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猪脂肪源间充质干细胞诱导成脂分化及Krüppel样因子2的表达
目的 旨在阐明猪脂肪源间充质干细胞(AMSCs)在诱导成脂分化过程中Krtüppel样因子2(KLF2)的表达模式.方法 采用Ⅰ型胶原酶消化法处理猪脂肪组织,经原代和传代培养分离、纯化和扩增AMSCs,用流式细胞仪检测AMSCs纯度,在倒置显微镜下用形态学和油红O染色法检测AMSCs的成脂分化,用实时定量PCR检测KLF2的表达模式,并与过氧化物酶体增殖物激活受体2(PPARy2)的表达进行了比较.结果 分离、纯化的AMSCs,其间充质干细胞表面抗原CD29、CD44和CD105表达量分别为91.7％、95.1％和95.6％,而造血干细胞表面抗原CD34表达量仅为3.39％;在诱导分化2d后,个别细胞质中出现小脂滴,且含脂滴的细胞数量和脂滴量随诱导时间的延长而增加,在诱导分化第18天成脂分化率达48.2％;在诱导分化第2天、第8天和第16天,KLF2的表达量分别为1.84±0.206、1.07±0.072和0.83±0.095,而PPARy2 mRNA的表达量分别为3.06±0.542、13.22±0.5736和15.11±1.073.结论 获得纯度较高的AMSCs,具有良好的成脂分化潜能,KLF2的表达量在成脂分化早期的前脂肪细胞阶段增加,成脂分化开始后逐步减少,KLF2作为脂肪分化负调控转录因子而发挥作用.
