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冷冻维持温度对大鼠血管组织超微结构的影响
目的:探讨不同维持温度冷冻对血管组织超微结构的影响.方法:以15%DMSO为低温保护剂,采用两步冷冻保存步骤,设计维持温度为-45℃、-50℃、-55℃、-60℃、-65℃和-70℃,对SD大鼠血管组织进行冷冻预处理后,-196℃液氮保存1周.复温后光镜和透射电镜观察.结果:用维持温度-55℃、-60℃冷冻预处理的血管,经液氮保存、复温,血管组织超微结构保持良好,优于其它温度值的实验组.结论:-55℃～-60℃是适宜血管组织冷冻的维持温度值.
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胎兔周围神经低温保存温度值的实验研究
目的:探讨胚胎兔周围神经低温冷藏后的改变.方法:以10%DMSO(二甲基亚砜)为低温保护剂,采用两步冷冻保存步骤,选择4种不同的冷冻维持温度(-20℃、-40℃、-60℃、-80℃),对孕龄26d～28d的胎兔坐骨神经进行冷冻,维持30min后,放入液氮中保存一周.复温后行四唑盐还原试验、组织学和超微结构观察,探讨冷冻维持温度对胎兔周围神经的影响.结果:-40℃维持温度冷冻后液氮保存的胎兔周围神经代谢活性和超微结构得到良好维持.结论:两步冷冻法可以较好地保存胎兔周围神经的生物活性,为胎周围神经的冷冻保存和移植奠定了基础.
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丁酸钠对结肠上皮细胞凋亡的影响
目的:探讨丁酸钠对正常及炎症结肠细胞凋亡的影响.方法:(1)杀死SD大鼠.分离其结肠黏膜,悬于Ussing槽中,维持温度为37.0±0.5℃,并通100%O2.黏膜面给予4%乙酸孵育,以Ringer液稀释,并给予大鼠自体血液,浆膜面用Ringer液孵育.(2)分离大鼠的正常及炎症结肠,给予或者不给予丁酸钠,使用TUNEL试剂盒来检测结肠表皮细胞的凋亡.结果:乙酸孵育无丁酸钠组,结肠上皮细胞的凋亡率为25.37±2.38;乙酸孵育给予丁酸钠组,结肠上皮细胞凋亡率为10.58±1.07,二者相比P＜0.05.正常结肠上皮细胞未给予丁酸钠组,凋亡率为10.35±1.07;乙酸孵育给予丁酸钠组,凋亡率为3.78±1.07,二者相比P＜0.05.结论:丁酸钠能抑制结肠上皮细胞的凋亡.
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大面积脑梗死血管内低温治疗患者护理安全的监测与干预
低温治疗可以防治或减轻重度脑缺血患者神经功能的永久性损伤，目前国际上公认的低温治疗目标值是32~35℃，即轻度低温，而中度低温和深度低温已被放弃，“亚低温”也不再被提及［1］。血管内热交换低温技术是目前较新进展的低温技术，它可通过具有降温冷却作用的体外机及能插入机体下腔静脉的热交换导管直接降低患者核心温度至32~35℃，该技术不仅能快速诱导达到目标温度，还能维持温度的恒定和减少温度的波动。但是低温治疗过程中患者的不良反应以及安全性是所有医护人员的担忧与困惑，尤其在诱导低温期、维持低温期以及复温期3个阶段，护理上应给予动态的监测与护理干预策略，才能达到救治患者的有效性。本文通过对22例大面积脑梗死患者的安全护理监测与干预后，取得了较好的效果，现报道如下。
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冷冻预处理温度对胎兔许旺细胞活性的影响
背景:许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料,其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响.目的:观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响.方法:设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30~-70 ℃,每间隔-5 ℃为一组,以10%二甲基亚砜为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行上述温度冷冻预处理,液氮中保存48 h,快速复温后继续培养48 h,透射电镜观察细胞超微结构改变,MTT法和3H-TdR掺入法检测细胞活性.结果与结论:透射电镜下见-45 ℃处理的细胞超微结构良好,其余各温度组细胞均出现细胞器肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现.MTT法和3H-TdR检测结果均显示-45 ℃冷冻预处理对许旺细胞的生长抑制率低,分别为(3.83±0.56)%、(4.41±0.71)%,和其余各温度组之间相比,差异有显著性意义(P < 0.05).提示-45 ℃是胎兔许旺细胞冷冻预处理的佳维持温度值,对细胞活性影响小,可较好保持其生物学活性.
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SD大鼠肌腱冷冻维持温度选择的实验研究
目的:探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对肌腱超微结构的影响,为同种异体肌腱保存移植提供依据.方法:实验组设计维持温度为-45℃、-50℃、-55℃、-60℃、-65℃、和-70℃组,以15%二甲基亚砜为低温保护剂,对SD大鼠肌腱进行上述温度冷冻预处理,液氮中保存1周,HE染色组织学观察和透射电镜肌腱超微结构观察.结果:电镜下-45℃组胶原纤维排列较稀疏;-60℃组多数腱细胞胞浆水肿,核膜不完整;-65℃组胞浆内细胞器破坏;-70℃组部分腱细胞坏死脱落.-50℃组和-55℃组与对照组之间差异不明显,肌腱组织超微结构得到良好保持.结论:肌腱组织冷冻预处理的维持温度在-50℃～-55℃之间,-50℃是肌腱组织冷冻预处理的佳维持温度值,可获得具有大部分生物活性的肌腱.
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不同冷冻温度对许旺细胞抗原性的影响及佳温度值的确定
目的 检测两步冷冻法不同冷冻温度对外周神经中许旺细胞(Schwann cell,SC)抗原性的影响及冷冻保存佳温度值的确定. 方法 取SD雌性大鼠80只,分为8组,每组10只,切取双侧坐骨神经2 cm,1组为新鲜对照组,另7组为实验组,采用两步冷冻法分别降温至-20℃、-30℃、-40℃、-50℃、-60℃、-70℃和-80℃,保存2 h后转液氮中保存48 h,取出后在37℃水浴箱中快速复温1 min.每组取3 mm长3段神经组织作电镜检测SC超微结构变化.将各组冷冻后的神经段制成石蜡切片,应用抗MHC Ⅱ抗体(OX6)作免疫组化染色,经计算机图像分析得出各组的抗原性变化. 结果 电镜检测结果表明-40℃组SC细胞膜及核膜完整,染色质分布均匀;-70℃组及-80℃组SC染色质碎裂、边聚;抗原性检测结果表明各冷冻组神经组织抗原性均较新鲜组为低(P<0.01),但-70℃组及-80℃组神经组织抗原性低. 结论 -40℃组SC细胞结构完整,组织抗原性低于新鲜组,且SC生物活性好,综合判断,-40℃是外周神经冷冻保存的佳温度值.
