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TOFA协同柔红霉素诱导肠癌细胞株HCT-8细胞凋亡
目的 研究TOFA及柔红霉素(DNR)联合应用对肠癌细胞株HCT-8的作用,探讨其联合应用于临床的可能性.方法 将1×104个HCT-8细胞种植于96孔板,采用MTT比色法测定不同浓度TOFA或/和DNR对同步化处理后的HCT-8细胞的生长抑制效果；DNA降解分析法(DNA Fragmentation)检测TOFA与DNR联合使用对HCT-8细胞DNA的损伤.Western blot检测TOFA与DNR联合使用对凋亡蛋白p53以及PARP的水解作用.结果 单用TOFA或DNR均可呈浓度依赖性抑制肠癌细胞HCT-8的生长,其IC50值分别为7.5 μg/mL和0.18 μmol/L;当用20 μg/mL TOFA或0.6μmol/L DNR处理时,活性细胞只有正常对照组(无药物处理组)的26.2％±5.1％或22.3％±4.5％.当用20 μg/mL TOFA和0.6μmol/L DNR两药联合应用时,活性细胞只有正常值的10.4％±3.0％.同时联合应用可显著增加肿瘤细胞DNA的降解；并显著诱导凋亡蛋白p53表达,促进PARP的水解.结论 TOFA与DNR联合应用可协同抑制肠癌细胞株HCT-8细胞的生长,其效应与药物诱导细胞凋亡有关.
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脂肪酸代谢酶系在孤独症前额叶 大脑皮质的表达
目的 探讨脂肪酸代谢酶系--脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)、乙酰辅酶A合成酶1(acetyl coenzyme A synthetase 1,AceCS1)和长链脂酰辅酶A合成酶1(long-chain acyl-coenzyme A synthetase 1,ACSL1)在孤独症患儿前额叶大脑皮质中的表达变化和意义.方法纳入孤独症儿童和对照儿童的新鲜冰冻脑组织各8例,分别取前额叶大脑皮质,采用蛋白质印迹(western blotting)法测定其中FAS、ACC、AceCS1和ACSL1的蛋白表达水平.结果孤独症组FAS(0.61±0.70 vs.0.49±0.10)和ACSL1(0.85±0.13 vs.0.69±0.11)的蛋白表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),ACC和AceCS1的表达两组相比差异无统计学意义(均P>0.05).结论孤独症前额叶大脑皮质中可能存在脂肪酸合成增加,脂肪酸代谢异常可能参与孤独症的发病.
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六味地黄丸影响2型糖尿病大鼠肝脏SREBP-1和ACC 表达的实验研究
目的:观察六味地黄丸对2 型糖尿病大鼠肝脏脂代谢调控相关基因固醇调节元件结合蛋白(SREBP)和乙酰辅酶A 羧化酶(ACC)表达的影响.方法:以LETO 鼠为正常组,糖尿病大鼠模型OLETF 鼠分为不加药的对照组以及加药的干预组,制作病理切片观察各组肝脏组织形态学改变,RT-PCR 检测SREBP-1、ACC 在各组大鼠肝脏组织中的表达情况.结果:与对照组相比,干预组大鼠肝脏细胞索结构完整,仅见轻度肝细胞脂肪变性.RT-PCR 检测显示SREBP-1 在正常组表达稳定,而在对照组和干预组的表达均随周龄增加而增加(P ＜ 0.01),但干预组SREBP-1 的表达显著低于对照组(P ＜ 0.01).ACC 在对照组中的表达亦随周龄增加而明显增加,但其在正常组及干预组中的表达要显著低于对照组(P ＜ 0.01).结论:六味地黄丸能降低糖尿病大鼠模型肝脏中SREBP mRNA 和ACC mRNA 的表达,可能通过减轻脂肪变性,改善糖尿病肝脏的脂代谢紊乱.
关键词： 糖尿病 2型 六味地黄丸 固醇调节元件结合蛋白 乙酰辅酶A羧化酶 -
姜黄素对脂肪变性HL-7702细胞乙酰辅酶A羧化酶表达的影响
姜黄素为姜科植物姜黄的提取物,是一种多酚类物质.近年来,国内外对姜黄素进行了大量的研究,其在保护肝脏方面的作用备受关注.多种研究提示姜黄素具有防止实验性脂肪肝的作用[1],但其作用机制尚待进一步研究.本实验旨在初步探讨姜黄素对肝细胞脂质变性的影响及其可能机制,为非酒精性脂肪性肝病的防治提供理论依据.
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腺苷酸激活蛋白激酶磷酸化障碍导致烧伤后骨骼肌脂质沉积的实验研究
目的 探讨影响腺苷酸激活蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)/乙酰辅酶a羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)信号通路导致烧伤后骨骼肌脂质沉积(intramyocellular lipids,IMCLs)的分子机制.方法 采用30％体表面积Ⅲ度烧伤小鼠模型,将54只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、AMPK激活剂(acadesine,AICAR)组、烧伤组、烧伤+AICAR组,同位素标记法检测各组小鼠腓肠肌中肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT1)活性变化,Western blot检测各组小鼠腓肠肌中AMPK-α、p-AMPK-α、ACC及p-ACC表达水平,通过油红O染色和甘油三酯(triglyceride,TG)测定法评估各组小鼠腓肠肌IMCLs情况.结果 烧伤后小鼠腓肠肌中ACC表达量较伤前显著升高(P＜0.05),而AMPK-α、p-AMPK-α、p-ACC以及CPT1活性均显著降低(P＜0.05).在AICAR作用下,正常小鼠腓肠肌中p-AMPK-α表达显著升高[(1.16±0.08)vs(2.38±0.22),P＜0.05],p-ACC表达显著升高[(1.74±0.10) vs (3.72 ±0.18),P＜0.05],CPT1活性显著升高[(2.95±0.39) nmol/(min·mg) vs (6.35 ±0.68)nmol/(min·mg),P＜0.05],TG含量显著降低[(3.88±0.40) mmol/gvs (2.89 ±0.54) mmol/g,P＜0.05].烧伤+AICAR组小鼠腓肠肌中p-AMPK-α、p-ACC、CPT1活性及甘油三酯含量较烧伤组无显著差异(P＞0.05).正常对照组和AICAR组正常小鼠腓肠肌组织切片油红O染色未见明显脂质沉积,而烧伤组和烧伤+ AICAR组烧伤小鼠腓肠肌组织切片油红O染色均显示有大量脂质沉积,两组间并无显著差异(P＞0.05).结论 骨骼肌中AMPK磷酸化障碍是烧伤后IMCLs的重要分子机制之一.
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乙酰辅酶A羧化酶调控Th17细胞分化参与哮喘气道炎症
目的 观察乙酰辅酶A羧化酶(ACC)对Th17细胞分化的调控在急性哮喘小鼠模型发病机制中的作用.方法 将24只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、DMSO对照组和ACC抑制剂组,每组6只.哮喘组、DMSO对照组和ACC抑制剂组予以卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立急性哮喘模型,正常对照组对应给予等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)处理.其中ACC抑制剂组每周2次给予腹腔注射ACC特异性抑制剂TOFA溶液(先溶于DMSO,后以PBS稀释)处理,DMSO对照组对应给予等浓度DMSO溶液处理.24 d后处死小鼠,收集肺组织和血清样本.肺组织HE染色观察小鼠肺组织炎性细胞浸润情况,ELISA法检测血清总IgE浓度,流式细胞术检测肺组织Thl7细胞在CD4+T细胞中所占的百分率.结果 哮喘组、DMSO对照组、ACC抑制剂组小鼠肺组织炎性细胞浸润均较正常对照组显著增加(3.50±0.14、3.47±0.08、2.07±0.20比0.50±0.17,均P＜0.001),DMSO对照组与哮喘组差异无统计学意义(P＞0.05),ACC抑制剂组较哮喘组显著下降(P＜0.001).哮喘组、DMSO对照组、ACC抑制剂组小鼠血清总IgE浓度均较正常对照组显著升高[(5 680.40±831.40) ng/ml、(5 624.79±365.50) ng/ml、(2 028.95±134.60) ng/ml比(400.52±57.13) ng/ml,均P＜0.008],且DMSO对照组与哮喘组差异无统计学意义(P＞0.05),ACC抑制剂组显著低于哮喘组(P＜0.008).哮喘组、DMSO对照组、ACC抑制剂组小鼠肺组织Th17细胞在CD4+T细胞中所占百分率均较正常对照组明显增高[(2.01±0.12)％、(1.95±0.16)％、(0.82±0.04)％比(0.59±0.03)％均P＜0.008],DMSO对照组与哮喘组差异无统计学意义(P＞0.05),ACC抑制剂组较哮喘组显著降低(P＜0.008).结论 抑制ACC后,OVA诱导的哮喘小鼠气道炎症显著减轻,同时肺组织中Th17细胞减少,血清总IgE浓度下降,提示ACC可通过促进Th17细胞分化参与哮喘的发病.
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微生物乙酰辅酶A羧化酶及其抑制剂的研究进展
乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)在微生物生长和脂肪酸合成代谢中发挥着重要作用.本文系统介绍了微生物ACCase的分类、结构与功能、代谢作用和抑制剂研究等方面的进展.微生物ACCase类型主要分为真核型(同质型)和原核型(异质型)两大类,分别以酿酒酵母ACCase和大肠埃希菌ACCase为代表.结构与功能研究主要集中在对异质型ACCase的BC和CT亚基的晶体学、作用位点等方面.许多研究表明ACCase在微生物的生长和脂肪酸合成中发挥着关键作用,ACCase活性减弱和丧失会导致菌体生长减缓或无法存活,脂肪酸的合成也明显减弱.面对临床上越来越多的抗药菌,以微生物ACCase及其亚基作为抗生素筛选靶标,成为筛选和合成新抗生素的重要方向,目前己取得一定进展.
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荷泽口服液对生长期高脂诱导过重大鼠脂质代谢的影响
[目的]研究荷泽口服液对生长期高脂诱导肥胖大鼠血甘油三脂、体脂及脂肪细胞大小的影响,并对其影响机制进行初步探讨.[方法]将实验大鼠随机分为正常组、过重组和中药组,分别饲以基础饲料、高脂饲料并灌胃生理盐水、和高脂饲料并灌胃中药,至第6周末测三组大鼠血清甘油三酯水平、腹膜后、附睾脂肪组织含量,腹膜后脂肪组织脂肪细胞直径;RT-PCR测肝组织乙酰辅酶A羧化酶表达水平.[结果]过重组大鼠体重、甘油三酯水平、脂肪组织含量、脂肪细胞直径、乙酰辅酶A羧化酶基因表达显著高于正常组(P均<0.05);中药组大鼠体重与过重组比较差异无统计学意义(P>0.05),但是其甘油三酯水平、脂肪组织含量、脂肪细胞直径、乙酰辅酶A羧化酶基因表达显著低于过重组(P均<0.05).[结论]荷泽服口液具有减肥降脂作用,肝脏脂肪酸合成减少可能是其减肥降脂作用的途径之一.
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高糖诱导肝细胞脂肪变性的机制探讨
目的：探讨高糖诱导肝细胞脂变中的可能机制。方法：分别以18、25mmol/l的葡萄糖浓度培养L02细胞，以11mmol/l葡萄糖浓度培养L02细胞作为对照，测定细胞内甘油三酯（TG）含量反应肝细胞脂变程度；RT-PCR 检测乙酰辅酶 A 羧化酶（acetyl-CoA carboxylase，ACC）、固醇调节元件结合蛋白1c（Sterol regulatory element binding protein 1c ，SREBP-1c）的mRNA表达水平，Western blot分析乙酰辅酶A羧化酶、肝X受体α（liver X receptor alpha ，LXRα）的蛋白表达水平。结果：与对照组比较，高糖可促进L02细胞内甘油三酯含量增加，上调ACC mRNA和ACC蛋白的表达量，而高糖组各时间点SREBP-1c mRNA 和LXRα蛋白表达与对照组比较无明显变化。结论：1、高糖可通过上调ACC的表达，参与肝细胞脂肪沉积的形成过程。2、LXRα- SREBP-1c -ACC途径可能没有参与葡萄糖及其代谢产物诱导的肝细胞脂肪沉积。
关键词： 高糖 肝细胞脂肪变性 乙酰辅酶A羧化酶 肝X受体α 固醇调节元件结合蛋白1C
