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HFRS患者BLCL的建立及HTNV S基因片段在其内获得长期稳定的表达
虽然对汉坦病毒核蛋白(HV NP)氨基端蛋白的原核表达产物的抗原性及免疫原性已进行了许多研究,并已用于出血热的诊断,但该抗原表位的精确一级结构及其基因定位迄今尚未完全明确.而研究T细胞表位的前提是首先要构造含病原体抗原基因片段的表达载体质粒.要实现CTL效应细胞对靶细胞的有效杀伤,前提条件之一是效靶细胞必须具有相同的HLA型别.通常选用与效应细胞同源即同一供者的PBMC建立靶细胞,本研究采用与HV特异性CTL同源的患者自身的EB病毒转化的B淋巴母细胞系(EBV-transformed B lymphoblastoid cell line,BLCL)建立靶细胞系,将含有不同汉滩病毒(HTNV)S基因片段的重组真核表达载体转染入BLCL,获得长期稳定表达,为下一步进行CTL杀伤试验提供靶细胞系.
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用细胞因子流式细胞计数术体外检测重组人IL-12的生物学活性
对重组IL-12生物学活性的鉴定目前国内外多采用淋巴细胞增生试验(MTT)、NK细胞杀伤试验(LDH)、IFN-γ产生等方法.细胞因子流式细胞(cytokine follow cytometry,CFC)是近年来体外细胞免疫功能研究中出现的新方法[1],不仅简单、快速,而且可以同时获得针对某种抗原特异性T细胞亚群数量及其功能的二维指标.本研究构建了人IL-12单链双亚基共表达载体,在HEK293细胞中表达重组IL12.分别应用CFC、MTT、LDH等方法对其生物学活性进行鉴定.
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卵巢癌体外药敏试验研究进展
化疗是卵巢癌治疗中重要的辅助治疗,对于改善卵巢癌各期患者的预后有重要的作用.多年来,人们一直在寻找一种简便、准确又切实可行的药物敏感试验,以期通过个体化的化疗,提高疗效,减少毒副作用.现将近年来卵巢癌药敏试验研究作一回顾性分析.1 肿瘤细胞直接杀伤试验肿瘤细胞直接杀伤试验(Direct Cellular Cytotoxic Test)是早的药物敏感试验研究方法.将新鲜肿瘤标本直接制成单细胞悬液,与抗癌药物接触数小时,洗去抗癌药,加入染色剂,与未加抗癌药物的对照组比较,计算瘤细胞的杀伤比例判断药物抗肿瘤效应.试验周期短、方法简便,但准确性差,现已少用.