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蒲黄总黄酮对犬急性心肌缺血的保护作用
目的:观察蒲黄总黄酮对犬急性心肌缺血的保护作用.方法:采用麻醉开胸犬结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备急性心肌缺血模型,观察蒲黄总黄酮对心外膜电图(EECG)、心肌梗死面积(MIS)和血清酶的影响.结果:蒲黄总黄酮可减少缺血程度(Σ-ST),降低缺血范围(N-ST),缩小缺血心肌的MIS,降低血清中磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,降低血清中游离脂肪酸(FFA)、过氧化脂质(LPO)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结论:蒲黄总黄酮对实验性心肌缺血犬的心肌具有保护作用.
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蒲黄总黄酮对C2C12骨骼肌细胞β-arrestin-2基因及蛋白表达的影响
目的:观察蒲黄总黄酮( PTF)对C2C12骨骼肌细胞β-arrestin-2基因及蛋白表达的影响.方法:根据不同处理方法,将分化成熟的细胞分为对照组和PTF组.干预处理16h后,予或不予胰岛素(INS)刺激30min,实时定量PCR检测β-arrestin-2 mRNA表达,免疫印迹法检测β-arrestin-2蛋白表达,免疫共沉淀法检测β-arrestin-2信号复合物.结果:PTF组β -arrestin-2 mRNA表达水平是对照组的0.96倍,差异无统计学意义；但PTF组β-arrestin-2蛋白表达水平比对照组升高0.65倍,而PTF+INS组也比INS组升高0.66倍,有显著性差异(P＜0.01)；与INS组相比较,PTF促进了β-arrestin-2信号复合物的形成.结论:PTF提高C2C12骨骼肌细胞β-arrestin-2蛋白表达和促进β -arrestin-2信号复合物形成,这可能是PTF改善胰岛素抵抗的机制之一.
关键词： 蒲黄总黄酮 胰岛素抵抗 β-arrestin-2 C2C12骨骼肌细胞 -
蒲黄总黄酮含量测定方法研究
在比较芦丁、香蒲新苷和蒲黄总黄酮(TYTF)经硝酸铝-亚硝酸钠-氢氧化钠试液及三氯化铝试剂显色前后的紫外可见吸收光谱的基础上,建立了TYTF的含量测定方法:以香蒲新苷为对照品,蒲黄样品经聚酰胺柱分离净化,三氯化铝试剂显色后,采用紫外-可见分光光度法,在405 nm波长处测定TYTF含量.该方法较以芦丁为对照品,硝酸铝-亚硝酸钠-氢氧化钠试液或三氯化铝试剂为显色剂测定TYTF含量更为合理.
关键词： 蒲黄总黄酮 香蒲新苷 紫外-可见分光光度法 -
蒲黄总黄酮对急性心肌梗死犬血清中微量元素及心肌细胞超微结构的影响
蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲Typha angustifolia L.、东方香蒲T.orientalis Presl或同属植物的干燥花粉,具有止血、化瘀、通淋等功效.蒲黄主要含有甾类、黄酮类[1].
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蒲黄总黄酮对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗及Src蛋白表达的影响
目的 观察蒲黄总黄酮对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗及Src蛋白表达的影响.方法 将分化成熟的C2C12骨骼肌细胞予含胰岛素及不同终质量浓度蒲黄总黄酮(0、0.1、0.25、0.5 g/L)分别干预处理8、16、24 h后,葡萄糖氧化酶法检测培养上清液葡萄糖浓度.另外,按处理方法将细胞分为对照组和蒲黄总黄酮组,蒲黄总黄酮干预16 h后,予和不予胰岛素刺激30 min,免疫印迹法检测蛋白表达,免疫共沉淀法检测Src相关信号复合物.结果 蒲黄总黄酮呈时间和浓度依赖性显著促进了C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗.蒲黄总黄酮组Src蛋白表达是对照组1.72倍,而蒲黄总黄酮+胰岛素组Src蛋白表达则是胰岛素组1.67倍,差异显著(P＜0.01);与胰岛素组比较,蒲黄总黄酮+胰岛素组磷酸化Src蛋白表达水平升高0.54倍,有统计学意义(P＜0.01),并且Src相关信号复合物形成也显著提高.结论 蒲黄总黄酮提高C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗,可能与其促进Src蛋白表达及其磷酸化水平和Src相关信号复合物形成有密切关系.
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蒲黄总黄酮对3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶体增生物激活受体家族mRNA基因表达的影响
目的:观察蒲黄总黄酮(Pollen Typhae total flavones,PTF)对脂肪细胞糖脂代谢和过氧化物酶体增生物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)家族基因表达的影响,并分析其改善胰岛素抵抗的可能机制.方法:蒲黄总黄酮干预3T3-L1脂肪细胞,实时定量荧光多聚酶联反应检测脂肪细胞分化相关基因PPAR家族,包括PPARa、PPARγ和PPARβ/δmRNA的表达.结果:蒲黄总黄酮可上调PPARα、PPARγ mRNA的表达,下调PPARβ/δ mRNA的表达,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:蒲黄总黄酮可能通过提高3T3-L1脂肪细胞PPARa和PPARγmRNA的表达改善胰岛素抵抗.
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蒲黄总黄酮抑制棕榈酸培养下C2C12骨骼肌细胞白细胞介素6的表达
目的:观察蒲黄总黄酮(Pollen Typhae total flavones,PTF)对棕榈酸培养下C2C12骨骼肌细胞白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,探讨PTF改善骨骼肌胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的可能机制.方法:0.25 mmol/L棕榈酸培养建立骨骼肌细胞IR模型.根据处理方法不同,设对照组、模型组、核转录因子JcB(nuclear factor-kappaB,NF-Κb)抑制剂PDTC组、罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组、ROS+PDTC组、PTF组和PTF+PDTC抑制剂组.处理16 h后,<'3>H-脱氧葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率,实时定量多聚酶联反应检测IL-6 Mrna的表达,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清中IL-6蛋白水平.结果:0.25 mmol/L棕榈酸培养16 h,C2C12细胞葡萄糖摄取率下降30.43%,IR模型建立;PTF可使IR模型细胞葡萄糖转运率增加32.39%,IL-6 Mrna表达及细胞培养上清液中IL-6蛋白水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);加入PDTC后,细胞IL-6 Mrna表达及细胞培养上清液中1L-6蛋白水平上升(P<0.05).结论:PTF通过抑制NF-Κb通路而抑制C2C12骨骼肌细胞IL-6 Mrna表达及蛋白分泌,可能是其减轻骨骼肌炎症状态和改善IR的机制之一.
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蒲黄总黄酮对Palmitate培养下的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响
目的:探讨蒲黄总黄酮(PTF)对骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响.方法:PTF处理棕榈酸(Palmitate)诱导而致胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞,采用XTT法观察药物对细胞活性的影响;通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量;3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率.结果:0.25 mmol/Lpalmitate培养16 h,造成C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量下降34.66%,0.5g/L PTF可使其葡萄糖消耗量显著增加,且呈一定的时间依赖效应,与罗格列酮(ROS)相比,统计学差异显著(P＜0.05);0.25 mmol/L.Palmi-hate培养16 h,使C2C12骨骼肌细胞葡萄糖摄取率下降30.43%,造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗(IR)模型,0.5g/L PTF可使IR模型葡萄糖转运率增加32.39%,ROS可使其转运率增加45.88%,与模型组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:FIT能显著增加C2C12骨骼肌细胞的葡萄糖消耗和摄取,这可能是PTF改善骨骼肌IR的机制之一.
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蒲黄总黄酮对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响
目的 脂肪细胞分化的调控与肥胖及胰岛素抵抗的发病机制有密切关系.文中研究蒲黄总黄酮(pollen typhae total flavone, PTF)对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响,并通过相关基因的表达分析其可能机制. 方法 通过XTT法检测各剂量PTF干预的前脂肪细胞增殖的变化,对PTF干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度.RT-PCR检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer binding proteinα, C/EBPα)mRNA的表达. 结果 PTF明显促进前脂肪细胞的增殖,在0.2 g/L时可明显促进前脂肪细胞的分化,但分化程度低于罗格列酮组.PTF可提高PPARγ和C/EBPαmRNA表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01). 结论 PTF促进前脂肪细胞增殖分化水平,其机制可能与提高PPARγ和C/EBPα的mRNA表达有关.
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蒲黄总黄酮对麻醉犬心肌耗氧量的影响
目的:观察蒲黄总黄酮对麻醉犬心肌耗氧量的影响.方法:采用麻醉犬冠脉流量、心肌耗氧量和心肌氧摄取率等指标的变化,研究蒲黄总黄酮对缺血心肌的作用.结果:灌胃给药30 min到120 min的各时间点,蒲黄总黄酮可明显增加冠脉血流量,降低心肌摄氧率和心肌耗氧量,与生理盐水组比较有显著差异(P＜0.01).结论:蒲黄总黄酮对缺血心肌具有一定的保护作用.
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蒲黄总黄酮含药血清对巨噬细胞自体吞噬及Akt/mTOR信号通路的影响
目的 研究蒲黄总黄酮(TYTF)含药血清对巨噬细胞自体吞噬的作用及其对Akt/mTOR信号通路的影响.方法 采用高、中、低剂量TYTF水溶液灌胃干预SD大鼠,制备含药血清,采用MMT法观察含药血清对细胞增殖的影响,选择浓度为20%的含药血清与巨噬细胞共培养,透射电镜下观察巨噬细胞自噬体的变化,检测白介素-10(IL-10)和干扰素γ(IFN-γ)及自噬相关基因Akt和mTOR mRNA和蛋白的表达.结果 TYTF含药血清在10%~40%的浓度范围内的OD值与正常对照组的OD值比较,差异无统计学意义(P>0.05).在透射电镜下观察,TYTF各剂量组中的自噬体的表达均明显增加,而正常对照组自噬体表达不典型.TYTF各剂量组含药血清Beclin1蛋白表达均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),而p-Akt及p-mTOR蛋白表达显著低于正常对照组(P<0.05),Akt及mTOR蛋白表达与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).TYTF各剂量组含药血清Beclin1 mRNA表达均显著高于正常对照组(P<0.05),而Akt及mTOR mRNA表达显著低于正常对照组(P<0.05).TYTF各剂量组含药血清IL-10的表达显著高于正常对照组(P<0.05),而IFN-γ的表达显著低于正常对照组(P<0.05).结论 TYTF含药血清具有抗动脉粥样硬化的作用,可能抑制Akt/mTOR信号通路的激活,从而诱导巨噬细胞的自噬活动,减少斑块内巨噬细胞的浸润,并通过抑制炎症反应因子的分泌,抑制炎症反应活动,进而达到促进动脉粥样硬化易损斑块稳定性的目的.
