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Rho蛋白解离抑制因子α在高血压大鼠胸主动脉的表达
目的 研究高血压大鼠胸主动脉以及周期性张应变刺激下血管平滑肌细胞(VSMCs)的Rho蛋白解离抑制因子(RhoGDIα)的表达变化,探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)信号通路对其表达的调控影响. 方法 应用实时PCR和Western blotting技术分别检测4周、12周和18周自发性高血压大鼠(SHR, n =4)和正常血压京都种鼠(WKY, n =4)胸主动脉RhoGDIα mRNA和蛋白的表达;免疫组织化学检测RhoGDIα在SHR和WKY胸主动脉的定位;Western blotting技术检测腹主动脉缩窄性高血压大鼠(ACR, n =6)胸主动脉RhoGDIα蛋白的表达;应用细胞应变加载系统对大鼠胸主动脉VSMCs施加1Hz、10%的周期性张应变,在有或无血管紧张素亚型Ⅰ(AT1)受体拮抗剂 L-158809的条件下观察周期性张应变刺激对VSMCs RhoGDIα蛋白表达的影响. 结果 4周与12周SHR和WKY胸主动脉RhoGDIα表达无显著性差异,而在18周组,SHR胸主动脉RhoGDIα表达显著高于WKY.RhoGDIα主要存在于血管中膜VSMCs.2周和4周ACR胸主动脉RhoGDIα表达较正常对照组显著上调,提示在高血压状态下的主动脉RhoGDIα的表达上调.10%周期性张应变加载抑制了VSMCs的RhoGDIα表达,加入ATI受体拮抗剂后RhoGDIα表达显著低于10%周期性张应变加载组. 结论 大鼠高血压时主动脉RhoGDIα表达上调;Ang Ⅱ信号通路在RhoGDIα表达调控中起重要作用.
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周期性张应变对人牙周膜细胞迁移的影响
目的 探讨周期性张应变对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)迁移的影响及其相关机制,为进一步了解机械力对hPDLC功能的影响提供资料.方法 应用FX-4000T细胞应变加载系统,对体外培养的hPDLC施加周期性张应变,牵张幅度分别为10%和20%,加载时间为6 h和24 h,频率均为0.1 Hz,以未加载的静态细胞作为对照组,应用划痕法观察hPDLC的迁移,蛋白质印迹法检测hPDLC的基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的表达变化;用细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)的特异性抑制剂PD98059预处理hPDLC后,在0.1 Hz、10%幅度条件下,加载6 h,检测细胞p-ERK1/2和MMP-9表达的变化.用细胞迁移划痕法观察加载10%和20%幅度张应变,观察24 h后PD98059和MMP家族的抑制剂强力霉素(doxycycline,DOX)对hPDLC迁移的影响.结果 细胞迁移划痕实验结果显示,牵张幅度和加载时间均可显著促进细胞迁移.与静态组相比,施加牵张幅度分别为10%和20%的张应变6 h后,hPDLC迁移变化不明显,但加载24 h后,10%和20%幅度的张应变均显著促进了hPDLC迁移(P<0.05),细胞迁移率分别为(45 ±8)%和(66±14)%,且20%比10%幅度牵张对细胞迁移的促进作用更显著(P<0.05).蛋白印迹法结果显示,周期性张应变促进了hPDLC的MMP-9表达.牵张幅度对细胞MMP-9的表达有显著影响(P<0.05),但加载时间对细胞MMP-9的表达无显著影响.ERK1/2的抑制剂PD98059不仅可以明显抑制张应变诱导的p-ERK1/2活化,而且可通过ERK信号通路明显抑制张应变诱导的细胞MMP-9表达.细胞迁移划痕实验还证实,加载幅度分别10%和20%的张应变24 h后,抑制剂PD98059和DOX均能有效抑制周期性张应变诱导的hPDLC迁移.结论 周期性张应变可通过激活hPDLC的ERK信号通路,促进细胞的MMP-9表达,从而诱导体外培养的hPDLC迁移.
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Flexcell系统加载周期性张应变对不同细胞增殖凋亡活性的影响
力学刺激参与调节体内细胞多种生命活动,如增殖、凋亡、分化等.其中周期性张应变作为机体常见的一种受力模式,广泛存在于骨关节运动系统,心血管系统,呼吸系统等.然而体内力学环境十分复杂,影响因素颇多,给类似的生物力学相关基础研究带来了诸多不便.Flexcell作为一种新型的体外培养细胞的力学加载装置,可将复杂的体内力学刺激简化模拟出来,提供包括周期性张应变等多种力学刺激加载方式,这对生物力学的研究是一个极大的促进.多项研究已发现Flexcell装置提供的周期性张应变加载可引起受力细胞的增殖和凋亡活性改变,这种改变出现的程度与时机却颇有争议,类似的研究也可能出现相反的结论,这与体外受力细胞的自身类型状态,Flexcell系统下所设定的周期性张应变施力参数(周期性张应变大小,作用时间,作用频率,力学波形)均有关联.本文就Flexcell系统下加载周期性张应变对不同细胞增殖和凋亡活动的影响做一综述.理解这些特性,将对因病理力学刺激下增殖凋亡平衡发生紊乱而导致的相关疾病的预防与治疗有着重要的指导意义.
关键词： 周期性张应变 Flexcell加力装置 增殖 凋亡 -
生理性张应变通过增加核骨架蛋白Emerin表达抑制血管平滑肌细胞凋亡
目的 探讨细胞核骨架蛋白Emerin及其调控的转录因子在感受张应变力学刺激影响血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)凋亡中的作用.方法 应用FX-5000T张应变加载系统,对体外培养的VSMCs施加5％幅度、1.25 Hz频率生理性张应变,以静止组为对照;应用cleaved-caspase3 ELISA试剂盒检测VSMCs凋亡水平,Western blotting检测VSMCs细胞核骨架蛋白Emerin蛋白表达水平.静态条件下,RNA干扰抑制VSMCs的Emerin表达,Protein/DNA芯片检测345种转录因子活性;将特异性干扰Emerin后活性发生明显变化(上调或下调超过2倍)的转录因子进行IPA(Ingenurity Pathway Analysis)信息学分析,筛选与凋亡功能相关的转录因子;染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,CHIP)结合qPCR检测特异性干扰Emerin对其与两种转录因子motif区域结合能力的影响.结果 与静止组相比,5％生理性张应变加载24 h后,VSMCs凋亡水平显著降低,提示生理性张应变对细胞具有保护作用;5％张应变作用6、12和24 h均显著增加VSMCs的Emerin表达水平.静态条件下RNA干扰抑制Emerin表达,VSMCs凋亡水平显著增加,且10种参与细胞凋亡功能调控的转录因子活性显著上调(2倍以上),包括CREB-BP1、p300、p55、MAX、NRF-1、STAT1、STAT3、TEF1、TR和BZP;CHIP-qPCR结果显示,Emerin特异性干扰可以显著降低Emerin与STAT家族的两个成员STAT1和STAT3的motif区域结合能力.结论 生理性张应变可能通过增加核骨架蛋白Emerin表达而调控Emerin与STAT1、STAT3等多种凋亡相关转录因子motif区域结合,进而调控转录因子活性影响VSMCs凋亡.探讨张应变力学刺激调控VSMCs功能的力学生物学分子机制,对揭示血管生理稳态维持和血管病理重建的分子机制具有一定意义.
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长链非编码RNA XR007793在病理性高张应变诱导平滑肌细胞增殖中的作用
目的 探讨高血压条件下异常升高的周期性张应变刺激对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖活性的影响以及VSMCs中一种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) XR007793在其中可能的作用.方法 应用体外周期性张应变加载系统Flexcell-4000对VSMCs分别施加5％生理性张应变和15％病理性高张应变,加载频率为1.25 Hz,加载时间24 h.荧光实时定量PCR检测XR007793及其共表达基因:信号转导与转录激活因子2(STAT2)、细胞分裂相关蛋白8(CDCA8)、原癌基因LMO2和干扰素调节因子(IRF7)的表达变化,Western bloting方法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达变化,RNA干扰技术抑制VSMCs的XR007793表达,静态条件下流式细胞术检测VSMCs周期变化,牵拉条件下Brdu检测VSMCs增值变化情况.结果 与5％生理性张应变组相比,15％病理性高张应变显著下调XR007793表达水平,促进VSMCs增值活性并上调STAT2和CDCA8的表达水平.静态条件下干扰XR-007793,VSMC增殖水平显著上升.高周期性张应变条件下干扰XR-007793,VSMC增殖水平上升,CDCA8表达水平上升.结论 病理性高张应变可能通过降低XR007793表达来影响CDCA8表达变化,进而调控VSMCs增殖功能变化过程.研究结果为阐明高血压条件下血管重建机制和药物治疗靶标的研究提供新的实验依据.
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TNF-α促进内皮源性微体的数量与ICAM-1表达
目的 探讨高张应变调控的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对内皮源性微体(endothelial microparticles,EMPs)数量与表面细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的作用.方法 采用Flexercell细胞张应变加载系统对大鼠胸主动脉内皮细胞(endothelial cells,ECs)分别施加5％(模拟正常生理状态)和18％(模拟高血压状态)幅度的周期性张应变,加载频率均为1.25 Hz,加载持续时间为24 h,实时PCR检测不同幅度张应变条件下ECs的TNF-α mRNA表达水平.之后应用TNF-α刺激大鼠胸主动脉ECs,收集上清液,超速离心提取得到内皮源性微体(endothelial microparticles,EMPs);用亲脂性苯乙烯基(lipophilic styryl)以及透射电镜对EMPs进行形态鉴定;流式细胞术对TNF-α刺激产生的Annexin V阳性EMPs进行计数,并检测EMPs表面ICAM-1的表达.结果 与5％正常张应变组相比,18％高张应变条件下ECs的TNF-α表达水平显著上升.TNF-α能够显著上调ECs产生Annexin V阳性的EMPs数量,且TNF-α刺激ECs产生的EMPs表面ICAM-1表达量显著增加.结论 高张应变条件下ECs高表达TNF-α可能介导了EMPs产生和表面ICAM-1高表达.研究结果为后续探讨EMPs在血管重建力学生物学机制中的作用提供新的实验证据.
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在高血压动脉重建中microRNA-21对血管平滑肌细胞细胞外基质表达的调控作用
目的 探讨在高血压动脉重建中microRNA-21(miR-21)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的调控作用及其机制.方法 建立腹主动脉缩窄型大鼠高血压模型,大鼠分为假手术对照组、高血压2周组和高血压4周组;对体外培养的大鼠主动脉VSMCs施加频率为1.25 Hz周期性张应变,加载幅度分别为0％(静态对照组)、5％(正常张应变组)、15％(模拟高血压状态的高张应变组),加载持续时间均为12 h.采用Western blotting和Real time RT-PCR技术,分别检测动脉和细胞样品ECM以及miR-21的表达.用miR-21特异干扰片段抑制培养的VSMCs miR-21表达,然后检测VSMCs的ECM、miR-21和Smad 7表达变化.结果 与假手术对照组相比,高血压2周组胸主动脉ECM和miR-21的表达显著上升;高血压4周组胸主动脉的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和miR-21表达显著上升.与静态对照组和5％张应变组相比,15％张应变组VSMCs的Ⅰ型胶原表达无显著变化,而Ⅲ型胶原表达显著升高,Smad 7表达显著下降,周期性张应变增强VSMCs的miR-21表达.干扰miR-21降低周期性张应变状态下VSMCs的miR-21表达以及Ⅲ型胶原蛋白水平表达,上调VSMCs的Smad 7表达.结论 高血压血管重建导致大鼠胸主动脉ECM和miR-21高表达.周期性高张应变可诱导VSMCs的miR-21高表达,再通过其调节Smad 7蛋白,进而调控VSMCs的ECM,尤其是Ⅲ型胶原的表达,参与高血压血管重建.
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FOXO1参与高血压条件下异常张应变诱导的血管平滑肌细胞增殖
目的 探讨高血压条件下异常升高的周期性张应变刺激对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响,以及Forkhead转录因子1(FOXO1)在其中可能的作用.方法 构建腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,并以假手术组为对照,应用FX-4000T体外周期性张应变加载系统,分别对VSMCs施加5％的生理性张应变和15％的高血压病理性张应变.Western blot检测VSMCs的FOXO1及p-FOXO1表达水平,BrdU法检测VSMCs增殖活性.RNA干扰技术抑制VSMCs的FOXO1表达,检测FOXO1、p-FOXO1表达以及VSMCs增殖活性变化.结果 腹主动脉缩窄术后2和4周,大鼠血压较假手术大鼠明显增高.与假手术大鼠相比,高血压大鼠血管壁细胞增殖活性明显增高,同时FOXO1及p-FOXO1表达水平也显著性升高.细胞实验表明,与5％张应变组相比,15％张应变加载显著上调VSMCs的FOXO1、p-FOXO1表达水平,以及VSMCs增殖活性.静态条件下RNA干扰抑制VSMCs的FOXOI及p-FOXO1表达,VSMCs的增殖活性明显降低.结论 高血压病理条件下,异常增高的周期性张应变可能通过促进FOXO1表达和磷酸化诱导VSMCs增殖.以动物模型观察现象,在细胞分子水平探讨机制,旨在明确FOXO1在高血压血管重建中的作用及其力学生物学机制,为阐明高血压血管重建的发病机理和药物治疗靶标的研究提供新的实验依据.
关键词： 高血压 周期性张应变 血管平滑肌细胞 Forkhead转录因子 细胞增殖 -
周期性张应变通过活性氧生成促进膝关节骨关节炎患者的软骨细胞发生凋亡
目的 探讨周期性张应变诱导体外培养的膝关节骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者软骨细胞发生凋亡过程中的活性氧(reactive oxygen species,ROS)的作用机制.方法 对受力组软骨细胞施加频率0.5 Hz、强度20％延伸率的周期性张应变.对照组细胞的培养条件与受力组细胞一致,但不受力.N-乙酰半胱氨酸(NAC)和丁胱亚磺酰亚胺(BSO)干预组的软骨细胞在受力前分别使用NAC和BSO进行预处理.流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFHDA为荧光探针检测细胞内ROS含量,分光光度法检测软骨细胞内caspase-9活性变化.结果 0.5 Hz、20％延伸率的周期性张应变可以刺激软骨细胞内ROS、caspase-9活性及细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).使用NAC和BSO抑制及升高细胞内ROS含量后,可以明显抑制及促进周期性张应变诱导的软骨细胞的caspase-9活性及细胞凋亡率(P＜0.05).结论 周期性张应变通过促进ROS生成,进而激活caspase-9介导膝关节OA患者软骨细胞发生凋亡.抑制ROS的生成可以减轻周期性张应变导致的软骨细胞凋亡.
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周期性张应变对破骨前体细胞和破骨细胞增殖和抗酒石酸酸性磷酸酶的影响
目的 研究不同强度的力学载荷对破骨细胞及其前体细胞增殖、分化和功能的影响.方法 以破骨诱导液培养RAW264.7破骨前体细胞,同时施加3d的周期性张应变,然后培养4d;另外一组RAW264.7细胞以破骨诱导液培养4d,将其诱导为破骨细胞,再施加3d的周期性张应变.结果 在不同张应变下,两组细胞增殖活性的变化大致相同,但细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatage,TRAP)活性和破骨细胞(TRAP阳性多核细胞)数量的变化明显不同.在2500με的中等强度张应变下,第1组的TRAP活性降幅和破骨细胞数量减幅均高,而后者TRAP活性降幅和破骨细胞数量减幅均低.结论 不同张应变对分化初期破骨前体细胞和已分化出破骨细胞的破骨前体细胞的破骨分化和功能状态的影响有明显差异.
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ERK信号通路参与调控周期性张应变诱导的人牙周膜细胞增殖
目的 探讨周期性张应变对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖的影响及其相关机制.方法 应用FX-4000T细胞应变加载系统,对体外培养的hPDLCs施加周期性张应变,幅度分别为10%和20%,加载时间为6 h和24 h,频率均为0.1 Hz,以未加载的静态细胞作为对照组.应用流式细胞术检测人牙周膜细胞细胞周期的变化,并应用Western blot法检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞内信号转导分子p-ERK1/2表达的变化.用ERK1/2的特异性抑制剂PD 98059预处理细胞后,在0.1 Hz,10%幅度条件下,加载6 h,检测p-ERK1/2的表达水平变化对细胞PCNA表达的影响.结果 与静态组相比,周期性张应变增加了S期人牙周膜细胞的比例,并诱导人牙周膜细胞的PCNA和P-ERK1/2表达增加,10%幅度和20%幅度相比无显著性差异.同一幅度张应变,加载6 h和24 h对细胞PCNA和P-ERK1/2表达的影响无显著性差异.ERK1/2的抑制剂PD98059不仅可以明显抑制张应变诱导的p-ERK1/2活化,而且张应变诱导的细胞PCNA表达也被明显抑制.结论 周期性张应变可激活ERK信号通路,促进体外培养人牙周膜细胞的增殖.
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周期性张应变作用下成骨细胞凋亡的体外研究
目的 研究周期性张应变对体外培养的成骨细胞凋亡作用及其与细胞增殖和细胞分化之间的关系.方法 酶消化法分离培养新生SD大鼠颅顶骨成骨细胞,P2-P4代成骨细胞培养2 d和4 d后,用无血清培养法诱导成骨细胞凋亡,同时使用Flexcell 4000TM细胞应变加载系统分别对细胞施加72 h变形率为6%和13.6%的等轴周期性张应变.根据总培养时间分为5 d和7 d两组.运用流式细胞技术对成骨细胞凋亡水平进行检测,同时进行细胞记数及碱性磷酸酶(ALP)蛋白含量检测.结果 与不加力的对照组相比,6%周期性张应变使成骨细胞凋亡率有不同程度的降低并伴随细胞数量增加;而在13.6%的周期性张应变下,成骨细胞凋亡率增加的同时,细胞数量有不同程度地降低;而相同培养时间下,5 d组细胞对6%的周期性张应变更加敏感,而7 d组细胞对13.6%的周期性张应变更加敏感.ALP活性在两种张应变刺激作用下均有所下降.结论 周期性张应变对成骨细胞的凋亡具有影响,不同力值的周期性张应变可通过促进或抑制细胞凋亡的方式调控成骨细胞的活性.
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周期性张应变对人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性的影响
目的:研究周期性张应变对人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性的影响.方法:取新鲜拔除的健康恒牙牙髓,采用组织块贴壁法培养原代人牙髓细胞,通过Fhxcell细胞应力培养系统,分别加载2%和8%的周期性张应变,加载频率为1 Hz,加载时间分别为0.5 h,12 h及24h,以未加载的静态细胞作为对照组.应用倒置相差显微镜、台盼蓝法及MTT法分别检测细胞形态、存活率和增殖活性的变化.数据采用SPSS16.0软件包进行单因素方差分析.结果:张应变加载后,贴壁的牙髓细胞形态为长梭形,有明显的极性突起,并且排列趋向一致,加载24h变化更明显.2%、8%加载组细胞的存活率显著大于对照组,12h加载组细胞存活率高,24h加载组略有下降.2%、8%加载组细胞的增殖能力与对照组相比增加,2%组加载24h增加明显(p<0.01).结论:周期性张应变对离体培养的人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性有明显影响,并呈应变大小和时间依赖性.
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JNK及P38信号分子在周期性张应变下调大鼠椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达中的作用
[目的]探讨JNK及P38信号分子在周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞蛋白多糖-aggrecan mRNA表达中的作用.[方法]采用自制周期性张应变加载装置,对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞施以幅度为10％,频率为1 Hz的张应变刺激,Western blot分析周期性张应变处理不同时间对椎间盘纤维环细胞MAPK家族中JNK及P38信号分子磷酸化水平的影响,并探讨其特异性阻断剂对周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达的影响.[结果]周期性张应变可上调纤维环细胞JNK蛋白磷酸化水平,具有双向、快速的特点,但对P38磷酸化水平无明显影响；JNK抑制剂SP600125预处理可部分逆转周期性张应变下调纤维环细胞aggrecan mRNA的作用.[结论]周期性张应变可激活椎间盘纤维环细胞JNK信号分子,并通过该信号分子下调椎间盘纤维环细胞aggrecan mRNA的表达.
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周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达的分子机制研究
目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在周期性张应变下调椎间盘纤维环细胞聚蛋白多糖(Aggrecan) mRNA中的相关机制.方法 采用自制周期性张应变加载装置对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞施以幅度为10％、频率为1 Hz的张应变刺激.采用Western blot技术检测周期性张应变作用不同时间后对椎间盘纤维环细胞ERK1/2信号分子磷酸化水平的影响,并观察其特异性阻断剂PD98059及siRNA-ERK2对周期性张应变下调椎问盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达的影响.结果 周期性张应变可上调纤维环细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平,具有双向、快速特点；阻断剂PD98059以及siRNA-ERK2均可部分逆转周期性张应变对纤维环细胞Aggrecan mRNA的下调作用.结论 周期性张应变可激活椎间盘纤维环细胞ERK1/2信号分子,并通过该信号分子下调椎间盘纤维环细胞Aggrecan mRNA表达.
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周期性张应变激活整合素β1-FAK信号途径调控皮肤成纤维细胞运动
目的 探讨周期性张应变对皮肤成纤维细胞的影响,寻找引起细胞运动的佳张应变幅度及其信号转导机制.方法 成纤维细胞培养于预敷胶原蛋白基质的6孔柔性培养板,对柔性培养孔施加10次/min的负压(-135 mmHg),每孔柔性板由中心到周边张应变幅度介于0%～24%.倒置显微镜观察细胞旋转角度,细胞免疫染色和激光共聚焦显微镜观察细胞整合素β1在细胞内的改变,免疫印迹观察细胞整合素β1表达和黏着斑激酶(FAK)磷酸化.结果 发现15%的张应变幅度是诱导皮肤成纤维细胞运动的低张应变幅度.机械张应变诱导成纤维细胞整合素β1在细胞再分布和FAK磷酸化,整合素抗体β1部分抑制了FAK磷酸化和细胞运动.结论 机械张应变通过整合素β1-FAK途径引起皮肤成纤维细胞运动.
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周期性张应变对椎间盘纤维环细胞内游离钙离子浓度的影响
目的探讨周期性张应变对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞内Ca2+浓度([Ca2+])的影响及其可能机制.方法采用激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM荧光探针标记技术,测定周期性张应变对纤维环细胞内[Ca2+]的影响,并分析了EGTA、维拉帕米和氯化钆预处理对此作用的影响.结果应变为10%、频率为1 Hz的周期性张应变1 min使细胞内[Ca2+]增加1.13倍;EGTA可以阻断此作用;而维拉帕米和氯化钆仅可部分阻断.结论周期性张应变使纤维环细胞内[Ca2+]升高,细胞外钙内流起主要作用,且有不同的钙离子通道参与.
关键词： 周期性张应变 纤维环细胞 细胞内钙 激光扫描共聚焦显微镜 -
周期性张应变对纤维环细胞aggrecan mRNA表达的影响
目的 观察周期性张应变对椎间盘纤维环细胞蛋白多糖表达的影响.方法 采用自制周期性张应变加载装置,对培养的椎间盘纤维环细胞进行周期性张应变刺激,利用RT-PCR检测椎间盘纤维环中主要蛋白多糖aggrecan mRNA的表达变化情况.结果 10%周期性张应变使aggrecan mRNA的表达降低,2h降低20%左右,6、12h降低将近40%.结论 10%周期性张应变可以使纤维环细胞aggrecan mRNA的表达降低;周期性张应变可以从转录水平上影响纤维环细胞蛋白多糖的产生.
