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恶性血液病细胞端粒酶活性检测及其临床意义
目的:分析恶性血液病细胞端粒酶活性检测及其临床意义.方法:2016年2月-2017年1月收治血液系统恶性肿瘤疾病患者90例,另外在同期选择部分良性血液疾病患者30例进行对比分析.两组患者均接受相同检查方法,总结不同疾病患者的端粒酶活性差异.结果:良性血液疾病患者的端粒酶活性与其他恶性血液疾病患者的端粒酶活性数据差异较大,差异有统计学意义(P<0.05).结论:恶性血液病细胞端粒酶活性检测临床意义显著,能够作为恶性血液疾病检查标志物,尤其是可以作为白血病残留量的监测新标准之一,值得推广普及.
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端粒酶在肿瘤检测中的研究进展
1994年Kim等[1]利用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)方法检测了101种肿瘤标本和100个独立的永生化细胞系、发现90种肿瘤标本和98个永生化细胞系中含有端粒酶活性,而同时检测的良性肿瘤及正常体细胞中未发现端粒酶活性.许多证据[2,3]表明,除了生殖细胞、胚胎干细胞、活化的淋巴细胞、月经期的子宫内膜组织及表皮的基底层细胞外,大部分的体细胞端粒酶呈阴性,而在约85%~95%的人类肿瘤中端粒酶被激活.
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三氧化二砷抑制肝癌细胞端粒酶表达及诱导细胞凋亡作用
目的:观察三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株细胞端粒酶表达和细胞生长抑制的影响及诱导细胞凋亡的作用,探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及机制.方法:采用噻唑蓝比色分析法(MTT法),流式细胞分析,原位杂交方法以及TUNEL原位末端标记法观察和检测了不同浓度的三氧化二砷对人肝癌细胞株(SMMC-7721)细胞的增生,细胞DNA含量的分布,细胞端粒酶表达的影响及细胞凋亡的诱导作用.结果:20,5,5 μmol/L三氧化二砷在24,48,72 h时抑制率分别为22.0%,25.7%,32.0%,均能明显抑制人肝癌细胞株细胞的增生(单侧置信区间为10.1,23.7,18.0,P<0.05).流式细胞分析显示加药组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞所占比例增高.随着药物浓度的增加细胞端粒酶的表达下降,而凋亡细胞数增加.结论:三氧化二砷能抑制人肝癌细胞增生,其抑制作用具有时间-计量效应关系,并能抑制肝癌细胞端粒酶的表达及诱导肝癌细胞凋亡.
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hTRT反义基因对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响
目的:探讨人端粒酶蛋白催化活性亚单位(human telomerasereversetranscriptase,hTRT)反义基因治疗对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响.方法:采用基因重组的方法,构建hTRT正、反义真核表达载体,并用脂质体导入SGC-7901胃癌细胞株,检测转染细胞增殖能力、细胞周期、端粒酶活性、端粒酶亚单位及bd-2,c-myc基因表达的变化.结果:成功构建hTRT正、反义真核表达载体,并导入胃癌细胞,筛选出稳定表达正、反义hTRT的阳性克隆7901-S,7901-AS1和7901-AS2.反义细胞增生能力明显减弱,凋亡细胞和G0/G1期细胞增多,增生指数下降,端粒酶活性下降,端粒酶亚单位hTRT的表达减少,而TP1,hTR无明显变化,进一步研究发现bd-2和c-myc基因的表达在转录和翻译水平均明显下调.结论:hTRT和c-myc,bcl-2基因的调节作用是相互的,反义hTRT基因可以通过下调胃癌细胞hTRT、c-myc、bcl-2基因的表达,一方面降低端粒酶活性,另一方面一定程度增加凋亡细胞的比率,从而抑制细胞的生长.
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人端粒酶逆转录酶基因的短发夹状RNA对卵巢上皮性癌细胞端粒酶的抑制作用
人端粒酶由RNA模板(hTR)、相关蛋白(hTP)和人端粒酶逆转录酶亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)组成,其中hTERT是端粒酶激活的关键限速步骤.
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端粒、端粒酶与肿瘤的关系
肿瘤的发生过程可能与不同时期不同的原癌基因的激活和抑癌基因的失活有关,这些基因的缺失或突变的结果终导致肿瘤细胞无限制生长,而正常体细胞有丝分裂到一定程度便会退出细胞周期而衰老死亡,其原因可能在于肿瘤细胞有端粒酶活性表达,而正常体细胞端粒酶处于失活状态.本文就有关端粒、端粒酶及其在肿瘤中的作用作一简述.
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白血病不同病期细胞端粒酶mRNA表达水平分析
近年来研究发现端粒酶活性增高与肿瘤细胞增殖加快、分化受抑有关,可使肿瘤细胞逃脱死亡成为永生细胞[1].白血病是血液系统恶性疾病,表现为细胞周期失控性增殖,其改变与端粒及端粒酶的异常关系密切.因而,检测白血病端粒酶活性,有助于白血病的病情分析和治疗.常用端粒酶活性分析方法是端粒重复扩增法(Telomeric Repeat Amplification Protocol,TRAP)[2],通过电泳条带放射自显影定性测定.用定量方法研究其活性鲜见报道,本文应用荧光定量PCR技术检测33例白血病患者白血病细胞端粒酶mRNA水平,旨在探讨端粒酶mRNA与白血病演变和预后关系.
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胆汁端粒酶活性检测对消化道恶性肿瘤的诊断意义
自1994年Kin等[1]报道了端粒酶重复诊断扩增法(TRAP)以来,国内外对各种恶性肿瘤组织细胞端粒酶的研究报道骤增,但以体液进行端粒酶研究的报道相对较少,尤其对部分恶性肿瘤患者取胆汁标本进行端粒酶活性检测报道更少.由此,我们对部分外科住院患者取胆汁标本(引流或穿刺)进行TRAP法端粒酶检测,现将结果报道如下.
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小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性
人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.
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艾迪注射液对膀胱癌细胞端粒酶活性的影响
目的 探讨分析艾迪注射液对膀胱癌细胞端粒酶活性的变化,进而研究艾迪注射液的治疗机理.方法 选取60例膀胱癌患者,随机分为3组,分别用艾迪注射液、沙培林、丝裂霉素进行膀胱灌注.结果 艾迪灌注组注射后的端粒酶活性明显低于其他两组注射后的活性,且注射后与注射前相比,差异有统计学意义(P<0.05);端粒酶的活性按照A、B、C、D4个等级划分,强度A、C、D的例数明显减少,数据有统计学意义(Pp<0.05);在采用艾迪注射液前,患者膀胱癌细胞活性的阳性率为87.1%,而注射后细胞活性的阳性率为40.3%,两者之间比较差异显著(P<0.05).结论 用艾迪注射液治疗膀胱癌可以有效抑制细胞端粒酶活性,避免了癌细胞的快速生长,此方法值得借鉴推广.