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水通道蛋白-4在大鼠大脑中的定位研究
目的观察水通道蛋白-4(AQP4)在大脑实质和室管膜、脉络丛、后区、神经垂体、腺垂体和松果体中的分布,为研究脑组织中水分子运输和平衡以及内分泌腺体的分泌和调节机制提供形态学基础. 方法免疫组织化学漂洗法(LAB-SA、BCIP/NBT法). 结果 AQP4主要分布于软脑膜、脑室和导水管系统的室管膜、脉络丛等与脑脊液(CSF)直接接触的组织中及脑实质的血管周围;在脑实质内可见阳性细胞体;在海马的锥体细胞层、齿状回的颗粒细胞层和多形细胞层细胞呈阳性;在脑室周围器官如神经垂体、后区(AP)及松果体和腺垂体(包括中间部)各种腺细胞膜表面均可见AQP4的阳性标记. 结论 AQP4不仅与水分子的转运及平衡调节有关、同时与电解质代谢和内分泌活动有关,还可能与下丘脑的神经内分泌活动有关.
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成年大鼠后区神经干细胞的检测及鉴定
目的 观察性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)和巢蛋白(Nestin)阳性表达细胞及溴脱氧尿密啶核苷(BrdU)阳性标记细胞在后区的分布.方法 成年雄性SD大鼠12只,6～8周龄,随机分为两组,每组6只.一组大鼠按照50mg/kg(0.3ml)腹腔注射BrdU,连续3d给药,每天2次；另一组注射等量生理盐水.4d后灌注大鼠,行免疫组织化学及免疫荧光检测.结果 免疫组织化学染色显示,SOX2阳性表达细胞在后区的腹侧部呈明显的V字形分布,背侧部呈带状分布,中央部散在分布.Nestin阳性表达细胞在后区的腹侧部呈明显的V字形强阳性分布,中央部呈弱阳性表达.在后区可见少量阳性BrdU标记细胞.SOX2/BrdU荧光双标染色显示,SOX2阳性表达细胞较密集分布,可见少量SOX2/BrdU双阳性细胞.SOX2/Nestin荧光双标染色显示,SOX2阳性表达细胞较密集分布,可见少量SOX2/Nestin双阳性表达细胞.结论 后区SOX2及Nestin阳性细胞密集表达,呈明显的区域分布；在后区内存在少量BrdU阳性标记细胞及SOX2/BrdU和SOX2/Nestin双阳性细胞；后区可能存在神经干细胞/祖细胞.
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延髓后区对犬消化间期移行性复合运动的调节作用
目的 探讨延髓后区对胃肠消化间期移行性复合运动（MMC）及血浆胃动素水平的影响.方法 在8只犬的胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动.在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素.用RIA法测定血浆胃动素含量.观察：（1）消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化；（2）电损毁延髓后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响；（3）电损毁延髓后区对外源性胃动素启动MMC Ⅲ相收缩作用的影响.结果 （1）正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC.MMC Ⅲ相与血浆胃动素释放高峰同步发生.（2）电损毁延髓后区后, 胃窦和十二指肠MMC的收缩运动明显抑制,MMC Ⅰ相延长,Ⅱ、Ⅲ相明显缩短,失去了损毁前MMC周期性﹑时相性和移行性的特点,血浆胃动素浓度明显降低,外源性静脉注射胃动素不能启动MMC Ⅲ相收缩.结论 延髓后区对消化间期 MMC的周期发生和移行有重要的调控作用,其作用途径与胃动素介导有关.
关键词： 消化间期移行性复合运动 延髓 最后区 胃动素 -
延髓后区对犬消化间期移行性复合运动的调节作用
目的 探讨延髓后区对胃肠消化间期移行性复合运动（MMC）及血浆胃动素水平的影响.方法 在8只犬的胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动.在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素.用RIA法测定血浆胃动素含量.观察：（1）消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化；（2）电损毁延髓后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响；（3）电损毁延髓后区对外源性胃动素启动MMC Ⅲ相收缩作用的影响.结果 （1）正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC.MMC Ⅲ相与血浆胃动素释放高峰同步发生.（2）电损毁延髓后区后, 胃窦和十二指肠MMC的收缩运动明显抑制,MMC Ⅰ相延长,Ⅱ、Ⅲ相明显缩短,失去了损毁前MMC周期性﹑时相性和移行性的特点,血浆胃动素浓度明显降低,外源性静脉注射胃动素不能启动MMC Ⅲ相收缩.结论 延髓后区对消化间期 MMC的周期发生和移行有重要的调控作用,其作用途径与胃动素介导有关.
关键词： 消化间期移行性复合运动 延髓 最后区 胃动素 -
家兔延髓后区对心血管活动的调节
目的:探讨家兔延髓后区(AP)对心血管活动的调节作用及机制.方法:以10%脲酯和1%氯醛糖混合静脉麻醉家兔,人工呼吸.给AP不同频率(10 Hz～80 Hz)电刺激,观察平均动脉压(MAP)和心率(HR)的变化;及损毁CVLM或RVLM后AP兴奋的心血管效应改变.结果:电刺激AP,低频(10 Hz、20 Hz)刺激使MAP下降、HR减慢;高频(60 Hz、80 Hz)刺激使MAP升高,HR减慢.损毁CVLM后刺激AP,20 Hz刺激引起的降压作用消失(P＜0.01),80 Hz刺激效应同前(P＞0.05).损毁RVLM后刺激AP,20 Hz、80 Hz刺激引起的降压、升压作用均消失(P＜0.01).结论:低频电刺激AP,引起降压和心率减慢,高频电刺激AP引起升压和心率减慢;前者可能与兴奋CVLM有关,不同电刺激引起的心血管效应均通过RVLM介导.
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腓深神经对后区心血管中枢活动的调节作用
目的:观察腓神经(DPN)传入冲动对延髓后区(AP)兴奋引起的心血管效应的调节作用.方法:观察电刺激AP、AP+DPN,以及静注受体阻断后DPN的调节作用改变.结果:低频(20、40Hz)电刺激AP引起降压、而高频(60、80 Hz)电刺激引起升压效应;电刺激DPN可分别抑制AP兴奋引起的降压、升压效应(P<0.01).结论:DPN传入冲动可对AP兴奋的心血管效应进行调节,阿片肽系统可能参与其调节.
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巢蛋白和性别决定基因高迁移率组蛋白在快速老化小鼠后区的表达
目的:观察巢蛋白(nestin)与性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)阳性表达细胞在快速老化小鼠后区的分布.方法:成年SAMP8小鼠,8月龄,采用免疫组织化学和免疫荧光显色的方法观察巢蛋白与SOX2在后区的表达,同时设正常老化小鼠SAMR1作为对照.结果:巢蛋白免疫组织化学显色,SAMR1小鼠阳性细胞呈絮状或丝状表达,在背侧区分布稀疏;SAMP8小鼠免疫阳性细胞染色深,丝状结构粗大,在背侧区和外侧区分布密集,阳性细胞数目较SAMR1小鼠明显增多,差异具有统计学意义.SOX2免疫组织化学显色,SAMR1小鼠免疫阳性细胞染色深浅不一,散在分布;SAMP8小鼠大部分阳性细胞染色较深,在后区的背侧区和外侧区分布密集,阳性细胞数目较SAMR1小鼠明显增多,差异具有统计学意义.荧光双标显色,SAMR1小鼠SOX2阳性细胞散在分布,其间可见巢蛋白阳性表达,内侧区可见少量SO X2/nestin双表达细胞.SAMP8小鼠阳性表达强烈,SOX2/nestin双表达细胞增多.结论:巢蛋白及SOX2在快速老化小鼠SAMP8后区的表达明显增强,这表明阿尔茨海默病在一定时期时可能会影响后区的神经生发功能,导致神经干细胞/祖细胞的增殖或分化增强.
关键词： 最后区 巢蛋白 性别决定基因高迁移率组蛋白 神经生发 快速老化小鼠 -
颈动脉注射肾上腺髓质素对去缓冲神经大鼠后区神经元自发放电的影响
在63只切断两侧缓冲神经的麻醉Sprague-Dawley 大鼠, 应用细胞外记录的电生理学方法, 观察颈内动脉注射肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)对后区(area postrema, AP)神经元自发电活动的影响.实验结果如下: (1) 在记录到的78个自发放电单位中, 颈内动脉内注射AM (0.3 nmol/kg), 引起其中47个单位的自发放电频率由2.99±0.24增加到4.79±0.29 spikes/s (P<0.001), 20个单位自发放电频率由3.24±0.46下降至1.97±0.37 spikes/s (P<0.001), 另外11个单位自发放电频率无明显改变; 平均动脉压和心率无明显变化.(2) 颈内动脉注射降钙素基因相关肽受体阻断剂CGRP8-37 (3 nmol/kg)不能改变AM对自发放电的兴奋效应; (3)颈内动脉注射L-精氨酸(30 mg/kg)可减弱AM对自发放电的兴奋效应.以上结果提示, AM对后区神经元有兴奋作用, 此作用不是由降钙素基因相关肽受体介导, 但可被NO前体L-精氨酸所减弱.
关键词： 肾上腺髓质素 最后区 自发放电单位 降钙素基因相关肽受体拮抗剂 L-精氨酸 -
后区注射腺苷对大鼠血压、心率和肾交感神经放电的影响
在53只麻醉Sprague-Dawley 大鼠观察了后区内微量注射腺苷(1 ng/60 nl)对平均动脉压(MAP)、心率(HR)和肾交感神经放电(RSNA)的影响.实验结果如下: (1)后区内微量注射Ado后, MAP、HR 和RSNA分别由13.76±0.46 kPa、356.28±4.25 bpm和100±0%下降至11.23±0.49 kPa (P<0.001)、336.91±5.23 bpm (P<0.01)和70.95±5.19% (P<0.001); (2) 静脉注射非选择性腺苷受体拮抗剂8-苯茶碱 (8-phenyltheophylline, 150 μg/kg, 0.2 ml) 和选择性腺苷A1受体拮抗剂(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine, 500 μg /kg, 0.2 ml)后, 腺苷的上述抑制效应可被完全阻断; (3) 静脉注射ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲 (5 mg/kg, 0.2 ml)后, 腺苷的上述效应也被消除.以上结果提示, 后区微量注射腺苷对血压、心率和肾交感神经放电有抑制作用, 此作用与A1 受体介导的ATP敏感性钾通道开放有关.
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颈动脉内注射腺苷对去缓冲神经大鼠后区神经元放电的影响
在45只切断双侧缓冲神经的Sprague-Dawley 大鼠,应用细胞外记录方法, 观察了颈动脉内注射腺苷对76 个后区 (AP) 神经元自发放电活动的影响.所得结果如下:(1) 在记录到的42个自发放电单位中, 颈动脉内注射腺苷(25 μg/kg) 引起其中29个单位的放电频率由6.26±0.75 下降至4.74±0.76 spikes/s (P<0.01), 6 个单位放电频率由4.13±0.77增加至4.72±0.83 spikes/s (P<0.05),另外7个单位放电频率无明显变化, 而血压和心率在实验中无变化; (2)在应用非选择性腺苷受体拮抗剂8-苯茶碱(8-phenyltheophylline, 15 μg/kg) 的10个单位, 腺苷对放电的抑制效应可被完全阻断; (3) 应用选择性腺苷A1受体拮抗剂8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine, 50 μg/kg) 亦可有效地阻断腺苷对12个单位的抑制效应; (4) 应用ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲 (500 μg/kg)的12 个单位, 腺苷的上述效应也被消除.以上结果提示, 腺苷对AP区神经元自发放电有抑制作用, 而此作用与A1受体介导的ATP敏感性钾通道开放有关.
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内皮素通过后区易化大鼠延髓腹外侧头端区神经元活动
在35只切断双侧缓冲神经、用氨基甲酸乙酯-α-氯醛糖混合麻醉的Sprague-Dawley大鼠,应用细胞外记录的电生理学方法,由RM-6000型多道生理记录仪和WS-682G热阵记录器(频响范围0～2.8kHz)同步记录血压、心率和单位神经元放电,观察颈动脉注射内皮素对87个延髓腹外侧头端区(RVLM)自发放电神经元活动的影响.所得结果如下:(1)颈动脉注射ET-1 (0.3nmol/kg)时,36个单位放电中有30个放电频率由17.8±1.5升至20.9±1.4spikes/s(P<0.01),血压和心率则无明显变化(P>0.05); (2)在11个放电单位中应用ETA选择性受体阻断剂BQ-123 (0.67nmol/kg),可阻断ET-1的上述易化效应; (3)在10个放电单位中,应用ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲 (3.3 nmol/kg)对ET-1的易化效应无影响; (4)在热毁损后区(AP)的大鼠,19个RVLM放电单位对颈动脉内注射ET-1所致的易化效应不再出现; 而在假毁损AP的大鼠,ET-1对7个RVLM放电单位仍有易化效应.以上结果提示:循环中的ET-1可与AP神经元上的ETA受体相结合而引起兴奋,转而经AP 的传出投射再易化RVLM区神经元活动.
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后区微量注射辣椒素对大鼠血压、心率和肾交感神经放电的影响
在36只麻醉Sprague-Dawley大鼠, 观察了后区内微量注射辣椒素(10 μmol/L, 50 nl)对平均动脉压(MAP)、心率(HR)和肾交感神经放电(RSNA)的影响.实验结果如下:(1)后区内注射辣椒素可引起 MAP、HR 和RSNA明显增加, 分别由12.34±0.53 kPa、 328.52±7.54 bpm 和100±0% 增至15.17±0.25 kPa (P<0.001)、 354.81±8.54 bpm (P<0.001) 和156.95±7.57% (P<0.001);(2) 静脉注射辣椒素受体阻断剂钌红(100 mmol/L, 0.2 ml) 后, 辣椒素的上述效应可被明显抑制;(3) 预先应用NMDA 受体阻断剂MK-801 (500 μg/kg, 0.2 ml, iv)也明显抑制辣椒素的兴奋效应.以上结果提示, 后区微量注射辣椒素对血压、心率和肾交感神经放电有兴奋作用, 而此作用由辣椒素受体介导并有谷氨酸参与.
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大鼠孤束核和后区向中脑导水管周围灰质的直接投射
应用神经束路追踪技术对大鼠孤束核(NTS)和后区(AP)向中脑导水管周围灰质(PAG)的直接投射进行了观察.结果表明:(1)中、尾段NTS的内侧亚核和连合亚核向PAG的投射多,腹侧亚核与背侧亚核次之,中段多于尾段,内侧亚核多于连合亚核和腹侧亚核;(2)这些亚核向PAG的腹外侧区投射多,向外侧区投射较少,向背侧区投射少,向背外侧区无投射;(3)AP区的吻侧部向尾段PAG的腹外侧区投射多,向其他部位投射较少;(4)在PAG的吻尾方向上,这些投射从吻段到尾段逐渐增加;(5)NTS和AP向PAG的两侧均有投射,但以同侧投射占优势.上述结果为进一步揭示PAG与NTS和AP之间的功能关系奠定了形态学基础.
