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时间分辨免疫荧光分析检测细胞角蛋白19片段抗原试剂的研制
1993年Stieber等[1]首先采用ELISA法检测血清中细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1),发现其对非小细胞肺癌有早期诊断价值,随后其作为一种肿瘤标志被用于肿瘤诊断、疗效评估、复发检测和判断预后.
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乙肝五项时间分辨免疫荧光分析与PCR-HBV定量的关系
目的 研究乙肝血清标志物时间分辨免疫定量检测结果与HBV-DNA定量之间的关系.方法 将 200例血清标本同时采用时间分辨免疫荧光定量和实时荧光定量PCR 技术,对乙肝五项含量和HBV - DNA 含量分别进行检测, 按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行乙肝病毒标志物与HBV-DNA的分析研究.结果 乙肝病毒标志物 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV–DNA检出率为98.7%, HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组检出率59.3%, HBcAb单项阳性组检出率50%,HBsAb阳性组检出率0,全阴性组检出率0.结论 时间分辨免疫荧光分析与HBV–DNA关系密切,两者联用能更好的满足临床需求.
关键词： 时间分辨免疫荧光分析 实时荧光定量PCR -
人C肽时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制
目的研制人C肽(C-peptide)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为0.5～22 ng/ml,灵敏度为0.045 ng/ml,批内、批间的变异系数(CV)分别为4.1%～6.7%和5.4%～6.8%;与胰岛素无交叉反应,与胰岛素原的交叉反应率为9.0%.30份血样用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测,其相关系数为0.992.结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.
关键词： 人C肽 时间分辨免疫荧光分析 试剂盒 -
血吸虫病时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制和效能评价
目的：研制日本血吸虫SjP38的时间分辨免疫荧光分析（Time?resolved fluoroimmunoassay，TRFIA）试剂盒，并评价其效能。方法将抗SjP38的9G7单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板，用Eu3+标记1A6单克隆抗体作为检测抗体，研制SjP38 TRFIA试剂盒，并评价试剂盒的准确度、灵敏度、精密度、稳定性以及与病原学检测方法的符合率等指标。结果自制试剂盒准确度好，线性范围为2～1250 ng/ml，低检出浓度为0.14 ng/ml；精密度良好，分析内精密度为3.6%～4.6%，分析间精密度为5.1%～6.7%。定性试验表明该试剂盒可在4℃稳定半年，37℃稳定7 d。自制试剂盒与病原学检测方法的阳性符合率为95%，阴性符合率为100%。结论所研制试剂盒的各项性能及检测指标均达到临床检验的要求，但临床推广使用还有待进一步的验证。
关键词： 日本血吸虫 重组蛋白SjP38 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析 -
肿瘤标志物检测技术及应用
肿瘤标志物的应用有很长的历史,随着生物技术的发展,肿瘤标志物的检测新技术不断出现,如化学发光免疫分析(CLIA)技术,电化学发光免疫分析(ECLIA)技术,微粒子酶免分析(MEIA)技术,稀土元素标记的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术及分子生物学检测技术等.
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乙型肝炎标志物少见模式随访分析
目的 对乙型肝炎标志物(HBV-M)出现少见模式的患者进行随访动态观察,以进一步提高对HBV-M的认识.方法 用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)定量检测21278例标本的HBV-M,将出现HBV-M少见模式的患者列入随访对象.乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)、乙肝核心抗体(抗-HBc)分别以1、2、3、4、5来表示,并以其阳性项目的序号为该模式的代码.结果 21278例标本共检出51例HBV-M少见模式.51例HBV-M少见模式为:①“1”:2例,②“1、2”:4例,③“3”:1例,④“2、3”:4例,⑤“1、2、3、5”:8例,⑥“1、2、4、5”:29例,⑦“2、3、5”:2例,⑧“1、2、3、4、5”1例.结论 乙型肝炎病毒感染者在不同病程可出现HBV-M不同模式的组合,有时只看到一张检验报告单很难做出合理的解释,应动态观察HBV-M组合模式的变化.
关键词： 乙型肝炎标志物 少见模式 时间分辨免疫荧光分析 随访分析 -
胸腺五肽联合乙肝疫苗对HBsAg低滴度慢性无症状携带者疗效分析
目的:观察胸腺五肽联合乙肝疫苗对HBsAg低滴度慢性无症状携带者的疗效.方法:将低HBsAg滴度(＜20ng/ml)的慢性乙肝病毒感染者治疗组分为:A组HBsAg滴度＜5.00ng/ml(n=29)、A1组5.00ng/ml＜HBsAg滴度＜20ng.ml(n=14);将对照组分为相应的B组(n=23)和B1组(n=20).治疗组采用胸腺五肽注射液1mg肌肉注射,初始20日为1次/d,继后为隔日1次,疗程140天,并予乙肝疫苗40μg,上臂三角肌皮下注射,每月1次,疗程4个月.对照组口服维生素等药物护肝治疗.应用时间分辨免疫荧光分析法(TRF)定量检测治疗前后患者乙肝病毒标志物的滴度变化.结果:用TRF法检测,A组HBsAg有14例(48.3%)＜0.5ng/ml,HBsAb有17例(58.6%)＞10mIU/ml;对照B组只有2例(2/23,8.7%)感染者同时出现HBsAg＜0.5ng/ml和HBsAb＞10mIU/ml.治疗后A组与B组HBsAg和HBsAb滴度相比较,P值均＜0.05,差异有显著性意义.治疗后A1和B1组HBsAg和HBsAb滴度相比较,P值均＞0.05,差异无显著性意义.结论:胸腺五肽联合乙肝疫苗对HBsAg滴度＜5.00ng/ml的慢性无症状携带者,有明显降低HBsAg和升高HBsAb滴度的作用,有部分感染者可清除乙肝病毒.
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柯萨奇病毒A16型时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制
目的 建立一种简便、准确、灵敏度高的铕标记柯萨奇病毒A16型的时间分辨免疫荧光分析技术(TRFIA).方法 抗CA16单克隆抗体包被96孔板,用Eu3+标记抗CA16配对抗体,运用双抗夹心法建立柯萨奇病毒A16型的时间分辨免疫荧光分析法,分析其检测灵敏度、精密度,回收率,并比较其与其他检测试剂盒的相关性.结果 CA16时间分辨免疫荧光试剂的检测灵敏度为0.02 ng/ml,批内和批间变异系数分别在1.3％～8.5％和1.7％～11.9％之间,回收率在100.2％～101.5％之间,与金标准PCR相比,其检测结果的相关性均高于ELISA法和胶体金法.结论 建立了铕标记柯萨奇病毒A16型的时间分辨免疫荧光分析法,该方法简便、准确、灵敏度高,适用于柯萨奇病毒A16型的临床筛查.
关键词： 柯萨奇病毒A16型 时间分辨免疫荧光分析 手足口病 -
人血红蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂的研制及初步应用
目的 建立人血红蛋白(Hb)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂,探讨在大便潜血(FOB)检测中的应用.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测Hb的TRFIA方法.并对该试剂的各项性能指标进行评价.结果 自制试剂盒的低检测量为0.8 ng/mL或32 ng(Hb)/g(粪便),线性范围为0.8～1 000 ng/mL或32～40 000ng(Hb)/g(粪便).分析内和分析间变异系数分别为3.4%～8.9%和5.2%～13.4%.与羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb不发生交叉反应.90份临床确诊标本用本试剂盒和胶体金免疫层析(GICA)试剂同时测试,TRFIA法的敏感性和特异性均为100%,GICA法的灵敏度和特异性分别为95.6%、100%.结论 Hb-TRFIA试剂盒各项指标均达到临床检测要求,适用于临床上大便潜血Hb的检测.
关键词： 人血红蛋白 时间分辨免疫荧光分析 大便潜血 -
游离雌三醇时间分辨免疫荧光分析法的建立
目的 建立游离雌三醇(uE3)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法.方法 采用竞争抑制一步法建立检测uE3的TRFIA分析方法,并对该试剂的各项性能指标进行评价.结果 该方法的灵敏度为0.14 nmol/L,线性范围为0.14～120 nmol/L,回收率为97.7%.分析内和分析间变异系数分别为1.6%～4.1%和4.4%～8.8%.与E2、孕酮和睾酮的交叉反应率分别为0.24%、0.36%和0.40%.149份血样用本试剂与进口的同类试剂同时检测,其相关系数为0.925.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.
关键词： 游离雌三醇 时间分辨免疫荧光分析 -
不同方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的结果分析
目的：分析金标免疫层析检测技术（GICA）、酶联免疫吸附测定（ELISA）和时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的结果。方法采用GICA、ELISA及TRFIA对11058例标本进行HBsAg检测。结果 GICA、ELISA及TRFIA法检测11058例标本HBsAg的阳性率分别为15．52％、15．64％及15．95％，两两比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。TRFIA定量检测为0．2～＜2．0 ng/mL时，GICA、ELISA的诊断符合率分别为25．0％、75．0％。结论检测 HBsAg低浓度样本时，GICA和ELISA的诊断符合率降低。
关键词： 肝炎表面抗原 乙型 酶联免疫吸附测定 金标免疫层析检测技术 时间分辨免疫荧光分析 -
癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制
目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂.方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAb M86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA-TRFIA,增强液采用β-二酮体为主的发光增强系统.结果:CEA-TRFIA的线性测量范围为(1～560) μg /L,分析的灵敏度为0.28 μg /L,批内和批间的变异系数(CV)分别为7.2%～8.6%和8.9%～13.2%.与AFP、CA12-5、CA19-9和白蛋白均无交叉反应,与CA15-3的交叉反应值为1.62 μg/L.将1 000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测,其相关系数(r)为0.946.结论:CEA-TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可替代国外同类检测试剂盒,用于临床血清CEA水平的测定.
关键词： 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析 -
影响IFMA效果的常见问题与对策
IFMA是时间分辨免疫荧光分析测定法的简称,是继免疫吸附试验和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术.它以免疫学反应为基础,将抗原与抗体的特异性反应与金属铕标记抗体作用相结合,再加入增强液将复合物标记抗体上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与溶液中的待测物质的浓度成正比.
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癌胚抗原与基质蛋白22双标记时间分辨荧光检测试剂盒的研制及效能评价
目的 研制膀胱癌早期诊断指标癌胚抗原(CEA)和核基质蛋白22(NMP22)的双标记时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒,并评价其效能.方法 将抗CEA和NMP22的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu3+标记CEA单克隆抗体和Sm3+标记NMP22的单克隆抗体作为检测抗体,建立CEA和NMP22的双标记TRFIA试剂盒,并评价试剂盒的灵敏度、精密度、稳定性等指标.结果自制试剂盒稀释回收率高.CEA的线性范围为0～600 ng/mL,低检出浓度为0.12 ng/mL;NMP22的线性范围为0～1000 U/mL,低检出浓度为0.21 U/mL.精密度良好,分析内精密度分别为2.5％～4.3％,1.1％～4.2％,分析间精密度分别为3.0％～5.7％,4.7％～5.5％.定性试验表明该试剂盒可在4℃稳定半年,37℃稳定7 d.自制试剂盒与膀胱癌镜检的阳性符合率为97.7％,阴性符合率为100％.结论 所研制的试剂盒的各项性能及检测指标均达到临床检验的要求,且准确度高、灵敏性高、可测范围宽,稳定性好,具有良好的应用前景.
关键词： 癌胚抗原 核基质蛋白22 时间分辨免疫荧光分析
