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快速制备液相色谱制备管花肉苁蓉中的松果菊苷
目的:建立从管花肉苁蓉中快速制备松果菊苷对照品的工艺.方法:运用快速制备液相色谱对管花肉苁蓉浸膏进行分离纯化,得到高纯度的松果菊苷.结果:分离得到的化合物经UV、IR、MS和NMR鉴定为松果菊苷,HPLC测定其纯度为98.38％.结论:本文方法简便、快速,所得产物纯度高,可用于松果菊苷对照品的制备.
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荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的组织结构比较研究
目的:研究荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的组织结构差异.方法:利用石蜡切片法、徒手切片法及解离组织等方法对两种植物的茎、叶、花等器官的解剖学特征进行比较,显微观察并照相.结果:管花肉苁蓉与荒漠肉苁蓉在内部构造上存在明显差异.结论:两者在形态结构方面都有抗旱的适应性,荒漠肉苁蓉更能适应干旱环境.
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不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的电泳分析
目的:对5个管花肉苁蓉材料进行鉴别,探索可溶性蛋白电泳指纹图谱与鉴定之间的关系,同时为建立中药材电泳图谱库提供材料.方法:研究了不同寄主的5个管花肉苁蓉材料的可溶性蛋白在SDS-PAGE条件下的电泳特性.结果:不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱分辨率高,重现性强,其多态性条带为55.56%.结论:各个材料的电泳图谱可以相互区别.不同寄主管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的依据.
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HPLC-ELSD测定肉苁蓉及管花肉苁蓉中半乳糖醇含量
目的 建立肉苁蓉及管花肉苁蓉中半乳糖醇含量的测定方法,为肉苁蓉质量标准的制定提供依据.方法 通过建立半乳糖醇的高效液相色谱含量测定方法,对20个批次的肉苁蓉和管花肉苁蓉中半乳糖醇进行分析.色谱条件:采用Alltech Pevail Carbohydrate ES色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水(80∶20)为流动相,流速为1.0 mL/min;进样量为10 μL;蒸发光散射检测器漂流管温度为80 ℃,载气流速为3.0 L/min.结果 半乳糖醇在89.6～1 120 mg/L范围内峰面积对数值与进样量对数值有良好的线性关系(r＝0.999 0),方法检出限为15.998mg/L,定量限为79.903mg/L,肉苁蓉和管花肉苁蓉中半乳糖醇的平均回收率(n＝5)分别为100.34%和101.11%,RSD分别为1.72%和1.33%.结论 该方法简便准确,灵敏度高,重复性好,可以作为肉苁蓉的质量控制方法.
关键词： 肉苁蓉 管花肉苁蓉 高效液相色谱-蒸发光散射检测器 半乳糖醇 -
8种柽柳引种适应性及接种管花肉苁蓉试验研究
目的:通过对不同柽柳种适应性、管花肉苁蓉接种率和松果菊苷含量的分析,为柽柳引种和管花肉苁蓉种质资源保护及筛选提供理论依据.方法:在华北平原引种8种柽柳并接种管花肉苁蓉,采用高效液相法分析了苯乙醇总苷指纹图谱和松果菊苷含量.结果:不同柽柳种的适应性差异显著,甘肃柽柳、甘蒙柽柳与对照中国柽柳管花肉苁蓉的苯乙醇总苷组成成分基本相同,生长4个月时的松果菊苷含量差异不显著.结论:甘肃柽柳和甘蒙柽柳适宜作为管花肉苁蓉种质资源保护和筛选的寄主在华北平原引种栽培.
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管花肉苁蓉产地适宜性数值分析
目的:应用TCMGIS-Ⅰ系统分析濒危药材管花肉苁蓉产地适宜性,为管花肉苁蓉的科学区划及种植提供依据.方法:应用<中药材产地适宜性分析地理信息系统>(TCMGIS-Ⅰ),以新疆南疆和田地区管花肉苁蓉野生分布区的适宜生长环境因子为依据,分析管花肉苁蓉的适宜产区及分布面积.结果:新疆、内蒙古、宁夏、甘肃、青海5省区是管花肉苁蓉适宜产区,其中适宜产区包括新疆、内蒙古、甘肃3省区的56个县市,总面积为190 952.1 km2,占所在县市总面积的11.45%;适宜产区包含新疆、甘肃、青海3省区46个县市,总面积为41217.37km2,占所在县市总面积的2.71%;次适宜产区包含新疆、内蒙古、宁夏、甘肃4省区56个县市,总面积为421 145.2 km2,占所在县市总面积的28.38%.在各级别的适宜产区中,新疆包含的县市数多、总面积大,其次为甘肃、内蒙古、宁夏、青海省区.结论:应用TCMGIS-Ⅰ系统分析管花肉苁蓉产地适宜性具有一定的科学性和准确性,对濒危药材管花肉苁蓉的引种栽培及科学区划具有重要的参考价值.
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管花肉苁蓉田间接种技术的研究
目的:通过对管花肉苁蓉接种技术的研究,提高管花肉苁蓉的田间接种率.方法:用根管接种法,比较分析了不同大小种子、接种介质和接种时间等对管花肉苁蓉接种率的影响.结果与结论:选择宽度大于0.7 mm的种子,粗砂为接种介质,于5月份接种,可使管花肉苁蓉的接种率达到92.5%.
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管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量测定
目的:采用高效液相色谱法,测定管花肉苁蓉野生种和栽培种以及人工种植不同寄主、不同大小药材的有效成分松果菊苷和毛蕊花糖苷含量.方法:Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相甲醇-乙腈-1%醋酸(15:10:75),流速0.6 mL·min-1,柱温30 ℃,检测波长334 nm.结果:松果菊苷在0.904～9.04 μg呈良好线性关系,回归方程为Y=2.000×106X-114 800(r=0.999 9),毛蕊花糖苷在1.27～12.7 μg呈良好线性关系,回归方程为Y=3.000×106X-243 200(r=0.999 9),加样回收率松果菊苷平均为98.9%(n=5,RSD 1.9%);毛蕊花糖苷平均为97.0%(n=5,RSD 0.97%).结论:本法用于管花肉苁蓉的测定简便、快速、灵敏、重复性好,所测样品中有效成分松果菊苷比毛蕊花糖苷的含量均高,野生种的2种有效成分含量均比栽培种的高,将样品以个体长度分成大、中、小3种不同样品,所测结果表示其含量按大、中、小依次增加,不同寄主间的含量差异很大,为评价管花肉苁蓉的药材质量提供一定的依据.
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管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态学研究
目的:了解管花肉苁蓉寄生过程.方法:变档体视显微镜观察管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态结构.结果:①管花肉苁蓉种子不接触寄主柽柳根,可独立萌发.②种子萌发首先从种孔长出芽管,其顶端与寄主根接触并膨大为吸器,吸器侵入寄主根,使寄主根维管束内充满褐色物质.③管花肉苁蓉幼体撑破芽管而出,其上可见6～7个鳞叶突起的;断裂的芽管、胚乳细胞残留体及种皮脱落.④近茎端的根明显膨大变粗;远茎端的寄主根则逐渐萎缩.结论:寄生过程遵循种子萌发长出芽管,接触寄主根形成吸器并侵入寄主根,管花肉苁蓉幼体出现3个阶段.
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管花肉苁蓉松果菊苷次生代谢部位研究
目的:通过对管花肉苁蓉寄生生长和柽柳-管花肉苁蓉不同部位松果菊苷含量的研究,为明确管花肉苁蓉松果菊苷的次生代谢部位及调控提供理论依据.方法:高效液相系统分析了指标性成分松果菊苷含量,比较分析了管花肉苁蓉干物质积累量、松果菊苷积累量和寄生柽柳根粗的相关关系.结果:随着管花肉苁蓉干物质积累量的增加,植株内的松果菊苷积累量显著增加,两者与寄生的柽柳根粗呈极显著正相关关系.吸器韧皮部的松果菊苷质量分数为15.53%,高于吸器木质部、管花肉苁蓉植株及其他部位的松果菊苷含量.结论:吸器韧皮部可能是管花肉苁蓉松果菊苷的次生代谢部位.
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华北平原管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量动态变化研究
目的:通过对管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的研究,为华北平原人工栽培管花肉苁蓉提供理论依据.方法:比较分析了华北平原管花肉苁蓉不同生长阶段干物质积累量的动态变化,高效液相系统分析了指标性成分松果菊苷含量.结果:管花肉苁蓉干物质积累呈"S"型动态变化,9月份干物质积累增加多,生长12个月单株干物质量可达138.58g;不同接种时间的管花肉苁蓉,随着接种时间的推迟,年内干物质积累量显著降低;管花肉苁蓉松果菊苷含量以生长5个月时高,达到30.59%,之后逐渐降低,生长12个月时松果菊苷含量为9.76%.结论:明确了华北平原一年生管花肉苁蓉干物质积累和松果菊苷含量的动态变化规律.
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鲜管花肉苁蓉加工工艺
目的:建立鲜管花肉苁蓉直接加工饮片的工艺.方法:采用4因素3水平的正交试验对鲜管花肉苁蓉饮片加工过程的主要影响因素,包括切片厚度、加热温度和杀酶时间进行了优化,得到佳的工艺参数为:鲜管花肉苁蓉切成4 mm厚片,70℃杀酶6 min.另外,将优化后的工艺与鲜管花肉苁蓉切片直接晒干、鲜管花肉苁蓉按传统方法晒干的工艺进行了比较.结果:按照优化后工艺得到的饮片,其松果菊苷的含量是鲜品切片直接晒干方法的7.3倍,是传统晒干方法的12.8倍;毛蕊花糖苷的含量是鲜品切片直接晒干方法的6.5倍,是传统晒干方法的14.9倍.结论:利用本方法加工管花肉苁蓉,可以大大提高饮片中有效成分的质量,节约原料,从而有效地保护野生肉苁蓉资源,提高药物的疗效,将产生很好的经济效益和生态效益.
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野生与栽培管花肉苁蓉的遗传多样性分析
目的:研究野生与栽培管花肉苁蓉的遗传多样性.方法:采用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对管花肉苁蓉的4个野生居群和2个人工栽培居群的123个个体进行了遗传多样性研究.利用POPGENE1.31版软件分析群体的遗传多样性.结果:用10个随机引物共扩增出清晰谱带87条.野生居群平均多态位点百分率27.59,各居群多态位点百分率19.54～25.29,其中安迪尔居群的高为25.29.2个人工栽培居群的多态位点百分率仅为13.79和11.49.用UPGMA法聚类可知,4个野生居群聚为一类,2个人工栽培居群聚为一类,表明野生居群与人工居群间已发生了遗传分化.结论:栽培管花肉苁蓉遗传背景单一,再次强调野生管花肉苁蓉保护的重要性.
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不同种柽柳上寄生的管花肉苁蓉RAPD分析
目的:研究寄主植物柽柳对管花肉苁蓉遗传物质的影响,为管花肉苁蓉寄主植物的科学选择提供依据.方法:用筛选出来的16个10-mer寡聚核苷酸引物对寄生于8种柽柳上的管花肉苁蓉遗传物质进行RAPD分析.结果:寄生于8种不同柽柳上的管花肉苁蓉遗传多态性为66.7%,说明管花肉苁蓉不同居群之间存在有较丰富的遗传多样性,以刚毛柽柳和中国柽柳上寄生的管花肉苁蓉为特别;生长区域比寄主植物对管花肉苁蓉遗传物质的影响较为明显,异地引种对保持管花肉苁蓉较高的遗传多样性有利;管花肉苁蓉种内居群间遗传物质差异远小于肉苁蓉属植物种间的遗传差异.结论;不同种寄主植物柽柳上寄生的管花肉苁蓉居群间具有较高的遗传多样性.
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药用肉苁蓉的遗传多样性RAPD分析
目的:荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola和管花肉苁蓉Cistanche tubulosa群体遗传多样性的研究.方法:对荒漠肉苁蓉2个野生居群和管花肉苁蓉4个野生居群进行RAPD分析,利用POPGENE1.31版软件分析群体的遗传多样性.结果:荒漠肉苁蓉平均多态位点百分率47.37%,2个居群多态位点分别为39.47%和35.53%,平均Nei,s基因多样性为0.135 8,Shannon's多态性信息指数为0.207 2,基因分化系数Gst=0.254 6.管花肉苁蓉平均多态位点百分率27.59%,各居群多态位点百分率从19.54%到25.29%,其中安迪尔居群的高25.29%,平均Nei's基因多样性为0.082 3,Shannon's多态性信息指数为0.125 8,基因分化系数Gst=0.175 5.结论:荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉在居群间均有一定的分化,荒漠肉苁蓉的遗传多样性明显高于管花肉苁蓉,并已明显分化成2个生态型.
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利用1H-NMR比较管花肉苁蓉野生品和栽培品的化学成分组
管花肉苁蓉素有“沙漠人参”之称,为著名补益类中药.为了缓解管花肉苁蓉的资源问题并有效保护野生资源,我国在新疆的南疆地区大力推广管花肉苁蓉的人工栽培,目前已取得了可喜的成果.该文利用1 H-NMR技术能够全面提供定性和定量信息的优点,深入地比较管花肉苁蓉野生品和栽培品的化学成分组,以期为栽培品替代野生品使用的科学性提供直接证据.野生品和栽培品药材提取后,平行采集1H-NMR图谱;通过直观比较,发现2组图谱间相似度较高;通过与对照品及数据库(如HMDB,BMRB等)比对,从典型图谱中初步鉴定了28个化学成分;利用多元统计学手段比较野生品和栽培品的1H-NMR图谱,发现两组样品间并不存在显著差异.统计结果表明,从化学成分组成而言,管花肉苁蓉的野生品与栽培品相似度高,一定程度上证明栽培品可以替代野生品使用.同时,1H-NMR技术能够反映中药提取物等复杂体系的定量化学成分组,在中药化学成分定性和定量分析领域具有较为广泛的应用前景.
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华北平原管花肉苁蓉寄生环境研究
管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schenk)Wight为列当科肉苁蓉属的寄生植物,野生资源主要分布于我国新疆天山以南各县,其寄主为防风固沙、耐盐碱的柽柳属Tamarix L.植物[1].肉苁蓉具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效[2].现代研究表明具有提高性功能、调节免疫功能、增强体力、抗氧化和肝炎、抗肿瘤和辐射等多方面作用[3].
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氟啶酮对管花肉苁蓉种子萌发影响的研究
管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schenk)Whigt是列当科肉苁蓉属多年生全寄生草本植物[1],以干燥肉质茎人药,是中药材肉苁蓉基源植物之一[2].近年来由于市场需求量不断增加,造成野生资源的严重匮乏,已被列为国家二级珍稀濒危保护植物[3].为了满足药用,开展了人工种植管花肉苁蓉的研究[4-6],但接种率普遍较低,这主要是因为管花肉苁蓉是寄生植物,种子萌发机制尚不清楚,自然条件下,其萌发需要来自寄主柽柳根的刺激.本实验研究了氟啶酮对管花肉苁蓉种子萌发率的影响,以期能为管花肉苁蓉的人工接种率的提高提供依据.
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柽柳种子发芽特性研究
柽柳Tamarix chinensis Lour.又名西河柳,其细嫩枝叶可以散风,解表,透疹[1],耐干旱、耐盐碱、抗风沙,是荒漠地区造林绿化的先锋树种[2],名贵中药材管花肉苁蓉就寄生在它的根部[3].近年随着对管花肉苁蓉中药材需求量的上升,人工种植柽柳林的面积也不断扩大.
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植物生长调节剂对柽柳及管花肉苁蓉生长的影响
目的:探讨不同浓度NAA,IBA,ABT生根粉对柽柳插条生根及管花肉苁蓉接种的影响.方法:分别用0.4,0.8,1.6,3.2 g·L-1的NAA,IBA,ABT生根粉浸泡柽柳茎条2 h,对照为清水.结果:IBA 3.2 g·L-1,NAA 0.4 g·L-1,ABT 3.2 g·L-1处理均会使单株柽柳上寄生的管花肉苁蓉生物量明显增加.结论:3.2 g·L-1IBA,0.4g·L-1NAA,3.2 g·L-1 ABT生根粉能够促进柽柳插条生根及管花肉苁蓉的接种和生长.
