首页 > 文献资料
-
Kv1.5钾通道与心房颤动
心房颤动是为常见的心律失常之一.尽管目前有很多药物正应用于心房颤动的治疗,如多非利特、胺碘酮、索他洛尔、普罗帕酮、氟卡尼等,但是人们仍然希望得到一种更为安全有效的抗心律失常药物.理想的治疗心房颤动的药物应是具有高度的心房肌细胞选择性,可以终止或延缓心房颤动的发生,而没有延长Q-T间期或负性肌力的作用.电压门控钾离子通道Kv1.5被认为是实现心房高度选择性理想的药物作用靶点.临床及动物研究证实,Kv1.5钾通道是心房电重构的基础,其阻滞剂可以选择性延长心房有效不应期而终止心房颤动.本文旨在对Kv1.5钾通道的历史、结构、功能和新的一些阻滞剂做一综述.
-
替米沙坦对电压依赖性的Kv1.3和Kv1.5通道电流阻断作用的实验研究
目的 通过观察替米沙坦对电压依赖性的Kv1.3和Kv1.5的阻断作用,探讨替米沙坦对此类通道的阻断可能具有的临床作用.方法 使用双电极电压钳技术记录表达于非洲爪蟾卵母细胞的Kv1.3和Kv1.5钾通道电流,不同浓度灌流观察其对电流影响.结果 (1)替米沙坦浓度依赖性的阻断Kv1.3通道,其阻断的IC50是2.05 μmol/L.替米沙坦对Kv1.3电流的阻断具有电压依赖性.(2)替米沙坦浓度依赖件的阻断Kv1.5通道,其阻断的IC50是2.37 μmol/L.替米沙坦对Kv1.5电流的阻断具有更显著的电压依赖性.结论 替米沙坦阻断开放状态的Kv1.3可能是其发挥免疫调节和抗动脉粥样硬化作用的机制之一.替米沙坦对开放状态的Kv1.5钾通道的阻断可能是其减少心房颤动发生率的作用机制之一.
-
骨肉瘤Kv1.5钾离子通道表达意义的研究
目的 研究表明,Kv1.5钾离子通道参与了多种肿瘤的生物学行为,但其在骨肉瘤中的表达和作用尚未明确.本研究拟检测Kv1.5钾离子通道在骨肉瘤中的表达,并探讨小干扰RNA(small interfering,siRNA)沉默Kv1.5表达后对骨肉瘤细胞增殖、周期和凋亡的影响及可能的调控机制.方法 实验分组,Kv1.5-siRNA转染细胞为实验组,control-siRNA转染细胞为对照组,未处理细胞为空白组.采用siRNA抑制Kv1.5的表达,并分别采用CCK-8法、克隆形成率、流式细胞仪和Tunel法检测MG-63细胞增殖、生长、周期和凋亡的变化.采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测骨肉瘤细胞中周期和凋亡相关基因的表达水平.结果 Kv1.5在骨肉瘤细胞和组织中均异常高表达.CCK-8法检测结果示,Kv1.5-siRNA组细胞增殖水平为(53.87±5.91)％,与control-siRNA组的(99.14±7.87)％相比差异有统计学意义,Z=-3.49,P＜0.001;与空白组(100.00±8.37)％相比差异有统计学意义,Z=-3.57,P＜0.001.克隆形成实验结果示,Kv1.5-siRNA组克隆形成数为164.00±7.66,与control-siRNA组(223.20±11.41)相比,Z=-2.61,P=0.008;与空白组(228.20±12.62)相比,Z=-2.40,P=0.016.流式细胞周期结果示,Kv1.5-siRNA组G0/G1期所占比例为(68.81±0.55)％,与control-siRNA组(41.22±0.61)％相比,Z=-2.15,P=0.031;与空白组(40.79±0.52)％相比,Z=-2.31,P=0.029.流式细胞凋亡结果示,Kv1.5-siRNA组(30.23±1.74)％与control-siRNA组(14.10±1.27)％相比,Z=-2.04,P=0.039;与空白组(12.85±1.02)％相比,Z=-2.09,P=0.035.Tunel法结果示,Kv1.5-siRNA组凋亡指数为(35.20±3.14)％,与control-siRNA组(8.03±1.50)％相比,Z=-2.41,P=0.015;与空白组(8.22±1.32)％相比,Z=2.25,P=0.019.沉默Kv1.5表达可明显下调骨肉瘤中Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、Bcl-2和Bik基因的表达,同时上调p21、p27、Bax、Bcl-XL和Caspase-3基因的表达,与对照组相比,P值均＜0.05.结论 Kv1.5钾离子通道参与了骨肉瘤细胞增殖、周期和凋亡的过程,其作用机制可能与调控周期依赖激酶和Bcl-2家族的相关因子有关.
-
心房颤动与Kv1.5钾通道阻滞剂及其研究进展
心房颤动是临床常见的心律失常,药物是心房颤动的主要治疗方法.胺碘酮和心律平等药物虽然可以治疗和转复心房颤动,但长期应用会引起恶性心律失常和心脏外的副作用.抑制Kv1.5钾通道电流,可选择性延长心房肌动作电位时程及有效不应期,改善心房肌的电重构和组织重构.近年来关于Kv1.5钾通道及其阻滞剂的研究迅速发展并引起广泛关注.为进一步探讨Kv1.5钾通道是否可能成为心房颤动的治疗靶点,我们对目前相关研究进展作一综述.
关键词： 心房颤动 Kv1.5钾通道 Kv1.5钾通道阻滞剂 -
兔血管平滑肌延迟整流钾通道研究及其与克隆Kv1.5通道的电生理特性比较
本文用膜片箝全细胞技术比较研究了单个兔肺动脉血管平滑肌细胞上延迟整流钾通道与克隆Kv1.5通道的电生理及药理学特性.将平滑肌细胞箝制在-40mV,以10 mV的步距阶跃去极化(0～60mV)可产生一系列快速上升的外向电流,几无衰减,其激活曲线的V1/2为27.2 mV.灌流液中加人100mmol/L TEA和1 mmol/L 4AP,电流幅度均明显减小,细胞外Ca2+水平由1.5 mmol/L降至0.5mmol/L甚至0 mmol/L时,该电流无明显改变.而在HBK7细胞(克隆Kv1.5通道),箝制在-80mV,以10mV的步距阶跃去极化(-30～+60mV),可产生一系列的快速上升的外向电流,激活更快,无衰减,其激活曲线的V1/2为0.8 mV.4AP抑制Kv1.5的IC50为7.3 mmol/L,呈现频率和使用非依赖性;TEA30,100,300 mmol/L分别使该电流幅度下降28.6%,37.4%,46.3%,Quinidine0.1和1 mnol/L使其下降29.7%,37.6%.研究表明,我们记录到急性分离的兔血管平滑肌细胞延迟整流钾通道,它的电生理及药理学特性与克隆的Kv1.5延迟整流钾通道存在明显差别.
-
电压门控钾离子通道Kv1.5与肿瘤
电压门控钾离子通道Kv1.5广泛表达于多种类型肿瘤并参与肿瘤细胞增殖、凋亡、周期等过程.某些抗肿瘤药物可通过影响Kv1.5通道的表达进而影响肿瘤的生物进程.Kv1.5通道是肿瘤治疗的新靶点,研究Kv1.5通道可以进一步了解肿瘤细胞发生、发展的机制,并有助于研制出新的抗肿瘤药物,为肿瘤治疗提供新的更好的方法.
-
替米沙坦对表达在卵母细胞上Kv1.5通道的抑制效应
目的:研究替米沙坦对表达在卵母细胞上的克隆人类Kv1.5通道的作用,探讨其在心脏复极中的潜在效应.方法:在非洲爪蟾卵母细胞上异源表达克隆人类Kv1.5通道基因,使用双电极电压钳技术记录全细胞电流,检测药物对Ikur电流的影响.结果:替米沙坦以电压依赖性和浓度依赖性方式抑制Kv1.5通道电流,且对峰电流及1.5 s末端电流的抑制效应不同,在1μmoL/L浓度下,抑制效应分别达到(7.75±2.39)%和(52.64±3.77)%,其半抑制浓度(IC50)分别为(2.25±0.97)μmol/L和(0.82±0.39)μmol/L.替米沙坦对通道的稳态失活没有显著改变,在对照条件下,V1/2的值为(14.47±3.71)mV,斜坡因子k为(23.24±3.86)mV;在1μmol/L替米沙坦作用下,V1/2和k的值分别为(14.38±4.62)mV和(26.26±5.04)mV(n=6,P>0.05).同时,替米沙坦显著加速了Kv1.5通道的失活.在对照条件下,Kv1.5通道的失活慢时间常数是(693.74±23.16)ms,在应用1 μmol/L替米沙坦后,其失活的慢时间常数下降为(523.85±10.28)ms(n=5,P<0.05).结论:替米沙坦在临床有效浓度范围内能显著抑制表达在卵母细胞上的Ikur电流,提示它兼有选择性阻滞Kv1.5通道的作用.
-
西地那非抑制高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管重构和上调肺血管Kv1.5mRNA表达
目的 观察高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管结构重建和肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达变化,探讨口服西地那非对高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管重构及肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达的影响.方法 将27只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=9)、分流组(n=9)、分流+西地那非组(n=9).后两组大鼠通过腹主动脉一下腔静脉分流术建立高肺血流肺动脉高压动物模型.对分流+西地那非组大鼠每天灌胃枸橼酸西地那非10 mg·kg-1·d-1,对照组和分流组每天灌胃等量生理盐水.11周后,测定肺动脉平均压(mPAP)及肺动脉收缩压(sPAP);观察右室肥厚程度,计算右室重量/(左室+室间隔)重量比值,以[RV/(LV+S)]表示;计算肺中、小血管肌型动脉相对中膜厚度(RMT);采用实时荧光RT-PCR定量法观察大鼠肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达.结果 与对照组比较,分流组大鼠mPAP、sPAP、RV/(Lv+S)比值显著增高(P<0.01),RMT显著增加(P<0.01),肺血管Kv1.5mRNA表达水平显著降低(P<0.01).与分流组相比,分流+西地那非组mPAP、sPAP、RV/(LV+S)比值显著低于分流组(P<0.01),RMT显著降低(P<0.01),肺血管Kv1.5mRNA表达水平显著升高(P<0.01).分流+西地那非组mPAP、sPAP、RV/(Lv+S)比值和RMT与对照组比较,差异均无显著性意义(P>0.05);两组大鼠Kv1.5 mRNA表达水平也无显著性差异(P>0.05).结论 高肺血流肺高压大鼠肺血管发生重构并且其肺血管Kv1.5mRNA表达下降,而口服枸橼酸西地那非抑制高肺血流肺高压大鼠肺血管重构和上调肺血管Kv1.5mRNA表达.
-
缬草提取物8-羟基松脂醇苷对Kv1.5钾通道电流的影响
目的 探讨缬草提取物8-羟基松脂醇苷对Kv1.5钾通道电流的影响.方法 以转基因Kv1.5HEK293细胞为受试对象,采用膜片钳技术观察10,30 μmol·L-18-羟基松脂醇苷对转基因Kv1.5HEK293细胞电流的影响.结果 8-羟基松脂醇苷浓度依赖性减少Kv1.5HEK293细胞电流,电流值从(148.3±13.0)PA/PF分别降至(109.4±4.4)PA/PF和(78.6±11.3)PA/PF,抑制率分别为28.5% 和37.1%.结论 8-羟基松脂醇苷对转基因Kv1.5 HEK293细胞电流有抑制作用,且呈浓度依赖性,可以部分解释缬草抗心律失常作用机制.
关键词： 8-羟基松脂醇苷 缬草 Kv1.5HEK293细胞 Kv1.5钾通道 -
慢性心房颤动心房肌中FHL2的表达
目的 研究风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中FHL2蛋白水平的变化,探讨FHL2改变在慢性心房颤动中的作用.方法 按性别、年龄、二尖瓣狭窄程度、左房大小及肺动脉压力配对,收集接受瓣膜置换手术的风湿性二尖瓣狭窄患者共28例(窦性组14例,房颤组14例).在建立体外循环时采取右心耳组织及部分慢性心房颤动患者左心耳组织(7例),用Western blot法检测FHL2蛋白在心房肌中的表达水平.结果在右心耳水平,房颤组FHL2蛋白(0.68±0.28 vs 0.51±0.18,t=2.488,P=0.027)表达水平较窦性组明显上调.房颤组FHL2蛋白的表达量在右心耳与左心耳差异无统计学意义(0.58±0.22 vs 0.50±0.13,t=0.984,P=0.363).结论 FHL2蛋白在风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中表达上调,其可能参与慢性心房颤动的发生及维持.而FHL2蛋白在慢性心房颤动左、右心房肌的表达无明显差异,表明右心耳标本替代左心耳在本研究中的结果是可信的.
