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人红细胞老化过程中花生凝集素和Con A受体电镜细胞化学研究
目的观察人血液中,老化红细胞膜上花生凝集素(PNA)和刀豆凝集素(Con A)受体细胞化学反应的变化. 方法应用金标花生凝集素(PNAg)和刀豆凝集素(Con Ag),对早期和老化红细胞膜上PNA和Con A受体进行电镜细胞化学显示,并用计算机图像分析系统对电镜照片进行定量处理. 结果与早期红细胞相比,老化红细胞膜上PNAg颗粒和Con Ag颗粒均有明显增多. 结论老化红细胞膜上唾液酸的丢失导致半乳糖基和甘露糖基暴露的相应增加,这种变化可能与巨噬细胞对老化红细胞的识别和吞噬机制有关.
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079 鼻腔、鼻窦内翻性乳头状瘤的研究进展
鼻腔、鼻窦内翻性乳头状瘤(NIP)组织中某些人乳头状瘤病毒(HPV)、EB病毒、ps3基因表达显著增强，恶变率较高。刀豆素A(ConA)、神经酰胺酶预处理花生凝集素(NAPNA)免疫组化表明NIP恶变鳞癌中为强阳性。这些生物学特性为定义NIP为癌前病变提供依据。John根据内窥镜检查肿瘤在鼻腔的范围，和C7所见提出了探讨能代表疾病严重程度的统一的疾病分期标准。以利于客观地评价不同的手术方法对于NIP的疗效，及不同的医生所采用的相同的方法的效果。强调术后全部组织做病理检查、术后长期随访非常重要。
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氟尿嘧啶-花生凝集素结合物与LoVo细胞的结合特性研究
目的 研究氟尿嘧啶-花生凝集素结合物与细胞的作用.方法 采用一步法制备得到结合物.应用荧光显微镜定性观察结合物与细胞的结合.应用MTT法检测结合物的细胞毒作用.结果 LoVo细胞与结合物呈浓度依赖性结合;但Chang细胞不结合结合物.结合物对癌细胞的细胞毒作用呈浓度依赖性和时间依赖性.结论 结合物可选择性地与癌细胞结合,并保留抗癌活性.
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肠道疾病引起红细胞T活化的检查分析
目的 探讨肠道疾病引起红细胞T活化的检查及特点分析.方法 采用花生凝集素检测红细胞T活化,用多个同型献血者血清检测红细胞T多凝集.结果 1208例肠道疾病患者中有101例患者红细胞与花生凝集素呈凝集反应,占8.4%;101例红细胞花生凝集素阳性中有9例患者红细胞和多个同型献血者血清出现T多凝集,占红细胞花生凝集素阳性者8.9%.结论 肠道疾病可引起红细胞T活化和T多凝集,对肠道疾病患者,如需输血治疗输血浆或血浆制品时,应用花生凝集素进行输血前筛查,避免因红细胞T活化而出现溶血性输血反应.
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益气化瘀方对大鼠腰神经根损伤后花生凝集素结合分子和施万细胞的作用
目的:研究大鼠Is神经根损伤后,益气化瘀方对神经肌肉接头部花生凝集素结合分子(peanut agglutinin-binding molecules,PNA-BMs)和施万细胞(Schwann's cell,Sc)的作用.方法:大鼠L5神经根损伤后,给与益气化瘀方治疗.于用药后第10、20、30、60天,采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术,观察PNA-BMs及作为Sc标记的S-100在大鼠比目鱼肌中的分布.使用NIH图像分析技术,定量测定PNA-BMs与S-l00的重叠面积.结果:被PNA识别的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在Sc延伸过程中起着重要的导向作用.益气化瘀方对Sc在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸,以及与PNA-BMs的重叠面积均明显优于对照组.结论:益气化瘀方能明显促进ECM和Sc的生长,从而加速神经再生修复进程.
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响应面法优化花生凝集素修饰长春花碱隐形阳离子脂质体处方
目的:采用响应面法优化花生凝集素(PNA)修饰长春花碱隐形阳离子脂质体的处方.方法:采用硫酸铵梯度法制备花生凝集素修饰长春花碱隐形阳离子脂质体;以半数抑制浓度IC50为指标,考察卵磷脂与3β-[N-(N',NL二甲基胺乙基)胺基甲酰胺基]胆固醇(EPC/DC-Chol)摩尔比、卵磷脂与聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(EPC/PEG2000-DSPE)摩尔比、花生凝集素(PNA)质量百分比3个因素对考察指标的影响,并对各个因素进行二项式拟合,通过响应面Box-Behnken设计优选佳处方.结果:优选出的处方为EPC/DC-Chol摩尔比为1.5∶1、EPC/PEG2000-DSPE摩尔比20∶1、PNA质量百分比为0.1％.按照优化后的处方所制备脂质体的Zeta电位稳定、粒径分布均匀.结论:该方法应用简便、预测性好,制备的PNA修饰长春花碱隐形阳离子脂质体符合设计要求.
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大鼠海马神经细胞花生凝集素和ConA受体细胞化学技术
本实验应用PNAg和Con Ag细胞化学技术,对大鼠海马神经细胞膜上的相应受体进行凝集素细胞化学反应.材料与方法:雄性SD大鼠4只,体重250～300g.动物经戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,进行心脏灌注固定(固定液为4%多聚甲醛+0.1M PB(pH7.3).动物静置于4℃,3hr后取出大脑,用上述固定液后固定3hr.取具有海马的脑组织,用梯度酒精脱水、透明、石蜡包埋、切片.PNAg和Con Ag的制备:1)枸橼酸还原法配制 7nm胶体金;2)胶体金分别与PNA和Con A稀释液按一定比例结合;3)超速离心, 4℃,36000/rpm 45分钟;4)收集PNAg和Con Ag结合物,保存备用. PNAg和Con Ag细胞化学反应:切片脱蜡至水后,分别用PNAg液或Con Ag 液混合孵育,37℃,2hr.对照组用D-半乳糖和α-甲基甘露糖作抑制对照试验.细胞化学反应后,切片进行银加强处理.本实验结果显示,大鼠海马CA区神经细胞PNAg和Con Ag细胞化学明显呈阳性显示,用D-半乳糖和α-甲基甘露糖作抑制对照试验的对照组结果呈阴性显示.存在于细胞膜上复合多糖末端的糖基常是唾液酸,当细胞表面唾液酸含量出现下降时,其下方的半乳糖胺或甘露糖糖基相对暴露增加.从而可引起细胞在诸如信号转导、分化、凋亡等生物学功能和行为方面产生重要的变化.由于凝集素Con A和PNA是半乳糖基和甘露醇糖基的重要配体,因此,本实验Con Ag和PNAg细胞化学在神经细胞的成功显示不仅在细胞生物学方面,而且在神经生物学研究方面均具有很好的应用前景.
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5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物的制备与结合率测定
采用碳二亚胺法将经过羧基化衍生的5-氟尿嘧啶连接到花生凝集素上,制备一种导向肿瘤的5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物,并应用改进的三硝基苯磺酸法测定药物结合率.测得的药物结合率为76.33%.结果表明碳二亚胺法可成功实现药物与花生凝集素的连接,该法制备得到的结合物其药物结合率高.
关键词： 5-氟尿嘧啶 花生凝集素 5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物 -
大鼠急性早期心肌梗死细胞膜PNA受体表达
探测急性心肌缺血早期细胞膜PNA受体的表达特点.应用免疫组化法(S-P法)对32只SD大鼠急性心肌缺血早期不同时间心肌细胞膜凝集素受体的表达进行研究.结果发现:心肌缺血15min时,心肌局部可出现PNA染色阳性,且随着缺血时间的延长,其阳性表达面积明显增加;缺血2h;其表达水平达到高峰,呈弥漫性染色阳性,明显高于对照组;2h后,心肌缺血区域PNA受体的表达开始出现下降趋势.实验结果稳定,敏感性强,可为心肌缺血早期诊断提供客观的依据.
