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C型凝集素样自然杀伤(NK)细胞受体在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中表达及意义
目的 探讨C型凝集素样自然杀伤(NK)细胞受体CD94和NKG2在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达及意义.方法 运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测C型凝集素样NK细胞受体CD94和NKG2在经组织形态、免疫组织化学、EB病毒原位杂交及T细胞受体PCR克隆性重排分析确诊的21例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤以及对照组同部位B细胞淋巴瘤8例、淋巴结外周T细胞淋巴瘤(PTCL)10例、脾脏5例、胸腺5例和慢性炎性鼻黏膜5例组织中的表达情况并进行随访.结果 21例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤具有典型的形态学改变,表达CD3ε、CD56和细胞毒蛋白,TCR重排阴性,20例EB病毒阳性;RT-PCR扩增结果显示,在21例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中,18例(85.7%)CD94呈阳性表达;NKG2总阳性率为95.2%(20/21),各亚基表达阳性率依次为NKG2A/2B(85.7%)、NKG2D(61.9%)、NKG2F(14.3%)、NKG2C,/2E(4.8%).对照组中PTCL和B细胞淋巴瘤均不表达CD94和NKG2,仅2例脾脏和2例慢性炎性鼻黏膜组织表达CD94,1例脾脏组织表达NKG2A/2B,1例胸腺组织表达NKG2D.CD94和NKG2在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达与T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤比较,差异均有统计学意义(P均<0.01).CD94和NKG2同时表达于17例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤,共表达率为81.0%(17/21).结论 CD94和NKG2在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中呈特异性和顺序性表达,提示多数病例肿瘤细胞处于活化和功能NK细胞阶段.对这些分子的检测有可能成为NK细胞源性淋巴瘤诊断的重要手段.
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脐血移植发生移植物抗宿主病与T细胞表达CD94的关系
背景:据作者检索脐血移植中有关T细胞表达CD94与移植后发生急,慢性移植物抗宿主病的关系尚无报道.目的:初步探讨T细胞表达CD94在脐血移植免疫耐受中的作用.设计:病例-对照分析.对象:1999-01/2007-06中山大学附属第二医院造血干细胞移植中心行脐血移植的14例患儿,年龄2～9岁,中位年龄6.8岁;接受HLA全相合血缘相关脐血移植患儿9例,接受无关供者脐血移植5例.同时选取体检正常的34例儿童外周血标本作为对照,由中山大学附属二院儿科提供,男18例,女15例,平均年龄4.5岁.方法:抽取正常儿童外周静脉血2 mL,14例患儿均在脐血移植后造血恢复至中性粒细胞绝对数≥0.5×109 L-1时开始采集外周静脉血2 mL,血液样奉均置于EDTA-2Na抗凝管,待测细胞表面抗原.每1～3个月榆测1次,至随访结束.所有样本在6 h内完成标定,均采用双色和三色直接免疫荧光标记法,流式细胞仪检测外周血T细胞表面CD94的表达.主要观察指标:脐血移植后移植物抗宿土病的发生.移植物抗宿主病与外剧血T细胞表面CD94表达的关系.结果:9例接受同胞脐血移植的患儿中,有6例未发生急性移植物抗宿主病,其余3例及接受非血缘相关脐血移植的5例患儿均于移植后6 d-50 d发生急性移植物抗宿丰病,5例患儿发生慢性移植物抗宿主病.与正常对照比较,全部脐血移植患儿CD3+CD4+CD94+T细胞、CD3+CD8+CD94+T细胞的表达均明显升高(P＜0.05).与未发发急性移植物抗宿主病患儿比较,急,慢性移植物抗宿主病患儿CD3+CD4+CD94+T细胞、CD3+CD8+CD94+T细胞的表达均明显升高(P＜0.05).结论:脐血移植后发生急,慢性移植物抗宿主病时T细胞高表达CD94,提示T细胞CD94分子的活化参与了移植物抗宿主病的发生.
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不明原因反复自然流产患者外周血中CD94、CD56、IL-15含量变化及其相关性研究
目的:探讨不明原因自然流产患者外周血液当中各项指标的含量和相关性.方法:以2013年6月至2016年10月为期,共挑选妊娠期产妇78例.其中39例产妇为不明原因反复流产者,其在院内留有流产档案,所得数据记研究组;另外39例产妇为妊娠早期自愿要求人工流产者,既往无不良流产病史,所得数据记对比组.结果:研究组产妇CD94比例为(21.28±3.21)%,明显低于对比组(27.03±3.57)%;研究组产妇CD56比例为(25.92±3.25)%,明显高于对比组(21.18±2.96)%,同时研究组产妇IL15含量明显高于对比组,两组数据具有统计学意义(P<0.05).结论:不明原因反复自然流产者与正常流产者外周血指标存在一定差异,可将其用于预测参考.
关键词： 不明原因反复自然流产 CD94 CD56 IL15 相关性 -
异基因造血干细胞移植CD94分子在T细胞高表达的意义初探
目的:检测CD94分子在T细胞表达的水平,同时探讨在异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD94分子在T细胞表达的意义.方法:HSCT治疗高危白血病和遗传性溶血性贫血成功植入的儿童患者,其中同胞脐血移植(UCBT)10例,非血缘相关UCBT 1例,异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT )5例,在移植前后发生GVHD时采用流式细胞仪检测和比较外周血中CD94的表达,并与正常外周血水平比较.结果:CD94主要表达于CD3+CD8+T 细胞,正常情况下外周血和脐血T细胞表达率低于10%,其中CD4+细胞几乎不表达,低于2%.但在UCBT或allo-PBSCT后CD94在CD4+T细胞和CD8+T细胞均明显增高.3例UCBT无GVHD,其余均发生了Ⅰ-Ⅳ0急性GVHD.急性GVHD发生时CD4+CD94+和CD8+CD94+T细胞表达明显升高.结论:异基因造血干细胞移植后发生GVHD时,T细胞高表达CD94,可能是在同种抗原的刺激下机体自我保护的结果.
关键词： CD94 异基因造血干细胞移植 移植物抗宿主病 -
补肾中药对溴隐亭致流产鼠模型中蜕膜CD56+NK细胞表面CD69和CD94表达的影响
为了观察补肾中药是否能影响蜕膜CD56+NK细胞比例及其表面CD69、CD94的表达,从而进一步阐明补肾中药对母胎界面免疫的影响机制.SD大鼠于孕6～8 d皮下注射溴隐亭0.3 mg/kg@d,建立改良的溴隐亭致SD大鼠流产模型,随机分为三组.A组为模型组;B、C组在孕1～11d分别给予大剂量中药(4.5g/kg@d)、P(8 mg/kg@d),另设正常孕鼠对照(D组).孕12 d处死,取蜕膜组织,分离成单个细胞悬液,用流式细胞分析技术观察4组蜕膜CD56+NK细胞的量及蜕膜NK细胞表面CD69、CD94的表达差异.结果发现:B组(P＜0.05)、C、D组(P＜0.01)妊娠率与A组相比增加,并且有差异;B、C组蜕膜CD56+NK细胞比例与A组相比明显增加,与D组无差异;各组蜕膜CD56+NK细胞表面CD69表达无差异;B、C、D组CD94的表达与A组相比显著增加;A组蜕膜CD56+NK细胞表达CD69与CD94相比明显增加,B、C组相反.因此,补肾中药能影响蜕膜CD56+NK细胞表面CD69、CD94的表达,可能通过增加CD94的表达,抑制CD69从而进一步抑制NK细胞的活性,起到保胎作用.
关键词： 蜕膜CD56+NK细胞 流式细胞术 补肾中药 CD69 CD94 -
人NKG2A、CD94的基因克隆和真核共表达载体的构建
目的 构建真核共表达载体pNKG2A-IRES-CD94.方法 提取人外周血淋巴细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增NKG2A、CD94基因,分别克隆pMD-NKG2A、pMD-CD94,对克隆基因进行DNA序列分析.pMD-CD94经XbaⅠ和Sal Ⅰ酶切,插入相应酶切的真核表达载体pIRES(多克隆位点B),NKG2A经XhoⅠ和Mlu Ⅰ酶切,插入相应酶切的pIRES-CD94(多克隆位点A).结果 扩增的DNA片段和预期的人NKG2A和CD94大小一致;DNA序列分析显示,克隆的基因序列和GenBank数据库中人NKG2A和CD94基因序列一致.酶谱分析显示,NKG2A和CD94正向插入表达载体pIRES.结论 成功构建了含人NKG2A和CD94的真核共表达质粒pNKG2A-IRES-CD94,为研究NKG2A和CD94基因的功能奠定了基础.
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血硒、GPX与外周血CD94在反复自然流产患者水平变化的临床意义
目的:检测原因不明反复自然流产(RSA)患者血硒、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及外周血中CD94水平变化,探讨该类变化对反复自然流产发病中的作用.方法:采集RSA患者、正常妊娠妇女和非妊娠妇女(各35例)外周血检测硒、GPX与CD94含量.结果:RSA患者血硒、GPX水平均比正常妊娠妇女和非妊娠妇女呈现显著低下(P<0.01),CD94水平均亦比正常妊娠妇女和非妊娠妇女低(P<0.05).结论:血硒、GPX 与CD94在外周血中的低表达可能与反复自然流产的发病和病理生理过程有关.
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人CD94基因克隆和真核表达载体的构建
目的 构建真核表达载体pIRES-CD94.方法 提取人外周血淋巴细胞总RNA,RT-PCR扩增CD94基因,克隆pMD-CD94,对克隆基因进行DNA序列分析.pMD-CD94经Xbal和Sall酶切,插入经相应酶切的真核表达载体pIRES(多克隆位点B).结果 扩增的DNA片段和预期的人CD94大小一致;DNA序列分析显示:克隆的基因序列和Genbank数据库中人CDOA基因序列一致.酶谱分析显示,CD94正向插入表达载体pIRES.结论 成功构建了含人CDOA的真核表达质粒p1RES-CD94,为研究CD94基因的功能奠定了基础.
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NKG2家族研究进展
NKG2家族是NK细胞上的一类重要受体,包括NKG2A,NKG2B,NKG2C,NKG2D,NKG2E,NKG2F,NKG2H等成员[1],都定位于12p12.3-p13.1的NK基因复合体中[2],均为C型凝集素样结构.该家族的大多数成员均与CD94结合成异源二聚体进行表达,唯有NKG2D与NKG2F不与CD94结合.NKG2家族成员按功能可分为活化性受体和抑制性受体两大类,分别传递正性和负性信号,调控NK细胞的细胞毒作用和细胞因子的释放,使NK细胞在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中发挥重要作用.
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56例反复自然流产患者外周血中CD94含量及相关性分析
目的 探究外周血中CD94在反复自然流产(RSA)患者体内的含量变化及关系.方法 本院2008年1月至2011年4月56例RSA未孕35例患者设为观察A组,自然流产次数超过3次,排除感染、染色体异常等因素;30例RSA已孕但被确诊为难免流产患者设为观察B组;同期30例正常妊娠早孕人工流产患者设为对照组,既往无流产史,超声检查证实宫内孕单活胎.对三组患者进行CD94指标的检测,对比三组患者外周血中的CD94的表达水平.结果 本研究发现CD94在三组患者外周血中均有表达,含量观察组表达率明显低于对照组(P均<0.05).结论 CD94含量在外周血中的低表达可能与反复自然流产的发病和病理生理过程有关.
