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端粒酶在肿瘤检测中的研究进展
1994年Kim等[1]利用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)方法检测了101种肿瘤标本和100个独立的永生化细胞系、发现90种肿瘤标本和98个永生化细胞系中含有端粒酶活性,而同时检测的良性肿瘤及正常体细胞中未发现端粒酶活性.许多证据[2,3]表明,除了生殖细胞、胚胎干细胞、活化的淋巴细胞、月经期的子宫内膜组织及表皮的基底层细胞外,大部分的体细胞端粒酶呈阴性,而在约85％～95％的人类肿瘤中端粒酶被激活.
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乳腺癌组织中端粒酶活性的研究
目的:研究乳腺癌组织、癌旁组织、良性乳腺病变、正常乳腺组织中的端粒酶活性,探讨其作为乳腺癌肿瘤标志物的可能性.方法:采用端粒重复序列扩增法(telomeraic repeat amplification protocol,TRAP)来检测 36 例乳腺癌及其相应癌旁组织,12 例良性乳腺病变,6 例正常乳腺组织中的端粒酶活性.结果:36 例乳腺癌组织中,有 33 例端粒酶表达阳性,其阳性率为91.7%,而且与肿瘤的大小,淋巴结的状态,临床分期有相关性.36 例癌旁组织中,有 2 例端粒酶表达阳性,阳性率为5.6%.12 例良性乳腺病变中,仅有 1 例端粒酶表达阳性,阳性率为8.3%.6 例正常乳腺组织端粒酶表达均为阴性.结论:乳腺癌组织中普遍存在端粒酶活性表达,端粒酶有可能成为诊断乳腺癌的肿瘤标志物.
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儿童急性白血病不同治疗阶段端粒酶活性及其意义
我们用端粒重复序列扩增-银染色技术检测了不同治疗阶段儿童急性白血病患者骨髓细胞端粒酶活性,并探讨其临床意义.
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SYBR Green实时定量端粒重复序列扩增法检测端粒酶活性
目的：采用实时定量端粒重复序列扩增法（RQ-TRAP法）检测不同细胞端粒酶活性。方法用RQ-TRAP和TRAP-ELISA两种方法同时检测12种细胞的端粒酶活性，并比较两种方法的检测结果。结果 RQ-TRAP方法能准确特异地检测系列稀释的293T细胞蛋白提取液的端粒酶活性，灵敏度可达8个细胞，扩增效率为98.92%。阴性对照组则未检测到端粒酶活性。RQ-TRAP方法测得12个细胞系中端粒酶的活性与TRAP-ELISA方法结果有较强相关性（r2=0.7625）。两种方法检测肿瘤细胞端粒酶活性均高于正常细胞。结论 RQ-TRAP方法检测端粒酶可行，比TRAP-ELISA方法成本低、时间短，且支持高通量，是一种新的可快速可靠定量端粒酶活性的方法。
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端粒酶活性检测在子宫颈癌早期诊断中的初步探索
观察端粒酶活性在子宫颈癌中的阳性率,探讨子宫颈癌发生过程中端粒酶被激活的关键点及其在子宫颈癌早期诊断及预后中的诊断价值.方法:用以PCR为基础的端粒重复序列扩增(TRAP)法测定62例正常宫颈标本、68例宫颈上皮内瘤样变(CIN),29例浸润性鳞状细胞癌中的端粒酶活性.结果:它在正常宫颈标本中发现5例有端粒酶的活性表达(8.1%),在68例CIN中发现27例有端粒酶活性(39.7%),在浸润性宫颈鳞癌中有28例端粒酶活性表达(96.6%),正常组和CIN组比较,差异显著(P＜0.001),CINⅢ和CIN Ⅰ组比较,差异显著(P＜0.01),宫颈浸润性鳞细胞癌和CIN Ⅲ比较,差异显著(P＜0.01).结论:端粒酶活性随宫颈上皮内瘤样变的加重而阳性率增高,端粒酶的激活是宫颈癌发生过程中的早期事件,检测端粒酶活性对早期诊断宫颈癌有一定意义.
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乳腺癌组织中端粒酶活性的研究
目的细胞中端粒(telomere)的长度与细胞寿命的调控密切相关,端粒长度的维持需要端粒酶(telomerase)的激活,近年来的研究发现,端粒酶的激活与肿瘤的发生,发展关系密切.本文研究乳腺癌组织,癌旁组织,良性乳腺病变,正常乳腺组织中的端粒酶活性,探讨其作为乳腺癌肿瘤标志物的可能性.方法采用端粒重复序列扩增法(telomeraic repeat amplification protocol,TRAP)来检测36例乳腺癌及其相应癌旁组织,12例良性乳腺病变,6例正常乳腺组织中的端粒酶活性.结果 36例乳腺癌组织中,有33例端粒酶表达阳性,其阳性率为91.7%,而且与肿瘤的大小,淋巴结的状态,临床分期有相关性.36例癌旁组织中,有2例端粒酶表达阳性,阳性率为5.6%.12例良性乳腺病变中,仅有1例端粒酶表达阳性,阳性率为8.3%.6例正常乳腺组织端粒酶表达均为阴性.结论乳腺癌组织中普遍存在端粒酶活性表达,端粒酶有可能成为诊断乳腺癌的肿瘤标志物.
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血清端粒酶与肠癌相关抗原检测对大肠癌诊断价值的研究
近年来,大肠癌发病率有所增加,老年人所占比例升高更为明显[1].肿瘤标记物在肠道肿瘤的诊断中具有一定价值,但目前尚未发现一种同时具有高灵敏性及高特异性的肿瘤标记物.本文采用端粒重复序列扩增(TRAP)法[2 ]和免疫放射分析法比较研究78例大肠癌及43例对照组外周血端粒酶活性和肠癌相关抗原(CCA)的水平,旨在探讨两项肿瘤标记物联合检测在大肠癌诊断中的价值.
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卵巢癌患者外周血癌细胞端粒酶活性检测的建立
目的通过检测外周血中卵巢癌细胞的端粒酶活性,了解其血循环转移情况及其诊疗价值.方法用改进的银染-TRAP(端粒重复序列扩增)法检测33例卵巢癌患者术前及术后接受化疗后的外周血端粒酶活性,并以10例卵巢良病变患者外周血作为对照.结果33例卵巢癌患者术前外周血端粒酶活性强阳性8例,弱阳性12例,术后接受化疗后仅6例弱阳性;10例卵巢良病变患者外周血1例端粒酶弱阳性,其余全部阴性.结论卵巢癌患者外周血端粒酶活性检测在卵巢癌的治疗、预后均评估、随访等方面具有重要的临床意义.
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胆管癌组织端粒酶活性的表达及其意义
胆管癌发病率逐年增加,且早期诊断困难.我们采用以聚合酶链反应(PCR)为基础的端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)对胆管癌组织及癌旁组织进行端粒酶活性定量检测,探讨其作为诊断指标的可行性及其临床病理学意义.
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银染-TRAP法检测端粒酶活性的建立
目的 建立检测端粒酶活性的改良银染-TRAP法(端粒重复序列扩增法).方法 用银染-TRAP法测定人肿瘤细胞株和经加热处理的阴性对照细胞的端粒酶活性.结果 肿瘤细胞株的端粒酶活性阳性率为100%,10、100、500个Hela细胞均为阳性,加热处理后的细胞端粒酶活性均为阴性,结论 提示与核素-TRAP法相比较,银染-TRAP法是同样特异、敏感,且更快速的端粒酶活性的检测方法,该方法可成为恶性肿瘤的诊断指标之一.
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端粒酶活性与口腔鳞状细胞癌的相关性
目的:探讨端粒酶在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与口腔鳞状细胞癌发生发展的关系.方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)方法检测30例口腔鳞状细胞癌患者术后标本中的病变组织及其癌旁正常组织,并分析其与临床病理的相关性.结果:30例口腔鳞状细胞癌组织中端粒酶阳性表达率为73.3%(22/30),而30例癌旁正常组织中无1例表现出端粒酶阳性.T1～T2期21例中端粒酶阳性表达率为61.9%(13/21);T3～T4期9例均为端粒酶阳性表达(100%).30例口腔鳞状细胞癌样本中Ⅰ级17例,端粒酶阳性表达率为58.8%(10/17);Ⅱ级8例,端粒酶阳性表达率为87.5%(7/8);Ⅲ级5例,均表达出端粒酶阳性(100%).口腔鳞状细胞癌组织端粒酶活性的阳性率明显高于癌旁正常组织(P＜0.05),且端粒酶活性与口腔鳞状细胞癌的临床分期及病理分级呈正相关(P＜0.05).结论:端粒酶活性表达在口腔鳞状细胞癌发病机制中具有重要作用,同恶性肿瘤的整个病程有关,与其恶性程度、浸润能力有相关性,可作为判断预后有价值的指标之一.
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少弱精子症患者精浆中精子及睾丸组织端粒酶活性实验研究
目的 通过对少弱精子症患者精浆及睾丸端粒酶活性(TA)的检测,探讨少弱精子症患者精浆中精子与TA的相关性.方法 以端粒重复序列扩增法(TRAP)检测受试者精浆中精子和睾丸组织TA.结果 少弱精子症患者精子TA表达与健康者比较差异无统计学意义(P＞0.05);少弱精子症患者睾丸组织中TA呈阳性.结论 睾丸组织的TA是反映精子形成的高敏感和高特异标记物;健康者和少弱精子症患者精浆TA降低,TA的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因之一.
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甲状腺病变组织中端粒酶活性的测定及其意义
目的了解几种常见甲状腺病变组织中端粒酶活性的区别.方法用端粒重复序列扩增法测定19例甲状腺癌、15例甲状腺癌癌旁组织、21例甲状腺腺瘤、17例结节性甲状腺肿及13例正常甲状腺组织端粒酶的活性. 结果 94.74%(18/19)的甲状腺癌表达出端粒酶活性,与癌旁组织(6.67%)、甲状腺腺瘤(4.67%)、结节性甲状腺肿(0%)及正常甲状腺组织(0%)比较,差异均有显著性意义(P＜0.0001).结论端粒酶是甲状腺癌定性的良好标志物,且在甲状腺病变的鉴别诊断中具有重要意义.
