kindlin-1在人牙龈上皮的分布特点及其临床意义

目的 探讨kindlin-1在人健康牙龈上皮与慢性炎症性牙龈上皮分布特点的差异,从而建立kindlin-1与牙周疾病的临床相关性.方法 应用免疫组织化学和免疫印迹法,分别检测10例正常牙龈上皮以及8例慢性炎症性牙龈上皮中kindlin-1的分布.结果 免疫组织化学结果显示,kindlin-1在正常牙龈上皮中主要分布于基底层细胞与上层颗粒层细胞,且在颗粒层细胞胞质中表达呈强阳性,而在基底上层细胞核内散在出现弱阳性表达;同时,kindlin-1在牙龈沟内上皮的表达明显高于游离龈上皮(P＜0.05);慢性炎症性牙龈上皮中kindlin-1较正常牙龈上皮分布更加广泛,表达也增强(P＜0.05).免疫印迹的结果进一步证实慢性炎症性牙龈的kindlin-1表达较正常牙龈上皮更加强烈(P＜0.05).结论 indlin-1在人牙龈上皮中的分布和表达与牙龈上皮分化和炎症状态均密切相关.

不同参数CO2激光对猴牙龈上皮细胞祛除作用的实验观察

目的研究不同参数的CO2激光对猴牙龈上皮的祛除作用,筛选祛除牙龈上皮彻底、结缔组织损伤轻微的佳激光照射参数.方法健康成年恒河猴3只,选取其颊、腭侧牙龈共65处,分13组,每组5处.每组分别以8 W 0.2 s、8 W 0.5 s、10 W 0.2 s、10 W 0.5 s的单脉冲CO2激光和6 W 0.02 s on/0.05 s off、8 W 0.02 s on/0.05 s off、10 W 0.02 s on/0.05 s off、6 W 0.03 s on/0.05 s off、8 W 0.03 s on/0.05 s off、10 W 0.03 s on/0.05 s off、6 W 0.04 s on/0.06 s off、8 W 0.04 s on/0.06 s off、10 W 0.04 s on/0.06 s off的连续脉冲CO2激光照射.照射后进行肉眼及组织切片观察.将牙龈上皮祛除分0和1度,将结缔组织损伤分0、1、2和3度.结果 10 W 0.02 s on/0.05 s off、6 W 0.03 s on/0.05 s off、8 W 0.03 s on/0.05 s off和6 W 0.04 s on/0.06 s off的连续脉冲CO2激光牙龈上皮祛除分度为0(完全祛除),结缔组织损伤分度为1或2(轻度、中度损伤).结论 CO2激光祛除猴牙龈上皮的佳参数为10 W 0.02 s on/0.05 s off、6 W 0.03 s on/0.05 s off及8 W 0.03 s on/0.05 s off、6 W 0.04 s on/0.06 s off.

猴牙龈组织对CO2激光重复照射的反应研究

目的研究猴牙龈组织对CO2激光重复照射的反应.方法健康成年恒河猴1只,选取附着龈宽度大于4mm的颊侧牙龈作为实验部位.激光参数为8w 0.03s on/0.05 off,采用匀速扫描式垂直照射牙龈,共照射6块牙龈组织,使其均为直径为4mm的圆形.其中2块作为对照,其余4块组织每隔7天加照激光一次.记录组织的肉眼变化.第3次加照后7天、14天取活检,做组织学切片,常规HE染色.观察牙龈组织对CO2激光重复照射的反应、愈合情况.结果 CO2激光加照3次后7～14天,牙龈组织基本愈合.整个试验过程中,组织无明显出血及炎症反应,无瘢痕形成.结论牙龈组织对CO2激光重复照射反应良好.

吸烟对牙龈上皮棘层细胞凋亡影响研究

目的 探讨吸烟对牙龈上皮棘层细胞凋亡的影响及可能的机制.方法 本研究于2004年12月至2010年12月在济南市口腔医院和山东大学口腔医院进行.选取52例具有不同吸烟史、无严重系统疾病且行牙冠延长术或智齿拔除术的患者,根据吸烟史、日平均吸烟支数和总吸烟支数将患者分为轻度吸烟组(吸烟史＜5年或日平均吸烟≥2～10支,且总吸烟支数约1.5万支以下)21例、重度吸烟组(吸烟史≥5年或日平均吸烟≥10支,且总吸烟支数约1.5万支以上)31例.另取无吸烟史的10例患者作为对照组.采用原位末端标记(TdT-mediateddUTP nick end labeling,TUNEL)法检测各组患者牙龈上皮棘层细胞的凋亡情况；Student-Newman-Keuls(SNK)法计算各吸烟组与对照组及各吸烟组之间的差异,取α =0.05水准；PV免疫组化法对凋亡抑制基因Bcl-2的表达进行组织定位.结果 各吸烟组患者牙龈上皮棘层细胞凋亡阳性的表达与对照组患者间差异均有统计学意义(P＜ 0.01)；轻度吸烟组和重度吸烟组患者间差异也有统计学意义(P＜0.01).Bcl-2在吸烟者牙龈上皮的基底层和棘层表达较对照组减弱.结论 吸烟可能通过降低促Bcl-2的表达,促进牙龈上皮棘层细胞凋亡的发生,干扰牙龈上皮的正常代谢.

RANKL在犬乳恒牙替换期牙龈上皮中的表达

目的 研究核因子κB受体活化因子配体(RANKL)在犬乳恒牙替换期牙龈上皮中的蛋白表达及作用.方法 采用免疫组织化学方法检测犬乳恒牙替换期牙龈上皮中RANKL的染色情况.实验组为处于前牙替换期的12周龄犬,对照组为恒前牙牙根发育完成的24周龄犬.比较两组间相应细胞的RANKL免疫组化染色光密度值,进行配对t检验.结果 RANKL的阳性信号表达于犬乳恒牙替换期牙龈上皮中的棘细胞和基底细胞.与对照组相应细胞RANKL表达强度有差别(P＜0.05).结论 RANKL在犬乳恒牙替换期的牙龈上皮中有表达,可能在牙齿萌出过程中起作用.

牙周GTR手术的护理配合

引导性组织再生术(GTR)是在牙周手术中利用膜性材料作为屏障,阻挡牙龈上皮在愈合过程中沿根面生长,阻挡牙龈结缔组织与根面的接触,并提供一定的空间,引导具有形成新附着能力的牙周膜细胞优先占领根面,从而在原已暴露于牙周袋内的根面上形成新的牙骨质,并有牙周膜纤维埋入,形成新附着性愈合.

表皮生长因子对结合上皮和牙龈上皮体外损伤修复的影响

目的:研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对结合上皮(junctional epithelium,JE)和牙龈上皮(gingival epithelium,GE)体外损伤后细胞修复和增殖的影响.方法:采用RT-PCR和免疫细胞化学方法,分别检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,ECFR)mRNA和蛋白在JE和GE中的表达;制备细胞爬片,待生长融合至单层时,于玻片中央作宽为3mm的损伤区,然后加入含有EGF(20ng/mL)的条件培养液继续培养,直接加新鲜培养液作为阴性对照.在损伤后第5、9和12天,分别作HE和增殖细胞核抗原(proliferating cell nucleal antigen,PCNA)染色,计算细胞修复率及PCNA阳性率,采用SAS6.12软件包进行统计学分析.结果:RT-PCR显示,JE表达EGFR mRNA,与GE之比为1:1.2;EGFR蛋白在两者表达均为阳性.在第9天,EGF促进GE和JE损伤后的细胞增殖,与阴性对照组比较,均有显著性差异(P<0.05),但GE和JE两组间无显著差别(P>0.05).另外,EGF也可以促进GE和JE损伤后的细胞修复,在第9和12天,GE的修复速度显著快于JE(P<0.05).结论:JE和GE细胞均存在EGFR,EGF对两者体外损伤后的细胞修复与增殖具有调节作用.

人结合上皮和牙龈上皮细胞的培养及生物学特性比较

目的:比较人结合上皮(junctional epithelium,JE)与牙龈上皮(gingival epithelium,GE)的生物学特性.方法:采用细胞培养和免疫组化方法培养鉴定人JE细胞,研究其生物学性质,并与培养的人GE细胞进行比较.结果:人JE细胞形态多样,大小不等,连接疏松,核分裂像多见;而人GE细胞呈典型的角质细胞形态,大小均匀,排列紧密,呈"铺路石"状.免疫组化CK-Pan染色,2种细胞均为阳性,CK19染色JE细胞为阳性,而GE仅见少量散在阳性细胞.生长曲线显示,JE细胞潜伏期(约7d)较CE细胞(约3d)长;进入指数增生期后,JE细胞迅速增殖达高峰(约4d),衰退较快;而GE细胞则匀速增殖达顶点(约7d),平缓下降.JE细胞倍增时间48～60h,可传5代;GE细胞倍增时间72～96h,可传7代.结论:人JE细胞是一种不同于GE细胞的分化程度较低的独特细胞,在本实验培养条件下,人JE细胞的代数少于GE,影响对其深入研究,有待改进培养条件和方法.

吸烟对牙龈上皮细胞凋亡的影响

目的:观察不同程度吸烟患者的牙龈上皮棘层和基底层细胞凋亡的情况,评价吸烟对牙龈上皮细胞正常代谢和蛋白质分泌的影响.方法:选取47例具有不同吸烟史、无严重系统疾病且行牙冠延长术或智牙拔除术的患者为研究对象,男41例,女6例,年龄18～29岁(平均年龄21.4岁),根据吸烟史、日平均吸烟支数和总吸烟支数,将患者分为Ⅰ(轻)度(吸烟史＜5a,或2≤日均支数＜10且总支数约1.5万支以下)19例,Ⅱ(重)度(5a≤吸烟史,或10≤日均支数且总支数约1.5万支以上)28例.另取无吸烟史的10例患者作为对照组.采用原位末端标记(TdT-mediated-dUTP nick endlabeling,TUNEL)法检测牙龈上皮棘层和基底层细胞的凋亡情况.采用Newman-Keuls法比较各吸烟组之间及其与对照组间的差异,取α=0.05水准.结果:吸烟者的牙龈上皮棘层和基底层细胞凋亡阳性的表达高于未吸烟者,且棘层(P＜0.01)改变较基底层(P＜0.05)明显.轻度吸烟组和重度吸烟组之间也存在显著性差异(P＜0.05、P＜0.01).结论:吸烟对牙龈上皮棘层的凋亡具有明显的促进作用,从而干预上皮细胞的正常蛋白分泌和代谢.

微型种植体导致牙龈上皮异位植入的可能性初探

目的:初步探讨微型种植体植入时携带牙龈上皮进入牙槽骨的可能性.方法:以Beagle犬为实验动物,在种植部位牙龈处注射含GFP的2型腺相关病毒(adeno-associated viral-2-green fluorescent protein,AAV2-GFP).3周后采用无切口植入方式植入12枚微型种植体,并于当天处死动物,制作连续组织切片,通过GFP荧光和角化蛋白免疫组化检测种植体周围牙龈上皮是否存在.结果:两种检测方法均未发现种植体-骨界面有牙龈上皮的存在.结论:微型种植体植入时未发现携带牙龈上皮进入牙槽骨.

RANKL在犬牙替换期牙龈上皮中的mRNA表达

目的:研究RANKL在犬乳恒牙替换期牙龈上皮中的mRNA表达及作用.方法:采用原位杂交法检测犬乳恒牙替换期牙龈上皮中RANKL的染色情况.实验组为处于前牙替换期的12周龄犬3只,对照组为恒前牙牙根发育完成的24周龄犬3只.比较两组间相应细胞的RANKL原位杂交染色光密度值,进行两样本t检验.结果:RANKL的mRNA阳性信号表达于犬牙替换期牙龈上皮中的棘层细胞和基底层细胞,实验组与对照组相比差别有统计学意义(p<0.05).结论:在牙齿替换过程中,RANKL可能参与牙龈上皮组织改建.

乏氧抑制中性粒细胞穿越牙龈上皮模型的建立

目的 观察乏氧对中性粒细胞体外穿越牙龈上皮模型的影响.方法 体外培养人牙龈上皮细胞并构建牙龈上皮模型,自外周血分离纯化中性粒细胞,使其在趋化剂的诱导下穿越牙龈上皮模型,以血平板计数和中性粒细胞髓过氧化物酶活性测定等方法检测中性粒细胞的穿越效率.结果 常氧环境下(21％ O2),3h内66.8％～78.1％的中性粒细胞完成穿越牙龈上皮模型,但乏氧环境下(1％O2)穿越效率仅23.1％～27.5％.结论 体外条件下乏氧抑制中性粒细胞穿越牙龈上皮模型.

抗菌肽与口腔健康

口腔是一个开放的体腔,暴露于大量的生物、化学和机械刺激中.口腔内的微生物包括细菌、真菌、病毒等,仅细菌就多达400多种,大部分以共生形式存在.念珠菌是口腔内常见的真菌,高达60%的人群口腔可以检出.而在健康状况下,口腔内共生菌与病原菌之间能维持平衡状态.这主要因为口腔内多层天然保护屏障的存在.口腔粘膜是隔离内源性环境和外界的天然保护屏障,同时也是人体唯一的有牙齿硬组织突破牙龈软组织萌出至与外界相通的口腔环境中的场所.围绕牙体的牙龈上皮是口腔粘膜上皮的重要组成部分之一,亦长期处于菌斑等有菌环境中.口腔粘膜能维持健康状态是因为其具有庞大复杂的防御体系,其中,宿主口腔天然免疫系统起着关键的作用.

种植体-软组织结合界面生物封闭的研究进展

种植体从口腔环境进入软组织及骨内,由于牙种植体表面没有牙骨质及牙周膜纤维,故种植体-软组织结合界面生物封闭就成为影响种植体成功的一个重要因素.生物封闭形成机制的研究证实半桥粒在上皮附着中起到了重要作用;而种植体周围结缔组织的附着存在众多争议;生物封闭的影响因素,包括材料、表面构造及表面处理等.

结合上皮中细胞因子的表达和作用

结合上皮作为牙周软硬组织交界处特殊的连接和封闭结构,在抵抗细菌侵袭、维持牙周组织完整性方面有重要作用.研究表明结合上皮可分泌和表达多种细胞因子(生长因子、细胞粘附分子和炎症介质等),直接或间接参与组织平衡的调节,在牙周组织的形成发育、损伤修复中发挥重要作用.本文就这方面的研究进展作一综述,旨在探讨牙周病的发病机制,对治疗和预后均具有重要的实用价值.

HIV感染牙周炎患者口腔牙龈上皮中的朗格罕细胞减少和角朊细胞HLA-DR表达增加

非血管化骨移植种植体以及即刻种植体与软组织结合的实验观察

目的:观察非血管化骨移植种植以及即刻种植体钛金属表面与软组织的结合状况,分析影响二者结合的因素.方法:拔除狗的一侧下颌前磨牙,4 周后截除无牙下颌骨段,自体非血管化髂骨移植同时植入纯钛种植体修复下颌骨缺损.对照组动物拔除一侧下颌前磨牙时同期在牙槽窝内植入同样的种植体,缝合牙龈.在术后4、8、16 周处死动物,以40 g/L中性多聚甲醛灌注固定后,取种植体颈部周围软组织.肉眼观察2 组动物种植体与周围软组织结合的紧密程度;HE染色观察结合上皮的组织结构;透射电镜观察结合上皮与种植体结合面细胞超微结构.结果:2 组动物在术后4周时,种植体顶端已出龈暴露在口腔内,颈部周围的软组织已达初步封闭;两者的结合还较疏松,软组织较薄,细胞膜的表面突起较少.术后8 周时,种植体的颈部软组织已完全封闭,软组织与钛表面结合紧密,即刻种植组动物可见明显的结合上皮;超微结构可见结合上皮有较多的细胞膜突起.术后16 周,2 组的结果与8 周时相似.整个实验过程未发现桥粒结构的形成.结论:在没有明显创伤和感染的情况下,两者均可形成良好的结合;即刻种植体与周围软组织结合较非血管化骨移植种植体更致密.2 种种植方法结合上皮与钛表面都不能形成桥粒结构.