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  • 补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢及p16蛋白表达的影响

    作者:陈靓;崔开宇;吴勇;杨伟峰

    目的:观察补肾活血方对老年大鼠心脏自由基代谢和p16蛋白表达的影响,探讨其对衰老大鼠心脏的保护作用机制。方法100只大鼠随机分为青年对照组、老年对照组和补肾活血方高、中、低剂量组,每组20只。各给药组给予相应药物灌胃,每日1次,连续16周。末次给药后1 h,将大鼠麻醉后取血清和心脏。测定血清和心肌组织一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组化检测心肌组织β-半乳糖苷酶和 p16蛋白表达。结果与老年对照组比较,补肾活血方高剂量组大鼠血清NO含量和CAT、SOD活性显著升高(P<0.05),补肾活血方各剂量组MDA含量显著降低(P<0.01);补肾活血方高剂量组大鼠心肌组织NO含量和SOD活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05),补肾活血方各剂量组CAT活性显著升高(P<0.05,P<0.01);补肾活血方各剂量组心肌组织β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达降低。结论补肾活血方通过抗氧化损伤和抑制抑癌基因p16表达,发挥抑制老年大鼠心肌老化的作用。

  • 宫颈上皮内瘤变组织中p16蛋白表达与高危型人乳头瘤病毒病毒载量的相关性研究

    作者:杜秀兰

    目的:比较不同宫颈组织p16蛋白表达与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)病毒载量,并探讨p16蛋白与HR-HPV的相关性。方法采用S-P三步法和第二代杂交捕获法(HC-2)测定宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级患者(30例)、CINⅡ级患者(47例)、CINⅢ级患者(79例)及宫颈正常者(50例)的p16蛋白表达和HR-HPV病毒载量情况,并使用Spearman等级相关分析探讨p16蛋白与HR-HPV病毒载量的相关性。结果正常者、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级p16阳性率分别为6.0%、43.3%、66.0%、87.3%,HR-HPV阳性率分别为12.0%、66.7%、76.6%、89.9%,各组p16蛋白和HR-HPV阳性率差异显著(χ2=31.475,42.625,P<0.05)。p16蛋白和HR-HPV阳性率与宫颈病变程度显著正相关(r分别为0.5563、0.6149,P<0.05)。相关性分析表明,p16蛋白表达与HR-HPV病毒载量存在显著正相关关系(r=0.6453,P<0.05),随HR-HPV病毒载量增加,p16蛋白表达增强。结论 p16蛋白表达和HR-HPV病毒载量可以在一定程度上作为反映CIN病情程度的指标。p16蛋白表达与HR-HPV病毒载量具有显著的正相关关系。通过测定p16可以为CIN以及宫颈癌的早期诊断提供一定的依据。

  • 电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响

    作者:鞠桂芝;王晓梅;付士波;刘树铮

    目的研究电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响.方法采用Northern blot检测p16 mRNA水平的变化;采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测p16蛋白表达的变化.结果研究证实,2.0 Gy照射后2~24h,胸腺细胞p16 mRNA水平明显增高,8~48 h p16蛋白表达显著增高(P<0.05~P<0.01);照射后2~8 h脾细胞p16 mRNA水平明显增高,24 h p16蛋白表达显著增高(P<0.05).研究还证实,0.5~6.0 Gy照射后,胸腺细胞p16mRNA水平呈剂量依赖性增高,p16蛋白表达在1.0~4.0 Gy组显著增高(P<0.05~P<0.01);脾细胞p16mRNA水平亦增高,但增幅远低于胸腺细胞,p16蛋白表达在1.0~4.0 Gy组显著增高(P<0.05~P<0.01).结论电离辐射可诱导p16基因转录及蛋白表达增高,其增高幅度表现出一定的细胞异质性.

  • P16蛋白表达与胃癌临床病理学特征的关系

    作者:白骏恒;郭亭艳;陈广斌;肖鹏

    目的:研究P16蛋白在胃癌中的表达,探讨P16基因在胃癌发展中的作用.方法:采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连接法(SP法),检测46例胃癌组织中P16蛋白的表达.结果:P16基因在胃癌中的阳性表达率为17.4%,且为胞浆表达.P16基因表达缺失多见于伴有淋巴结转移和恶性程度高的胃癌.结论:P16基因可能在胃癌发展中起一定作用,P16基因表达可作为胃癌预后判断指标.

  • 急性淋巴细胞白血病患儿p16蛋白及DNA水平的表达及意义

    作者:白峰岩

    目的 探究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿p16蛋白及DNA水平的表达及意义.方法 将64例小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)作为研究组,60例健康体检幼儿作为对照组,采用SP免疫组化法检测p16蛋白表达水平,流式细胞术检测机体内白血病细胞DNA含量,对比分析两组的差异.结果 对照组p16蛋白表达阳性率为100.00% (60/60),研究组p16蛋白表达阳性率为45.31% (29/64),组间对比,差异有统计学意义(P<0.05).研究组中标危ALL (SR-ALL) p16蛋白阳性率为53.57% (15/28),高危ALL (HR-ALL)阳性率为27.78% (10/36),组间比较,差异显著(P<0.05).研究组p16蛋白表达年龄、性别间比较,差异无统计学意义(P>0.05);而肝脾肿大、WBC及临床分型间差异有统计学意义(P<0.05).对照组无异倍体检出,研究组异倍体检出率为51.56% (33/64),两者比较,差异有统计学差异(P<0.05).p16蛋白表达阴性患儿DNA异倍体发生率为65.71% (23/35),p16阳性表达患儿异倍体发生率为34.48% (10/29),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 p16蛋白在急性淋巴细胞白血病患儿发病过程中起着重要作用,p16蛋白表达阴性者DNA异倍体的发生率高,与临床高危因素有关,p16蛋白缺失者可能与ALL发病、复发以及死亡有关.

  • 子宫内膜癌组织P16基因突变及其蛋白表达的研究

    作者:徐影;王殊;李威;盖晓东

    目的:研究P16蛋白表达与原发性子宫内膜癌发生、发展的关系和P16基因缺失突变和点突变在原发性子宫内膜癌发生、发展中作用.方法:利用免疫组织化学方法(免疫组化法)、聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术分别检测正常子宫内膜组织、子宫内膜癌前病变组织及原发性子宫内膜癌组织.检测P16蛋白和P16基因缺失突变和点突变.结果:①p16蛋白阳性表达率在原发性子宫内膜癌组织中明显低于正常子宫内膜组织及子宫内膜癌前病变组织;②在原发性子宫内膜癌组织中P16基因缺失突变率高于点突变率.结论:①在原发性子宫内膜癌发生、发展过程中,P16蛋白缺乏与子宫内膜细胞增殖失控及分化不良紧密相关;②原发性子宫内膜癌与P16基因缺失突变密切相关.

  • CIK细胞对MGC-803胃癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究

    作者:孙抒;李雪梅;王建光;杨万山;李香丹

    目的:研究多种细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-induced kill cells,CIK)对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制.方法:应用MTT法检测CIK细胞对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖作用的影响及细胞毒活性;通过HE染色、扫描电镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变;通过免疫细胞化学法测定p53、p16、C-myc的阳性表达率.结果:MTT比色法表明随着CIK细胞与胃癌细胞效靶比增加及作用时间延长,抑制率明显增强(P<0.01).CIK细胞作用于胃癌细胞24小时后,形态学观察胃癌细胞发生凋亡或坏死.CIK实验组p53、p16、C-myc蛋白随作用时间延长表达均下降,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).结论:CIK细胞是一种新型高效具有较强杀伤体外胃癌细胞的免疫活性细胞.其杀伤MGC-803胃癌细胞的作用机制之一可能是通过下调p53、C-myc的蛋白表达.

  • P16蛋白在胃癌前病变及胃癌中的表达

    作者:缪林;赵志泉;金宁;刘政;潘文林;程铁华

    目的:研究P16蛋白在胃癌前病变(不典型增生及肠化)及胃癌中的表达.方法:采用免疫组织化学方法检测,10例正常胃黏膜,15例胃不典型增生,15例胃黏膜肠化生,30例胃癌组织中P16蛋白的表达.结果:P16蛋白阳性表达正常胃黏膜90%,不典型增生86.67%,肠化86.67%,胃癌36.67%,胃癌组与正常对照组及胃癌前病变组间差异均有极显著意义(P<0.01).结论:P16蛋白与胃癌发生有关.

  • 儿童急性淋巴细胞白血病p16蛋白表达及DNA含量的临床研究

    作者:周文娣;祁海啸;胡剑;朱从龙;高健;蒯文霞

    目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病p16蛋白表达及DNA含量的临床意义.方法:急性淋巴细胞白血病患儿58例作为观察组,健康儿童58例作为对照组,采用SP免疫组化法检测骨髓液中p16蛋白的表达水平;流式细胞术检测骨髓中白血病细胞DNA的含量,比较两组研究对象的差异.结果:观察组患儿p16阳性表达率为37.93%,明显低于对照组的100.00%(P<0.05);观察组患儿p16阳性表达率与年龄、性别无明显关系(P>0.05),但肝肿大<4 cm患儿的p16阳性表达率明显高于≥4 cm的患儿(P<0.05),高白细胞计数与高危急性淋巴细胞白血病(HR-ALL)患儿的p16阳性表达率明显高于低白细胞计数与标危急性淋巴细胞白血病(SR-ALL)患儿(P<0.05).在观察组p16蛋白阴性表达患儿中DNA异倍体发生率(66.67%)明显高于阳性表达患儿中DNA异倍体发生率(40.90%,P<0.05).结论:p16蛋白在急性淋巴细胞白血病患儿的发病过程中起到重要作用,p16蛋白缺失可能与急性淋巴细胞白血病复发相关,临床高危因素与p16阴性表达者DNA异倍体发生率升高具有相关性.

  • 当归多糖对衰老模型小鼠抗氧化作用及p16蛋白表达水平的影响

    作者:安方玉;刘雪松;李雪燕;关德凤;梁健庆;张艳霞

    目的:观察当归多糖对衰老模型小鼠脑组织p16蛋白表达及不同组织中单胺氧化酶(MAO)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,探讨当归多糖治疗衰老的作用机制.方法:将昆明种小鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、脑复康组和当归多糖高、中、低剂量组,每组10只;腹腔联合注射D-半乳糖和亚硝酸钠(NaNO2)建立衰老小鼠模型;脑复康组灌胃脑复康(200 μg/g),当归多耱低、中、高剂量组灌胃当归多糖(依次为100,200,400 μg/g),空白对照组和模型对照组灌胃等体积的生理盐水,连续8周;眼球采血处死小鼠,采用ELISA法检测脑组织p16蛋白的含量,比色分析法测定脑、肝、肾组织MAO活性及肝、肾组织CAT活性.结果:与空白对照组对比,模型对照组小鼠p16蛋白的表达升高,MAO活性升高,CAT活性降低,差别有统计学意义(P<0.01);当归多糖各剂量组小鼠脑组织p16蛋白表达减少、MAO活性降低,肝组织CAT活性升高,肾组织MAO活性降低、CAT活性升高,与模型对照组对比,差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05);而与脑复康组对比,当归多糖各剂量组的上述指标均无统计学意义(P>0.05).结论:当归多糖可以降低衰老小鼠脑组织p16蛋白的表达,降低脑及肾组织MAO的活性,增强肝组织和肾组织CAT的活性,其机制可能是通过抑制衰老细胞的增殖而起到延缓衰老的作用.

  • 胰腺癌中p16基因甲基化改变及其蛋白表达分析

    作者:杨卫华;王春友;朱求实;阎雷;许州

    目的 探讨胰腺癌与癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的改变及其蛋白表达的特点,以及其与胰腺癌发生发展的关系.方法 分别采用免疫组化SP法及甲基化特异PCR(MSP)检测46例人胰腺癌和癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平,并结合临床资料进行分析.结果 胰腺癌中p16蛋白表达率为41.3%(19/46),而癌旁组织表达率为95.7%(44/46),两者有差异显著性(P<0.01).p16蛋白阳性的19例胰腺癌标本中均未检出基因甲基化;p16蛋白缺失的27例标本中有18例检出基因甲基化,甲基化率为39.1%.p16基因甲基化与蛋白缺失有明显关系(P<0.05).p16基因表达及其启动子区甲基化的发生率与胰腺癌的大小,患者性别﹑年龄的差异无显著意义(P>0.05),但与组织分化程度﹑淋巴结转移﹑PTNM分期有显著意义(P<0.05).结论 p16基因启动子的异常甲基化可影响p16蛋白的表达,它们与胰腺癌的发生发展有关;p16甲基化和蛋白表达可能成为胰腺癌诊断及预后的候选标志物之一.

  • p16蛋白表达与胃癌浸润转移的关系

    作者:贺修胜;苏琦;钱仲斐;罗招阳

    p16基因是近年来克隆出来的一个新的抑癌基因,定位于9p21,由2个内含子和3个外显子组成,全长8.5kb.3个外显子共同编码分子量为15.84kd、148个氨基酸组成的单链多肽-P16蛋白,参与正常细胞生长调控[1].研究资料表明在人类多种肿瘤细胞系及原发肿瘤中存在p16基因的异常及p16蛋白表达的缺失.本文就p16蛋白表达与胃癌浸润、转移等生物学行为的关系进行了分析,报告如下.

  • 非小细胞肺癌组织中p16基因表达的意义

    作者:周华富;张兴华;薛邦德;冼磊;何巍

    目的 探讨p16基因蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达情况.方法 应用免疫组化SP法检测45例非小细胞肺癌组织、21例肺良性疾病组织中p16基因蛋白的表达情况.结果 肺良性疾病中p16蛋白阳性率85.7%,高于肺癌组织的51.1%,差异有统计学意义(P=0.004); p16蛋白表达阳性率肺癌Ⅰ、Ⅱ期高于Ⅲ、Ⅳ期,无淋巴结转移者高于有淋巴结转移者(P<0. 05).结论 p16基因蛋白的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关.

  • p16蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中的诊断意义

    作者:缪卫娟;万美珍

    目的 探讨p16和HPV检测在评估宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变分型中的价值.方法 对宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变患者同时采用第2代杂交捕获(HC2)试验系统检测高危型HPV感染及检测p16蛋白的表达,比较宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变HPV-DNA负荷量和p16蛋白表达的差异.结果 宫颈低度鳞状上皮内瘤变中p16表达率为36.67%(11/30),高度鳞状上皮内瘤变中表达率为100%(40/40),二者比较差异有显著性 (P<0.01).30例低度鳞状上皮内瘤变中HC2检测阳性率为63.33%(19/30),高度鳞状上皮内瘤变中为97.5%(39/40),二者比较差异有显著性(P<0.01).HPV感染与p16表达呈正相关.结论 宫颈上皮内瘤变中p16的强阳性染色和全层染色支持高度鳞状上皮内瘤变的诊断,高度鳞状上皮内瘤变与高危型HPV感染有关,对于宫颈高度上皮内瘤变的诊断,好HPV与p16联合应用,以提高其病理诊断准确性.

  • 喉癌PCNA、p16表达临床病理学观察

    作者:朱小龙

    目的探讨喉鳞型细胞癌中PCNA、p16与喉癌生物学行为的关系.方法用免疫组化的方法检测50例喉鳞型细胞癌中PCNA、p16蛋白的表达,分析其与喉癌病理分化程度、临床分期与转移情况的关系.结果p16蛋白表达阳性率46%,与喉癌分化程度及转移有关,但与临床分期无关;PCNA表达与喉癌分化程度、临床分期及转移均有关.结论PCNA、p16蛋白表达可作为临床判断喉癌的恶性程度及预测预后的指标.

  • 柴达木枸杞多糖对UVB诱导HaCaT细胞增殖活性及p16蛋白表达的影响

    作者:任立汆;加杨娥;燕华玲;王永;郭砚;王刚

    目的 观察柴达木枸杞多糖对中波紫外线(UVB)辐射引起的HaCaT细胞活性及对p16蛋白表达水平的影响,以探讨其抗光老化作用与机制.方法 将HaCaT细胞随机分为三组,对照组、UVB组、UVB+枸杞多糖组,以MTS法检测各组细胞增殖活性,以Western blot法检测细胞p16蛋白的表达水平.结果 UVB照射HaCaT细胞后细胞增殖活性下降,p16蛋白表达水平增高(P<0.05).与UVB照射组相比,枸杞多糖干预后照射组细胞活性上升,p16蛋白表达水平下降(P<0.05).结论 柴达木枸杞多糖有抗光老化作用,其机制可能是通过抑制UVB引起的HaCaT细胞增殖活性下降以及p16蛋白表达增加实现.

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