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氯化锂毛果芸香碱癫(疒间)鼠模型B1与B2激肽受体表达研究
目的 检测B1与B2激肽受体在氯化锂毛果芸香碱致癫(疒间)鼠模型海马中的表达变化并探讨其作用机制. 方法 选择清洁雄性Wistar大鼠35只,随机分为空白对照组5只;实验组15只,将氯化锂毛果芸香碱腹腔注射法制作癫(疒间)模型,分为6 h,5、60天时间点,每时间点5只;生理盐水对照组15只,腹腔注射剂量相等的生理盐水,按实验组相应的时间点,每时间点5只.相应时间点处死大鼠取海马标本,应用RT-PCR方法检测海马齿状回、CA1、CA3区的B1与B2激肽受体的表达变化,并进行组间比较. 结果 6 h、5天时间点实验组较生理盐水对照组B1激肽受体mRNA表达均显著上调,差异有显著性意义(P＜0.05),60天时差异无显著性意义(P＞0.05);实验组各时间点均较60天生理盐水对照组B2激肽受体mRNA表达显著上调,差异有显著性意义(P＜0.05);生理盐水对照组与空白对照组比较,B1与B2激肽受体mRNA表达差异无显著性意义(P＞0.05). 结论 B1与B2激肽受体mRNA表达失衡在癫(疒间)的发生、发展过程中可能起着重要的作用.
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人组织激肽释放酶基因家族研究进展
人组织激肽释放酶(HK)是一组分泌型丝氨酸水解酶,由激肽释放酶(KLK)基因编码,有15个家族成员,是迄今所知人类丝氨酸蛋白酶大的家族.HK主要在前列腺、乳腺、卵巢以及睾丸等产生类固醇激素的组织或激素依赖性的组织中表达~([1]),可分为组织激肽释放酶和血浆激肽释放酶两大类,这两种激肽释放酶在相对分子质量大小、底物特异性、免疫学特性、基因结构以及释放的激肽类型等方面都存在着显著的差异~([2]).
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家兔心房肌细胞环-磷酸腺苷动态变化的实时评价
目的:探索实时评价心房肌细胞内环-磷酸腺苷动态变化的方法,为细胞内第二信使代谢水平分析提供可靠的实验数据.方法:实验于2004-04/2005-12在吉林省延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部完成.①采用大耳白家兔32只,建立跳动心房灌流模型,跳动心房稳定60min后,4℃下每2min收集灌流液样本.②采用固定心房跳动频率(1.3 Hz)的方法,每2 min收集1个灌流液样本,12 min为1个循环.在1个对照循环之后,处理垂体腺苷酸环化酶激活肽(100 nmoL/L)或在非选择性磷酸酯酶抑制剂(1.0 mmol/L)存在下再处理垂体腺苷酸环化酶激活肽1个循环,观察心房组织环-磷酸腺苷含量与逸出量的关系.③1个循环对照之后,给予30 nmol/L的垂体腺苷酸环化酶激活肽或不同浓度的垂体腺苷酸环化酶激活肽(1,10,100 nmol/L,每种浓度之间穿插2个循环的恢复期),实时观察心房肌细胞环-磷酸腺苷动态变化的特点.结果:①垂体腺苷酸环化酶激活肽对心房组织生成和逸出环-磷酸腺苷的影响:用垂体腺苷酸环化酶激活肽处理12 min后,环-磷酸腺苷含量在组织和灌流液中分别增加到(42.18±11.17)nmol/g和(204.17±44.50)fkat/g,与对照值相比差异明显(P＜0.05).当给与非选择性磷酸酯酶抑制剂+垂体腺苷酸环化酶激活肽后,环-磷酸腺苷含量在组织和灌流液中分别增加到(149.90±13.87)nmol/g和(747.00±65.83)fkat/g(P＜0.01).且灌流液环-磷酸腺苷逸出量与组织环-磷酸腺苷含量之间存在线性关系(Y=0.291 8X-0.118,R2=0.880 9;P＜0.01).②垂体腺苷酸环化酶激活肽促进心房环-磷酸腺苷逸出量的情况:随着垂体腺苷酸环化酶激活肽浓度的增加,环-磷酸腺苷逸出量也随之增多,10,100 nmol/L垂体腺苷酸环化酶激活肽的逸出峰值分别为(247.83±50.83),(254.00±53.50)fkat/g,均显著高于对照值和1 nmol/L垂体腺苷酸环化酶激活肽[(66.00±7.50),(75.50±7.50)fkat/g;P＜0.01],呈时间、剂量依赖性.结论:跳动心房灌流模型中环-磷酸腺苷逸出量是一项能够反映该组织生成环-磷酸腺苷变化的指标,实时测定心房灌流液中环-磷酸腺苷逸出量能够实时评价心房肌细胞内环-磷酸腺苷的生成变化.
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呼吸道免疫防御和免疫增强剂
机体受细菌等致病微生物侵入后,通过先天性免疫和获得性免疫调动免疫效应细胞和免疫分子清除病原体.经呼吸道侵入的病原体首先受鼻、咽和气管-支气管的机械屏障过滤,并沉积于管腔内黏液纤毛毯,经喷嚏、咳嗽排出,或经由补体、抗体、激肽类等和巨噬细胞、中性粒细胞等灭活和清除.
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激肽释放酶-激肽系统与癫痫发生
激肽释放酶-激肽系统是人体内重要的内源性通路，具有调节包括血压和炎性反应在内的一系列生理和病理过程的作用。激肽释放酶-激肽系统与中枢神经系统疾病的关系也日益引起了学者的关注，尤其是癫痫。研究发现，在经匹罗卡品诱导、听觉点燃或杏仁核点燃的动物模型中，诱导型缓激肽受体B1和固有型缓激肽受体B2的表达均显著上调，或者出现缓激肽受体B1/B2的相对比例升高。颞叶癫痫及海马硬化患者海马锥体神经元中的缓激肽受体B1和B2以及星形胶质细胞中的激肽释放酶1的表达均显著上调。由此提示，缓激肽受体B1可能具有促癫痫发生的作用，缓激肽受体B2则可能具有神经保护的作用。激肽释放酶-激肽系统在癫痫中的作用机制可能与血脑屏障破坏、促进兴奋性氨基酸释放及介导炎性反应等有关，并可能成为癫痫防治的新靶点。本文对激肽释放酶-激肽系统与癫痫发生的新研究进展进行综述。
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NPY和PACAP在肾上腺髓质增生中的表达及意义
[目的]探讨神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)和垂体腺苷酸环化酶活化多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)在肾上腺髓质增生(adrenal medullary hyperplasia,AMH)肾上腺组织中的表达与肾上腺髓质增生的关系.[方法]采用免疫组化SP法和图像分析技术对8例正常肾上腺组织20例肾上腺髓质增生中NPY和PACAP进行检测.[结果]免疫组织化学结果显示,NPY、PACAP在肾上腺髓质增生中阳性细胞面积、灰度明显高于正常肾上腺组织(P＜0.01).NPY、PACAP与尿儿茶酚胺(catecholamine,CA)存在正相关关系.[结论]NPY、PACAP在肾上腺髓质增生发生发展中可能有重要意义,二者在AMH中存在是功能性的,可能代表AMH的分子基础,这可能是治疗和诊断AMH新的靶点.
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实验性大鼠内囊出血并应激性胃溃疡血浆和胃组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽及血管活性肠肽含量变化及意义
目的 研究大鼠内囊出血并应激性胃溃疡出血时血浆、胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽、血管活性肠肽含量变化及作用.方法 建立大鼠内囊出血并应激性胃溃疡模型,测定血浆及胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽、血管活性肠肽含量.结果 内囊出血并应激性胃溃疡大鼠组血浆垂体腺苷酸环化酶激活肽、血管活性肠肽含量明显高于对照组(P＜0.01),而胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽、血管活性肠肽含量明显低于对照组(P＜0.01).结论 垂体腺苷酸环化酶激活肽、血管活性肠肽在内囊出血后应激性胃溃疡形成过程中起重要作用.
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抗胰蛋白酶原激活肽单克隆抗体的制备与鉴定
目的制备抗胰蛋白酶原激活肽(TAP)单克隆抗体(TAP McAb),并进行初步鉴定.方法将人工合成的TAP与血蓝蛋白(KLH)交联作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,有限稀释法筛选出能稳定分泌TAP McAb的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体进行鉴定.结果细胞融合率85.03%,经4次克隆化后获得10株能稳定分泌TAP McAb的杂交瘤细胞株,经免疫球蛋白亚类鉴定,除1株为IgG1外,其余9株均为IgM类;染色体数目为92～101条;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:20～1:160,腹水效价为1:3 200 ～1:25 600;特异性试验表明,抗TAP单克隆抗体与牛血清白蛋白(BSA)、人白蛋白、胰蛋白酶、淀粉酶均无交叉反应;中和抑制试验表明,培养上清及腹水中的抗体能明显被合成多肽TAP及为急性胰腺炎患者尿液所中和;对其中5株细胞株进行相对亲和力分析结果表明,2C3>8C6>6H7>6F7>8B10.结论成功制备了抗TAP单克隆抗体,为建立敏感、特异的TAP免疫检测方法奠定了基础.
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心性水肿研究治疗进展
心性水肿主要指右心衰竭后出现的水肿.临床上除水肿外,尚伴有心悸、气喘、咳嗽、紫绀等症状.现在认为肾素-血管紧张素系统(RAS)在调节心源性水肿的水钠潴留中起重要作用,虽然在心性水肿时RAS激活伴有其它具有利尿作用的内分泌细胞因子如利钠肽类、前列腺素、激肽类、肾上腺髓质素(a-drenamedallin,Adm)等分泌的增加,但不能抵消RAS的水钠潴留作用而引起水肿.因此在心性水肿的药物治疗方面,现主张除采用传统的强心药利尿药外,加用肾上腺髓质素、利钠肽类等药物以增强其利尿效应.本文就心性水肿的发病机制及西医治疗现状进行了综述.
