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两种方法检测乙肝HBsAg效果对比
目的:考察胶体金联免疫吸附与酶联免疫吸附试验的灵敏度与特异性.方法:用乙肝表面抗原胶体金联免疫吸附试剂(GCISA)和酶联免疫试剂(ELISA)检测各种肝炎病人血清909份,正常人血清173份及乙肝表面抗原质控标准品.结果:GCISA 和 ELISA 分别检出773和770份阳性样品,总符合率为97.0%.检测乙肝表面抗原质控标准品,GCISA 的灵敏度为1ng/ml,ELISA 为1~2 ng/ml,且两种方法都只与 HBsAg 有特异反应,与乙肝病毒核心抗原、e 抗原无交叉反应.结论:GCISA 检测血清中的 HBsAg 特异性强,灵敏度与 ELISA 一致,在检测单份样品时较 ELISA 简单快速,观察结果直观,不需仪器设备.
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两次酶联法筛检抗-HCV的重要意义
随着对丙型肝炎病毒(HCV)的深入认识,发现近年来输血后肝炎是以丙型肝炎为主.我血液中心从1992年开始用酶联法免疫吸附试验(ELISA),两次检测献血者抗-HCV,进一步提高了血液质量,报告如下:
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化学发光微粒子免疫测定技术对低风险人群HCV感染确证的应用价值
目的 应用化学发光微粒子免疫测定(CMIA)技术检测一种酶联免疫吸附试验(ELISA1)反应性样本,通过HCV核酸和蛋白检测参考标准分析CMIA在献血者HCV感染确证中的应用价值.方法 102例ELISA1反应性献血者血液样本补充核酸3项联检、另一种酶联免疫吸附试验(ELISA2)、丙型肝炎病毒抗体补充试验(Western Blot法)和CMIA试验.结果 102例抗-HCV阳性献血者中,32例(31.37%,32/102)HCV RNA反应性样本,50例(49.02%,50/102)ELISA2及Western Blot均为反应性.以HCV核酸检测结果为参考标准,CMIA与之低度相关(Spearman相关系数rs=0.395,P<0.01),Kappa检验两者一致性弱(Kappa=0.270,P<0.01).以ELISA2及Western Blot蛋白检测结果为参考标准,CMIA与之结果高度相关(Spearman相关系数rs=0.713,P<0.01),Kappa检验两者高度一致性(Kappa=0.674,P<0.01).结论 CMIA作为HCV感染后蛋白标记物的检测方法,对低风险人群HCV病毒感染的确证有较大的应用价值.
关键词: 化学发光微粒子免疫测定 重组免疫印迹试验 免疫吸附试验 丙型肝炎病毒 确证感染 -
荧光法研究免疫试验抗体包被过程
目的:以荧光法作为定量和示踪手段,研究免疫试验中抗体在固相载体上包被的行为及意义.方法:以异硫氰酸荧光素( FITC)标记后的抗体包被固相载体,构建化学发光免疫分析(CLIA)体系.通过荧光光度计精确测定包被前后包被液中游离抗体的浓度,定量抗体的包被量,并研究其包被量对免疫反应的影响.结果:抗体包被量与CLIA发光值非线性相关;间接法较直接吸附法包被更有利于保持抗体活性;热处理后化学发光系统发光值降低与包被抗体脱落有关.结论:荧光法为构建有效CLIA体系提供了一种研究方法.
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影响IFMA效果的常见问题与对策
IFMA是时间分辨免疫荧光分析测定法的简称,是继免疫吸附试验和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术.它以免疫学反应为基础,将抗原与抗体的特异性反应与金属铕标记抗体作用相结合,再加入增强液将复合物标记抗体上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与溶液中的待测物质的浓度成正比.
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三种复检HBsAg弱阳性的方法探讨
目的 了解酶联免疫吸附试验(ELISA),化学发光免疫分析(CLIA)及HBV-DNA荧光定量PCR(HBV-DNA)法检测HBsAg弱阳性标本结果的检出率,探讨三种方法的特异性和灵敏度.方法 对临床标本进行ELISA定性分析检测,对HBsAg检测的OD值在0.075~0.135的84份标本再用ELISA法(2次实验条件一致)复检,复检仍为HBsAg弱阳性的标本分别再用CLIA、HBV-DNA复检.结果 CLIA法阳性检出率80.6%,HBV-DNA法72.2%,ELISA法63.9%.结论 对HBsAg弱阳性结果的处理应采用多种方法比较,并消除可能引起检测标本产生弱阳性的相关因素,参考临床诊断发出报告.