低,异常受精率高,妊娠结局不理想.早期补救性ICSI有取代晚期补救性ICSI的趋势,但尚需更多研究来证实其临床应用价值.
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丙泊酚复合芬太尼麻醉在经阴道超声引导取卵术中的应用
目的观察丙泊酚或丙泊酚复合芬太尼静脉麻醉用于门诊经阴道超声引导取卵术的临床效果及安全性.方法100例接受经阴道超声引导取卵术(ASAⅠ～Ⅱ级)患者,随机分为A、B两组(n=50),分别给予丙泊酚或丙泊酚复合芬太尼麻醉.记录麻醉意识消失和苏醒时间、丙泊酚维持麻醉用量和平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏氧饱和度(SpO2).结果意识消失时间A组为(58.8±3.8)s,B组为(57.7±5.2)s,无显著差异(p=0.283);苏醒时间A组为(6.0±0.6)min,B组为(5.7±0.4)min,有显著差异(P＜0.01).丙泊酚维持量B组为(0.20±0.03)mg/kg,显著低于A组的(0.52±0.05)mg/kg(P＜0.01).麻醉诱导后2min,A组MAP从(11.1±0.8)kPa降至(8.0±0.6)kPa(P＜0.05),B组MAP从(10.9±0.9)kPa降至(8.3±0.7)kPa(P＜0.05).A组麻醉诱导后26例(52%)SpO2降至90%以下,显著低于B组44例(88%)(P＜0.001).结论丙泊酚复合小剂量芬太尼可显著减少丙泊酚的维持量,缩短苏醒时间,有利于病人恢复及早期离院.
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非休眠期成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞用于核移植构建重组胚
目的研究非休眠期成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞作为供体,以体外成熟去核兔卵母细胞作为受体进行核移植构建重组胚胎的可行性及囊胚形成率. 方法首先利用新西兰兔骨髓和脂肪为来源分别培养骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞,然后用他们作为核供体,采用卵细胞胞质内直接注射法构建重组胚胎,7 d后比较囊胚形成率. 结果核移植操作后卵细胞存活率达80.0%,骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞作为供体重组胚胎囊胚形成率分别为88/522 (16.9%)和73/464 (15.7%), (P>0.05, Yates corrected). 结论处于非休眠期的成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞移植到去核卵母细胞后能够进行早期胚胎发育,两者囊胚形成率无明显差别.
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玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法保存人MⅠ期卵母细胞的效果比较
目的:探讨玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法对人未成熟卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响.方法:体外受精-胚胎移植中获得的251个MⅠ期卵母细胞随机分3组,第1组94个先玻璃化冷冻保存,第2组63个先慢速程序冷冻保存,两组冻融后的未成熟卵母细胞再进行ⅣM,用ICSI技术对成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养.第3组94个MⅠ期卵母细胞先进行ⅣM,再进行玻璃化冷冻保存,与第1组先玻璃化冷冻保存再ⅣM的顺序不同,冻融后同样用ICSI技术对获得的成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养.结果:玻璃化冻融组复苏存活率、体外成熟率、受精率、及卵裂率均高于慢速程序冻融组(P均＜0.05);先玻璃化冷冻再ⅣM与先ⅣM再玻璃化冷冻的复苏存活率、体外成熟率、可用卵比率、受精率及卵裂率无统计学意义(P均＞0.05).结论:玻璃化冻融人未成熟卵母细胞能获得更好的冷冻保存效果;玻璃化冷冻与ⅣM的顺序不影响未成熟卵母细胞的利用.
