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2009-2011年浙江省富阳市人民医院金黄色葡萄球菌的感染分布和耐药性调查
目的 分析浙江省富阳市人民医院2009-2011年临床分离的金黄色葡萄球菌的感染分布、耐药情况和检测克林霉素诱导型耐药的发生率,为临床正确选择抗菌药物提供依据.方法 用常规细菌培养方法从患者标本中分离出细菌,法国ATB细菌仪鉴定菌种,采用K-B纸片法检测抗菌药物的敏感性,按照CLSI推荐的D试验方法检测分析红霉素对克林霉素诱导耐药情况.结果 2009-2011年共分离出225株金黄色葡萄球菌,分离率高为痰及支气管吸出物,占65.8％,其次为脓液,占14.2％.以重症监护室、呼吸内科和骨科为多见.未发现对万古霉素耐药的菌株,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)共检出108株,D试验阳性率为65.5％.结论 金黄色葡萄球菌感染以呼吸道为主,其次为脓液.对各种抗菌药物除万古霉素外均出现了不同程度的耐药.克林霉素诱导型耐药发生率很高.应加强金黄色葡萄球菌耐药性的监测与控制,常规检测D试验,指导临床合理使用抗菌药物.
关键词： 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 诱导型耐药 D试验 -
葡萄球菌属的耐药性及耐药机制探讨
目的探讨诱导型克林霉素耐药测定的临床价值和评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因. 方法用NCCLS规定的D试验法检测红霉素和克林霉素的耐药表型,以及根据2004年版的NCCLS推荐使用头孢西丁(30μg)纸片扩散法检测葡萄球菌mecA基因. 结果所有 390株葡萄球菌属细菌中, 218株(55.9%)对红霉素和克林霉素均耐药(cMLS),70株(17.9%)对红霉素耐药,克林霉素敏感,但D试验阳性(iMLS),79 株(20.3%)对红霉素耐药,克林霉素敏感,但D试验阴性(MS);头孢西丁纸片扩散法筛选的 390株葡萄球菌属细菌,有 272株为MRS. 结论开展D试验检测葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药性可帮助临床医师正确选用大环内酯类、克林霉素类抗菌药物,同时用头孢西丁纸片扩散法可以成为临床实验室常规开展筛选MRS的方法.
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D试验检测葡萄球菌属中克林霉素诱导型耐药
目的 应用D试验检测葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,了解葡萄球菌属对红霉素及克林霉素的耐药率.方法 按照美国临床实验室标准化委员会2004年推荐的标准,测定葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.结果 77株葡萄球菌属(金黄色葡萄球菌20株,凝固酶阴性葡萄球菌57株)中,红霉素与克林霉素同时耐药者分别占50.0%和22.8%,红霉素耐药而克林霉素敏感分别占20.0%和59.6%,其中D试验阳性分别占红霉素耐药而克林霉素敏感菌株的50.0%和61.8%.结论 临床微生物室应开展D试验检测葡萄球菌属中克林霉素诱导型耐药,以指导临床医生合理选用大环内酯类、林可霉素类、B类链阳霉素类抗菌药物.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌D试验检测与耐药性分析
目的：了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（M RS A ）的感染特点和耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法统计分析2013年1月－2014年8月儿童医院住院及门诊973例SAU感染患儿临床资料，使用VIT EK‐2 Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定、药敏试验和D试验检测，用头孢西丁和苯唑西林两个指标确认MRSA。结果检出金黄色葡萄球菌共973株，其中检出MRSA 168株、检出率为17．27％，＜2岁患儿中检出M RS A 132株、检出率为18．38％；M RS A中D试验阳性率为27．38％，M RS A对红霉素耐药、克林霉素敏感D试验阳性率为92．00％，MSSA诱导克林霉素耐药率为87．30％；MRSA对万古霉素、利奈唑胺、喹奴普汀／达福普汀、替加环素敏感率均为100．00％。结论 M RS A耐药严重，且多见于婴幼儿，患儿克林霉素诱导率较成人高，应加强对M RS A的管理与监测，防止其暴发与流行。
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 D试验 诱导耐药 耐药率 -
中医医院耐药葡萄球菌属检测分析
目的 了解医院2008年10月-2010年4月门诊和住院患者耐药葡萄球菌属感染现状,为临床抗感染治疗提供依据.方法 同步检测葡萄球菌属产β-内酰胺酶菌株、耐甲氧西林葡萄球菌菌株、红霉素诱导克林霉素耐药菌株等3种类型耐药菌的耐药表型.结果 141株葡萄球菌属中产β-内酰胺酶菌株阳性率95.7 %;耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)阳性率63.8%;红霉索诱导克林霉素耐药菌株阳性率(D试验阳性)39.0%;红霉素耐药率高达91.5%;克林霉素非诱导耐药率为41.1 %,克林霉素总耐药率为80.0%;红霉素诱导克林霉素耐药菌株在MRS中为36.9%,甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)中为43.3 %.结论 注重葡萄球菌属多种耐药性检测,根据药敏结果合理应用抗菌药物.
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葡萄球菌属中红霉素诱导克林霉素耐药的分析
目的 检测葡萄球菌属中红霉素诱导克林霉素耐药的发生率,为临床合理用药提供依据.方法 用纸片扩散法检测葡萄球菌属对红霉素和克林霉素的耐药性,并用D试验对红霉素诱导克林霉素耐药进行分析.结果 259例葡萄球菌对红霉素和克林霉素同时耐药的占33.6％；同时敏感的占17％；红霉素敏感克林霉素耐药的占12％；红霉素耐药克林霉素敏感的占37.5％,其中D试验阳性的占58.8％,金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌D试验阳性率分别为74.4％和48.3％,MRSA和MSSA D试验阳性率分别为64.7％和81.2％.结论 当红霉素耐药克林霉素敏感时必须进行D试验,检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药,为临床用药提供治疗依据.
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医院环境中葡萄球菌诱导克林霉素耐药及基因分析
目的：了解医院环境中存在的葡萄球菌属细菌分布，检测环境分离株对红霉素和克林霉素的耐药性，并检测红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率。方法按照院内感染管理环境采样标准采集医院环境包括空气、物体表面、工作人员手、样品。分离其中葡萄球菌属细菌，用k-b法检测其对红霉素及克林霉素的耐药性，并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率。结果210株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌16株，表皮葡萄球菌162株，其他凝固酶阴性葡萄球菌32株；其中红霉素耐药克林霉素耐药62株，占29．52％，红霉素敏感克林霉素敏感29株，占13．81％，红霉素耐药或中介克林霉素敏感或中介119株，占56．67％，其中D试验阳性82株，占39．05％，D试验阴性37株，占17．62％．红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因，占56．09％（46/82）。结论医院环境中葡萄球菌分布以表皮葡萄球菌为主，D试验阳性率与临床分离标本基本一致，常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物，ermC是诱导耐药的主要基因。
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溶血葡萄球菌对8种抗菌药物及诱导克林霉素耐药分析
目的 分析溶血葡萄球菌的抗药性,及红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率,为临床治疗提供依据,使临床更加合理有效地使用抗菌药物,提高治疗成功率.方法 分离培养各类标本中的溶血葡萄球菌,琼脂稀释法检测8种常用抗菌药物的耐药性,并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率.用头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus haemolyticus,MRSH).结果 125株溶血葡萄球菌中MRSH 115株,占92.0％;甲氧西林敏感溶血葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus haemolyticus,MSSH)10株,占8.0％.总D试验阳性35株,占28.0％;D试验阴性90珠,占72.0％.对环丙沙星、万古霉素、红霉素、左氧氟沙星、青霉素、头孢呋辛、庆大及克林霉素的耐药性分别为81.0％、0.0％、88.0％、51.5％、100.0％、59.1％、54.5％、76.0％.结论 溶血葡萄球菌对红霉素、克林霉素等常用药物耐药严重,常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物.
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葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素的耐药性检测
目的：检测葡萄球菌临床分离株红霉素诱导克林霉素耐药的发生率。方法收集我院2011年6月-12月临床标本分离的179株葡萄球菌，采用M-H琼脂稀释法进行药敏试验，检测葡萄球菌属红霉素诱导克林霉素的耐药性。结果对红霉素和克林霉素同时敏感（26.8%），同时耐药（26.8%），红霉素耐药克林霉素敏感（34.6%），红霉素敏感克林霉素耐药（11.7%）。其中D试验阳性（58.1%），金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌D试验阳性率分别为52.2%和61.5%。结论红霉素耐药而克林霉素敏感的菌株，应加强红霉素诱导克林霉素耐药性检测，帮助临床正确选用大环内酯类、林可酰胺类、链阳霉素B类（MLSB）抗菌药物。
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表皮葡萄球菌诱导克林霉素耐药及常见抗生素耐药性分析
目的 分离临床标本中表皮葡萄球菌,检测其对常用抗生素的耐药性,并检测红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率.方法 分离培养临床标本中的表皮葡萄球菌,用k-b法检测其对红霉素及克林霉素等抗生素的耐药性,并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率.用头孢西丁法检测MRSE.结果 86株表皮葡萄球菌中MRSE 72株,占83.72%,MSSE 14株 占16.28%.总D试验阳性34株,占39.53%,D试验阴性52珠,占60.47%.所有试验菌株对青霉素耐药率100%,红霉素耐药率88.37%,克林霉素24.42%,利奈唑烷100%敏感,万古霉素100%敏感.结论 临床分离表皮葡萄球菌对青霉素,红霉素和克林霉素等药物耐药率较高,常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物.
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2种表型试验检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的评估及基因分析
目的：评价MicroScan革兰阳性复合板（简称PC33复合板）和D试验（红霉素、克林霉素双纸片法）检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的性能及耐药基因分析。方法检测115株 PC33复合板检测结果为红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌对红霉素／克林霉素复合孔的耐药性，同时用 D 试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药表型，用聚合酶链反应（PCR）检测大环内酯类-林可酰胺类-链阳霉素 B 类复合药物（MLS）的耐药基因。结果PC33复合板耐药检出率分别为金黄色葡萄球菌61．3％、凝固酶阴性葡萄球菌47．6％，D 试验耐药检出率分别为金黄色葡萄球菌61．3％、凝固酶阴性葡萄球菌51．2％，2种方法的检测结果差异无统计学意义（P ＞0．5）。以 D 试验为判断标准计算 PC33复合板检测克林霉素诱导耐药的敏感性为95．1％，特异性为100．0％；检出 erm 基因常见的结构型 MLS（cMLS）耐药基因 ermA 和诱导型 MLS（iMLS）耐药基因 ermC。结论PC33复合板与 D 试验检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的结果有很好的一致性；PC33复合板有较好的临床应用价值。实验室应加强克林霉素诱导耐药的检测，以指导临床合理选用抗菌药物。
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检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的两种方法比较
目的 了解临床分离金葡菌的耐药性及诱导型克林霉素耐药的发生率,评价微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药的临床应用价值.方法 V ITEK-2微生物分析系统及K-B法药敏试验对临床分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;红霉素和克林霉素双纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药,并比较检测结果.结果 受试的23种抗菌药物中,耐药率大于50.0%的药物品种达14种.其中,对青霉素和氨甚苄西林的耐药率高,均为97.0%;其次对红霉素和四环素的耐药率分别为71.7%和68.7%;对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率高,均为100%;其次对呋喃妥因、氯霉素和磺胺甲噁唑-甲氧苄啶的敏感率分别为95.0%、93.9%和88.9%.MRSA和MSSA各为63株(63.6%)和36株(36.4%).对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株共l0株,且D试验均为阳性,占所有菌株的10.1%.所有D试验阳性菌株微量肉汤稀释法也均为阳性,两者符合率为100%.结论 临床分离金葡菌多重耐药现象十分严重.D试验和微量肉汤稀释法均可用于检测金葡菌诱导型克林霉素耐药.
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葡萄球菌中两类D试验阳性表型及基因分析
目的 研究葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药表型及基因型.方法 对116株金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌进行红霉素和克林霉素双纸片扩散法药敏实验,即D试验,以检测其耐药表型.应用PCR检测大环内酯类-林可酰胺类-链阳菌素B(MLSB)耐药葡萄球菌的3种erm耐药基因,比较耐药表型同基因型的关系.结果 D试验结果 出现两类不同的诱导耐药阳性表型,分别为D表型和D+表型.克林霉素对8株葡萄球菌的抑菌圈在靠近红霉素一侧变钝的截面平整而清晰,为D表型;其余32株钝形截面边缘到克林霉素纸片之间生长有细小菌落,为D+表型.PCR结果 显示D表型的菌株含ermA基因,而D+表型主要含ermC或者同时含有ermA和ermC.两纸片距离10～15 mm有利于预测菌株的基因型.结论 D试验可有效检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药性,且可预测其诱导耐药的基因型.两类D试验阳性表型同基因型存在相关性.
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对大环内酯类、林可酰胺类、链阳菌素抗生素耐药葡萄球菌检测
目的了解复旦大学附属华山医院临床分离株中诱导型克林霉素耐药葡萄球菌的检出率及其相关耐药基因erm的分布情况.方法根据NCCLS推荐的15μg/片红霉素和2μg/片克林霉素的纸片协同试验(D试验)对90株红霉素耐药的葡萄球菌检测诱导型克林霉素(iMLS)耐药;PCR检测与诱导型克林霉素耐药相关的ermA、ermC基因.结果 90株红霉素耐药葡萄球菌中,56株克林霉素敏感或中敏者显示D试验阳性(iMLS型),占62.2%;另有22株克林霉素敏感者显示D试验阴性(MS型),占24.4%;12株克林霉素耐药者(cMLS型)亦显示D试验阴性,为13.4%.PCR结果显示56株iMLS型葡萄球菌均具有ermA或ermC基因,并以ermC基因为主,为91.1%(51/56).12株cMLS型葡萄球菌中8株具有ermA或ermC基因.22株MS型均未检测到该2种基因.结论诱导型克林霉素耐药的葡萄球菌检出率为62.2%(56/90),其主要编码基因为ermC(91.1%,51/56).临床分离株金葡菌04-17的ermA基因序列与GenBank金葡菌M661的ermA序列完全一致,可能可作为D试验阳性的质控对照株.
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D试验和多重PCR检测红霉素耐药葡萄球菌
目的了解红霉素耐药的葡萄球菌对克林霉素的耐药表型和基因型,指导临床合理使用抗生素. 方法用NCCLS标准D试验检测红霉素和克林霉素的耐药表型,通过多重PCR检测耐药基因ermA、ermC和msrA. 结果所有144株葡萄球菌中,84株(58.3%)对红霉素和克林霉素耐药(cMLS),27株(18.8%)对红霉素耐药对克林霉素敏感但D试验阳性(iMLS),33株(22.9%)对红霉素耐药,对克林霉素敏感但D试验阴性(MS).在MS型耐药的菌株中均只检测到msrA基因,在cMLS 和iMLS型耐药的菌株中,除了1株3种基因均阴性外,其他均检测到ermA或ermC基因.在金葡菌中iMLS型耐药的菌株以ermC基因稍多(3/5),而cMLS 型耐药的菌株以ermA基因居多(56/62);在凝固酶阴性葡萄球菌中iMLS型和cMLS型耐药的菌株均以ermC基因居多(分别为22/22和11/14)结论 iMLS型耐药的葡萄球菌在临床比较多见,多重PCR和D试验均可对其鉴别,临床微生物实验室应常规进行D试验.
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71株葡萄球菌克林霉素诱导耐药分析
目的了解我院2004年葡萄球菌临床分离株的克林霉素诱导耐药分布情况以及纸片距离对试验结果的影响.方法收集我院2004年分离到的红霉素耐药、克林霉素敏感和中介的葡萄球菌临床株71 株,其中金葡菌16株, 凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)55株.双纸片法检测克林霉素诱导耐药(D试验),对D试验阳性菌株再次用纸片边缘距离分别为10～15 mm,16～20 mm,21～25 mm,26～28 mm 4组测定D试验结果,了解纸片距离对D试验结果的影响.结果克林霉素的诱导耐药比例为45.1 %,其中金葡菌组68.8 %,CNS组38.2%,P<0.05,差异具有非常显著性,纸片距离大于26mm会对D试验结果造成影响.结论实验室必须加强对葡萄球菌诱导耐药检测.
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葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的检测和分析
目的 调查临床分离的葡萄球菌对克林霉素诱导耐药状况和基因型特征.方法 收集我院2004年分离到的70株红霉素耐药、克林霉素敏感和中介葡萄球菌临床分离株,双纸片法做克林霉素诱导耐药(D试验),PCR检测细菌的ermA、ermB、ermC和msrA基因.结果 70株葡萄球菌中克林霉素诱导耐药32株(45.7%).基因型分别是ermA 1株,ermC33株,msrA18株,ermC+msrA5株,全部阴性的13株.结论 我院葡萄球菌克林霉素诱导耐药率较高,且存在多种基因型,应提高对诱导耐药葡萄球菌的监测和控制.
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葡萄球菌与β-溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的分析
本研究对我院2007～2008年临床分离到的葡萄球菌属和β-溶血链球菌中红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的菌株,用双纸片琼脂扩散法做D试验,了解诱导型克林霉素耐药在葡萄球菌和β-溶血链球菌中的分布情况,以指导临床医生正确合理使用抗生素.
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红霉素耐药葡萄球菌对克林霉素诱导性耐药的研究
目的：了解临床分离的红霉素耐药葡萄球菌对克林霉素诱导性耐药的发生率，比较双纸片扩散法（D试验）中纸片之间距离对试验结果的影响。方法VITEK-2微生物分析系统检测为红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的葡萄球菌135株，其中金黄色葡萄球菌（SA）为55株，凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）为80株。比较红霉素纸片与克林霉素纸片边距15 mm与26 mm对结果的影响。结果 D试验阳性率为57.0%，其中SA阳性率70.9%， CNS为47.5%（P＜0.01）。纸片边距15 mm组D试验阳性77株，26 mm组仅69株，漏检率10.4%（P＜0.05）。结论实验室应常规开展D试验，D试验中双纸片间距以15 mm为佳。
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β溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析
目的 了解β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的表型和基因型.方法 按CLSI推荐的K-B法测定并判读β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,用D试验检测红霉素诱导β溶血链球菌对克林霉素耐药的表型,并且用PCR方法确定所检测的菌株是否携带的ermB基因和mefA基因.结果 49株红霉素耐药的β溶血链球菌结果显示有35株β溶血链球菌只扩增到ermB基因,有9株只扩增到mefA基因,有3株同时扩增到ermB和mefA基因,有2株没有扩增到ermB和或mefA基因;17株红霉素耐药克林霉素敏感菌株中D试验阳性8株细菌都只扩增到ermB,D试验阴性9株细菌中都只扩增到mefA;红霉素敏感的β溶血链球菌没有扩增到ermB或mefA基因.结论 β溶血链球菌的耐药表型与基因型高度一致,临床上可用PCR方法和D试验检测,D试验检测更为简单方便,临床应该用D试验检测β溶血链球菌的iMLS型耐药.
