首页 > 文献资料
-
雌激素减轻β-淀粉样蛋白所致PC12细胞毒活性的机制
目的 观察17β-雌激素对β-淀粉样蛋白25～35片段(Aβ25～35)所致PC12细胞毒活性影响的可能机制.方法 用逆转录一聚合酶链反应(RTPCR)技术,观察雌激素对Aβ25～35损伤的PC12细胞的Bcl～2mRNA及Bax mRNA表达的影响.结果 用Aβ25～35处理PC12细胞24h,与对照组相比,Bcl～2mRNA的表达水平降低,Bax mRNA的表达水平升高;而Aβ25～35加17β-雌激素引起Bcl～2mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组增高,Bax mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组降低.结论 17β-雌激素在Aβ25～35所致PC12细胞毒性的神经保护作用中,其机制是通过上调Bcl～2mRNA的表达与下调Bax mRNA的表达来实现的.
-
CoQ10对DA损伤PC12细胞保护作用的实验研究
目的:探讨辅酶Q10(CoQ10)在以PC12细胞建立的多巴胺神经元损伤细胞模型中的作用.方法:实验于2007年4月～2008年4月在辽宁医学院科技实验中心进行.在体外培养PC12细胞的条件下,加入多巴胺以损伤PC12细胞.同时加入一定浓度的CoQ10,检测细胞的生长活力及培养液MDA含量,比较多巴胺损伤的PC12细胞在加与不加CoQ10时损伤的差异.结果:CoQ10+多巴胺组PC12死亡率及MDA含量较多巴胺组显著降低(P<0.05).结论:CoQ10能减轻多巴胺对PC12细胞的损害.
关键词： CoQ10 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 帕金森病 细胞凋亡 -
麦芽酚铝对PC12细胞钙稳态和凋亡的影响
目的 探讨麦芽酚铝[aluminum maholate,Al(mal)3]染毒对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cells,PC12)钙稳态及凋亡的影响.方法 将PC12细胞随机分为0(对照组)、50、100、200、400μmol/L Al(mal)3染毒组,分别培养12、24、48 h,采用CCK-8试剂盒检测PC12细胞活性,以流式细胞术检测PC12细胞内游离钙离子荧光强度[Ca2+]i及细胞凋亡率.结果 随着AI(mal)3染毒时间和染毒剂量的增加,PC12细胞活性逐渐下降,细胞[Ca2+]i与细胞总凋亡率逐渐升高.除50μmol/L Al(mal)3染毒12、24 h及100μmol/L Al(mal)3染毒12h外,其他各剂量组染毒PC12细胞12、24、48 h后细胞活性均低于对照组,细胞[Ca2+]i均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).400 μmol/L Al (mal)3染毒PC12细胞12h,200、400 μmol/L Al(mal)3染毒24 h,100、200、400 μmol/L Al(mal)3染毒48 h后,PC12细胞总凋亡率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 钙超载可能是M(mal)3引起凋亡发生的主要机制.
关键词： 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 麦芽酚铝 钙离子 凋亡 -
新霉素抑制PC12细胞烟碱受体介导的反应
新霉素是一种氨基甙类抗生素, 在细胞水平可以抑制磷脂酶C介导的信号转导系统.本研究采用全细胞膜片钳技术, 以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)为标本, 观察了新霉素对乙酰胆碱诱发电流(IACh)的影响.药理学鉴定表明, PC12细胞上的IACh是通过ACh激动烟碱受体引起的.钳制电压为-80 mV时, ACh (30 μmol/L)诱发一内向电流; 细胞外同时给予新霉素(0.01～1 mmol/L)和ACh (30 μmol/L), 可显著抑制IACh峰值.此抑制作用迅速、可逆, 呈浓度依赖性.用新霉素预处理细胞3～8 min不影响其对IACh的抑制作用.用外源性蛋白激酶C (PKC)激动剂激活PKC, 同样可抑制IACh, 而细胞内透析PKC抑制剂(PKCI 19-31, 0.1～5 μmol/L)不影响新霉素对IACh的抑制作用.以上结果提示, 新霉素对PC12细胞的IACh有抑制作用, 这是一种与磷脂酶C 阻断无关的药理学效应.
关键词： 氨基甙类抗生素 烟碱受体 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 膜片钳技术 -
雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用
目的 雷帕霉素可通过提高自噬水平,改善阿尔茨海默病特征性病理,但其内在机制尚需进一步研究.文中旨在探讨雷帕霉素对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用机制. 方法 取对数生长期细胞PC12分为5组:对照组(等量无血清DMEM)、模型组及10μmol/L雷帕霉素组、40μmol/L雷帕霉素组、160μmol/L 雷帕霉素组(分别用加入10、40、160μmol/L的雷帕霉素),除对照组外,其余各组均用20μmol/L的 Aβ25-35作用于PC12细胞构建细胞损伤模型.结果 ①与模型组细胞存活率[(51.47±2.59)%]、凋亡率[(52.22±2.33)%]比较,10、40、160μmol/L 雷帕霉素组、对照组细胞存活率[(54.64±2.42)、(64.79±2.91)、(56.50±2.55)、(99.98±0.73)%]明显升高,凋亡率[(45.33±2.83)、(36.89±2.85)、(48.00±2.83)、(3.33±2.45)%]明显降低(P<0.05).②模型组p-PKB表达量为0.33±0.01,p-mTOR表达量为1.97±0.05,p-tau表达量为2.09±0.19;与模型组上述指标比较,10、40、160μmol/L 雷帕霉素组、对照组p-PKB表达量(0.37±0.01、0.42±0.01、0.40±0.01、0.44±0.02)明显升高(P<0.05),而p-mTOR表达量(1.64±0.05、0.66±0.04、0.35±0.01、0.62±0.01)和p-tau表达量(2.02±0.15、1.79±0.05、1.86±0.06、1.53±0.04)明显降低(P<0.05). 结论 雷帕霉素能提高Aβ25-35损伤的PC12细胞的存活率,降低细胞凋亡率,对Aβ25-35致PC12细胞损伤有保护作用.其机制可能与雷帕霉素抑制p-mTOR,负反馈调节PI3K/PKB/mTOR信号转导通路,减少tau蛋白过度磷酸化有关.
关键词： 雷帕霉素 β淀粉样蛋白 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 蛋白激酶B 磷酸化Tau蛋白 -
组胺对β淀粉样蛋白诱导PC12细胞阿尔茨海默病体外模型的保护作用
目的:观察组胺对β淀粉样蛋白1-42(Aβ42)诱导大鼠肾上腺嗜铬瘤(PC12)细胞损伤的改善作用及其相关的受体亚型.方法:运用PC12细胞,采用Aβ42构建阿尔茨海默病体外模型,以形态学和四甲基偶氮唑盐比色法为指标,观察细胞损伤和药物的改善作用.结果:Aβ42浓度依赖性诱导细胞损伤.组胺在10-7、10-6 mol/L浓度时能显著改善Aβ42(5 μmol/L)作用24 h引起的细胞损伤,10-6 mol/L保护作用大.组胺10-6 mol/L的保护作用能被组胺H2受体拮抗剂zolantidine,H3受体拮抗剂clobenpropit所逆转,但不能被H1受体拮抗剂苯海拉明所拮抗.结论:组胺能减弱Aβ42诱发的细胞损伤,可能与组胺H2,H3受体有关.
-
无肋马尾藻多肽的制备及其促进大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)分化特性的研究
目的 从无肋马尾藻中提取分离一种生物活性多肽(SFPP),分析其理化特性及对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞分化的促进作用.方法 采用葡聚糖凝胶层析分离和透析脱盐纯化无肋马尾藻的水浸提物,应用Tricine-SDS-PAGE电泳和差示扫描量热法(DSC)分析SFPP的分子量和热变性温度,检测其对PC12细胞分化的促进作用.结果 与结论提纯的SFPP分子量为17.0 kD,热变性温度是51.4℃;SFPP对PC12细胞有类似神经生长因子(NGF)作用,这种效果与浓度有关,并且和NGF存在协同效用.
关键词： 无肋马尾藻多肽 葡聚糖凝胶层析 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 神经生长因子 -
低频磁刺激对PC12细胞分化的影响
目的探讨磁刺激对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)分化及功能的影响.方法应用Magstim220型磁刺激仪分别刺激单纯PC12细胞组(M组)和PC12+神经生长因子(NGF)组(MN组),刺激强度为0.38 T、1.14 T、1.9 T(总强度1.9 T),频率为1 Hz,每天于10 s内连续刺激10次,连续刺激9 d.每隔1 d观察细胞增殖和突起生长的情况,于倒置显微镜下随机取20个视野拍照并计数,于第3天、第6天、第9天留取细胞培养液检测多巴胺水平.结果在1.14 T刺激强度下细胞突起显著增加;多巴胺水平在刺激强度为0.38 T时达高峰.结论低频磁刺激可促进PC12细胞的分化及多巴胺分泌;1.14 T、1.9 T刺激强度时联合应用NGF可提高PC12细胞的分化.
关键词： 磁刺激 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 多巴胺 细胞分化 -
SIRT1对激活型小胶质细胞BV-2毒性损伤PC12细胞的保护作用及机制研究
目的 探讨沉默信息调控因子1(SIRTl)在激活型小胶质细胞介导PC12细胞损伤中所起的作用及相关机制. 方法 体外常规培养BV-2小胶质细胞和PC12细胞,ELISA检测1μg/mL脂多糖(LPS)作用BV-2细胞6、12、24 h后上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平;MTT检测LPS与BV-2细胞共培养上清对PC12细胞存活率的影响,同时设对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组;MTT检测SIRT1激活剂藜芦醇(5、10、25、50、100 μmol/L)、SIRT1抑制剂尼克酰胺(5、10、25、50 mmol/L)对PC12细胞存活率的影响,以筛选二者的干预浓度.实验分对照组、LPS+BV-2细胞共培养上清液组、白藜芦醇干预组、尼克酰胺干预组,分别加入培养基、LPS+BV-2细胞共培养上清液、50 μmol/L白藜芦醇、25 mmol/L尼克酰胺,培养18h后MTT检测4组细胞存活率,Western blotting检测细胞内SIRT1、乙酰化p53的表达水平. 结果 LPS作用BV-2细胞6、12、24 h后IL-6、TNF-α分泌量均依次增高,差异有统计学意义(P＜0.05);MTT比色显示与对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组比较,LPS+BV-2细胞共培养上清组PC12细胞存活率下降,差异有统计学意义(P＜0.05);1 00μmol/L白藜芦醇组、50 μmol/L尼克酰胺组细胞存活率较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05),因此选择50 μmol/L白藜芦醇、25 μmol/L尼克酰胺进行实验;与对照组比较,LPS+BV-2细胞共培养上清组细胞存活率降低,SIRT1的表达下降,乙酰化p53的表达上升,差异有统计学意义(P＜0.05),与LPS与BV-2共培养上清组比较,白藜芦醇干预组细胞活性上升,SIRT1的表达水平较高,乙酰化p53的表达量较低,尼克酰胺干预组结果相反,细胞活性下降,SIRT1的表达较低,乙酰化p53的表达较高,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在LPS与小胶质细胞共培养上清损伤多巴胺(DA)能神经元过程中,SIRT1具有保护作用,其机制与乙酰化p53受抑制有关.
关键词： 沉默信息调控因子 帕金森病 BV-2细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 P53 -
KN-93对缺血再灌注后PC12细胞NF-κB表达及细胞活性的影响
目的观察Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca2+/CaM PKⅡ)竞争性抑制剂KN-93对缺血再灌注损伤后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)核因子κB(NF-κB)的表达及细胞活性的影响情况.方法将传代培养的PC12细胞在特制的装置中进行缺血再灌注处理,建立研究所需要的细胞模型并施以KN-93进行干预,运用免疫细胞化学和流式细胞仪技术检测不同处理条件下NF-κB的表达情况,并应用甲基噻唑蓝(MMT)比色法对细胞的损伤程度进行检测.结果经过KN-93预处理的试验组相对于单纯缺血再灌注处理对照组,NF-κB的表达和细胞损伤程度均明显降低(P<0.01).结论 KN-93能够减少缺血再灌注引起的胞浆PC12细胞NF-κB的上调,并能减轻细胞的损伤程度;缺血再灌注损伤中NF-κB的激活可能存在着Ca2+/CaM PKⅡ调控通路.
关键词： KN-93 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 缺血再灌注 核因子κB
