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HPLC同时测定维吾尔族药复方小艾飞中5种有效成分的含量
目的:建立HPLC同时测定复方小艾飞中槲皮素、山柰素、乔松素、高良姜素4种黄酮类成分及胡椒碱含量的方法.方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙睛(A)-1％磷酸溶液(B)-甲醇(C)为流动相,梯度洗脱(0～12 min,28％A∶52％B∶20％C;12～13 min,28％ ～30％A,52％ ～50％B,20％C;13～45 min,30％A∶50％B∶20％C),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,进样量20 μL,检测波长280 nm.结果:槲皮素、山柰素、乔松素、高良姜素、胡椒碱的标准曲线分别为Y=357314X-88 066(r =0.999 9),Y=442 853X-74 204(r =0.999 9),Y=647 926X-327 436(r =0.999 9),y=471 672 X-256 408(r=0.999 9),Y=290 000X-391 906(r=0.999 9),线性关系良好.平均加样回收率(n=9)分别为98.4％(RSD 1.6％),98.9％ (RSD 1.7％),101.3％ (RSD 2.2％),98.6％ (RSD 2.1％),98.6％ (RSD 1.8％).结论:该方法准确、简便,具有良好的重复性,可用于维吾尔族药复方小艾飞的质量控制.
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RP-HPLC测定蜂胶中乔松素、白杨素和高良姜素的含量
目的:采用反相高效液相色谱法测定蜂胶中乔松素、白杨素和高良姜素的含量.方法:使用YMC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸(40∶ 60),流速1.0mL·min-1,检测波长,乔松素290 nm,白杨素和高良姜素268 nm,柱温30℃.结果:乔松素、白杨素和高良姜素分别在4.266 ～ 426.6,4.59 ～459,4.322～ 432.62 mg·L-线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为98.28％,98.82％,100.77％,RSD分别为0.89％,0.90％,1.32％.结论:方法简便、准确、重复性好,可为蜂胶的质量控制提供实验依据.
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HPLC-ELSD测定猴枣牛黄散中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷
目的:采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定猴枣牛黄散(HZNHS)中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷的含量.方法:Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流速0.9 mL· min-,流动相(乔松素和小豆寇明)A为甲醇,B为0.5％磷酸溶液,检测波长300 nm;流动相(西贝母碱和西贝母碱苷)乙腈-水-二乙胺(65∶35∶0.5),ELSD漂移管温度80℃,载气(N2)流速2.3 SLPM· min-.结果:乔松素和小豆寇明分别在0.052 7 ～1.054 μg(r=0.999 4),0.036 2～ 0.724 0μg(r=0.999 8)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.14％,97.64％,RSD分别为1.10％,1.39％;西贝母碱和西贝母碱苷分别在0.057 1 ～1.142 μg(r =0.999 1),0.081 3 ～1.626 μg(r =0.999 5)进样量的自然对数值与峰面积的自然对数值呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55％,98.09％,RSD分别为1.75％,1.80％.结论:方法测定结果准确、灵敏、重复性好,可用于猴枣牛黄散中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷的测定.
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蜂胶提取物制备工艺研究
目的 优化蜂胶提取物制备工艺.方法 以浸膏得率,总黄酮、白杨素、乔松素和高良姜素质量分数为指标,采用单因素和正交试验,比较不同提取方法、提取溶剂、提取次数、提取时间、溶剂用量对蜂胶提取物制备工艺的影响.结果 蜂胶提取物佳工艺:蜂胶冷藏后粉碎,加5倍量95％乙醇浸渍(加搅拌)提取4h,滤过,回收乙醇,浓缩、干燥.结论 优化后的蜂胶提取物制备工艺简单、合理,适于进一步推广应用.
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乔松素临床应用和作用机制的研究进展
乔松素是一种天然的黄酮类化合物,在蜂胶、姜科植物、牛至属植物等植物中有较高的含量.在临床前期研究中,乔松素表现出良好的抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降低血脂和神经保护作用等.近年来国内外对乔松素神经保护方面的研究发现,其可以通过减少活性氧产生、保护血脑屏障完整性、调节线粒体功能和调控细胞凋亡等发挥作用.该文对乔松素的药物代谢动力学和潜在的治疗应用及其作用机制等方面进行综述,为乔松素的后续研究提供参考.
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乔松素在大鼠体内外代谢产物的UPLC-MS/MS鉴定
目的:以超高效液相质谱联用法鉴定了乔松素在大鼠体内外的代谢产物.方法:分析乔松素经大鼠肝微粒体体外代谢和大鼠口服给药后的胆汁、尿液、粪便中的代谢产物,以超高效液相质谱联用法分离鉴定代谢产物.结果:在大鼠肝微粒体和胆汁、尿液、粪便中共检测到5个代谢产物,根据裂解规律及与标准品对照,鉴定了其中3个代谢产物的结构,推测了另外2个代谢产物的结构.结论:通过大鼠体内外代谢产物的比较,发现乔松素的代谢途径主要是羟基化和葡萄糖醛酸化.其原型和柚皮素是在体内的主要作用形式,在胃肠道及肝脏中的葡萄糖醛酸化是其代谢失活的主要途径.
关键词： 乔松素 代谢产物 UPLC-MS/MS -
蜂胶提取物总黄酮含量测定方法研究
目的:对国标GBT 24283-2009蜂胶中总黄酮测定方法进行探讨,建立了新的蜂胶总黄酮含量方法.方法:采用紫外分光光度法测定,以乔松素为对照在290 mn波长处测定总黄酮含量,并进行了方法学研究.结果:蜂胶总黄酮含量在43.11％ ～63.16％之间.结论:总黄酮含量测定新方法简便,重现性好,准确度高.
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蜂胶乔松素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的保护作用
目的:观察蜂胶乔松素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的影响,探讨其对人脐静脉内皮细胞可能的保护作用.方法:实验于2006-03/10在泰山医学院生命科学研究所(省重点实验室)完成.①实验材料:取出生1 h内新生儿脐带,患者知情同意.②实验分组及方法:培养人脐静脉内皮细胞,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的脂多糖培养液培养细胞12 h),实验分为空白对照组(加等量D-Hank's液)、脂多糖组(10 mg/L)、乔松素组(加10 mg/L脂多糖预孵育12 h后,按50,100,200 mg/L分别加入乔松素),各组设8个复孔,共同孵育24h.③实验评估:光镜下观察细胞形态,MTT法观察乔松素对人脐静脉内皮细胞活性的影响,ELISA方法检测培养上清中血管假血友病因子的含量,TUNEL检测细胞凋亡率.结果:①细胞形态:空白对照组细胞紧密贴壁,呈铺路石状生长.脂多糖组可见多数细胞呈圆形;乔松素组见上述细胞较脂多糖组明显减少.②乔松素对人脐静脉内皮细胞活性、凋亡及血管假血友病因子含量的影响:与对照组比较,脂多糖组能明显诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡(P＜0.01),不同浓度乔松素组可改善内皮细胞形态,组织活性明显升高(P＜0.05),同时抑制内皮细胞血管假血友病因子的释放(P＜0.05),使脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡细胞数明显减少(P＜0.05).结论:乔松素能增强人脐静脉内皮细胞活性,抑制脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡,从而发挥可能的内皮细胞保护功能.
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UPLC-MS/MS快速鉴定乔松素在人肝微粒体中的代谢产物
目的 以超高效液相色谱质谱联用法(UPLC-MS/MS)快速鉴定乔松素在人肝微粒体中的代谢产物.方法 以人肝微粒体体外孵育体系对乔松素进行代谢研究,发UPLC-MS/MS鉴定乔松素的体外代谢产物.结果 建立了乔松素的体外代谢孵育体系,UPLC-MS/MS在6 min内检测到乔松素的4个代谢产物,分别鉴定为柚皮素、5,6,7-三羟基二氢黄酮、5,7,8-三羟基二氢黄酮和乔松素-7-葡萄糖醛酸苷,这4个代谢产物均为首次发现的乔松素人肝微粒体体外代谢产物.结论 乔松素在人肝微粒体中的主要代谢途径为羟基化和葡萄糖醛酸化,5,7,8-三羟基二氢黄酮是其主要羟基化产物,乔松素-7-葡萄糖醛酸苷可能为乔松素的主要代谢失活形式.
关键词： 乔松素 人肝微粒体 代谢产物 超高效液相色谱质谱联用法 -
乔松素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究
目的 探讨不同浓度的乔松素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤( IRI)的保护作用及其相关机制. 方法 成年SD大鼠125只,45只用于前期筛选乔松素适宜用药浓度,另80只随机均分为假手术组,模型组,乔松素低、中、高剂量(3、10、30 mg/kg)组. 通过结扎大鼠心左冠状动脉前降支30 min并解开结扎线释放血流2 h建立大鼠在体IRI模型,乔松素组于缺血前1 h尾静脉给药,模型建立后HE染色观察心肌组织形态学改变;免疫荧光染色法检测自噬标志物LC3的表达及定位;TUNEL原位标记凋亡心肌细胞;Western blot法检测凋亡蛋白Bax、Caspase-3及自噬蛋白LC3、p62的表达. 结果 HE染色结果显示,合适浓度的乔松素能有效改善心肌组织病理学改变,且呈剂量依赖性,但剂量较高时可能具有毒性作用;免疫荧光染色显示乔松素组LC3 表达明显较模型组增多,在胞质中广泛表达,且呈剂量依赖性;TUNEL染色结果显示,乔松素组与模型组比较,凋亡细胞均明显减少,且高剂量组优于中、低剂量组;Western blot结果显示,乔松素组Bax、Caspase-3、p62蛋白表达水平较模型组明显降低(P<0. 05),且高剂量组效果更佳(P<0. 01); 乔松素组LC3表达水平高于模型组( P<0. 05 ) ,且高剂量组增高优于中、低剂量组( P<0. 01 ). 结论 乔松素预处理对大鼠心肌IRI有保护作用,其主要作用机制可能与减少细胞凋亡和激活自噬有关.
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基于HPLC波长切换法对养胃宁胶囊中6种成分的质量控制研究
目的 建立同时测定养胃宁胶囊中花旗松素、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮和 α-香附酮含量的方法.方法 采用Agilent Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;流速:0.9 mL/min;柱温25℃.结果 花旗松素、山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮和 α-香附酮分别在2.18～54.50μg/mL(r=0.9999)、7.89～197.25μg/mL(r=0.9996)、6.57～164.25μg/mL(r=0.9998)、4.89～122.25μg/mL(r=0.9997)、5.76～144.00μg/mL(r=0.9999)、1.79～44.75μg/mL(r=0.9991)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.33％、100.18％、98.47％、97.42％、99.04％和96.99％,RSD分别为1.13％、0.59％、1.49％、1.36％、0.80％和0.95％.结论 该方法简便、准确、重复性好,可为养胃宁胶囊多指标质量评价提供依据.
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肝苏颗粒
[主要成分]肝苏颗粒为道地中药扯根菜提取而成的单味成方制剂,目前已从该中药提取物中分离出8个化合物(鉴定了6个结构:没食子酸、槲皮素、槲皮素-3-O-a-L-吡喃鼠李糖苷、乔松素-7-β-0-D-吡喃葡萄糖苷、2,6-二羟基苯乙酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、β-谷甾醇),此项工作仍在进行中.
