南蛇藤抗肿瘤作用的研究进展

国内外研究表明,南蛇藤具有较好的抗肿瘤活性,其主要作用为抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿痛血管生成、逆转肿瘤多药耐药等.对其抗肿瘤药效学物质基础和抗瘤机制的深入研究具有重要意义.

南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠VEGF、CECs的影响

目的 观察南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs的影响.方法 采用常规无菌接种技术制作小鼠肝癌Hepal-6移植性肿瘤模型,观察南蛇藤总萜高、中、低剂量(40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg)对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs表达的影响.结果 南蛇藤总萜在20 mg/kg时,外周血VEGF (45.24±21.36) pg/ml、CECs (0.83±0.10)％表达明显降低,与阴性对照组(0.9％生理盐水)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 南蛇藤总萜可明显降低VEGF、CECs表达,这一作用可能与南蛇藤总萜抑制肝癌血管生成有关.

328南蛇藤的研究进展

南蛇藤含有丰富的萜类、生物碱、黄酮类化合物.现代研究证实其具有抗炎镇痛、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗生育等广泛的药理活性,对其药效学物质基础进行深入的研究和开发,具有重大意义.

南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响＊

目的：结合体内外实验研究南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的作用及分子机制。方法：取对数生长期HepG2细胞，除对照组外，分别给予南蛇藤提取物10、20、40、80、160滋g·mL-1培养，采用Western Blotting法检测上皮间质转化（EMT）相关蛋白的表达水平；斑马鱼胚胎，于受精后48 h开始给药，正常组给予E3缓冲液，DMSO组为含1% DMSO的E3缓冲液，南蛇藤组各药物浓度分别为10、20、40、80、160滋g·mL-1；给药24 h后，以Western Blotting法检测mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果：与对照组相比，南蛇藤提取物各浓度组明显增加E-cadherin的表达量，降低vimentin和mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结论：南蛇藤提取物能在一定程度上逆转人肝癌细胞EMT ，其分子机制可能与mTOR信号通路相关，mTOR可作为临床治疗肝癌的新靶点。

南蛇藤提取物增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭能力的研究＊

目的：构建高表达抑癌基因Maspin的人胃癌MGC803细胞，研究不同浓度的南蛇藤提取物能否增强Maspin抑制胃癌细胞的侵袭能力。方法：克隆重组GV208-Maspin-EGFP慢病毒表达载体，感染人胃癌MGC803细胞。加入不同浓度的南蛇藤提取物（10、20、40μg·mL-1），Transwell小室法检测药物对高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞侵袭能力的影响。结果：成功构建高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞模型。各药物组Transwell小室下方穿膜细胞的数目减少，呈现一定的药物浓度依赖性。结论：南蛇藤提取物可增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭的能力。

南蛇藤提取物对过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株的影响

目的:构建过表达雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)的人肝癌HepG2细胞,并研究中草药南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.提取物对该细胞的影响.方法:利用分子生物学技术,将GV238-mTOR重组质粒转染人肝癌HepG2细胞,分别用荧光素酶活性检测和Western Blot实验,分析转染后的细胞中mTOR的表达水平.人肝癌HepG2/mTOR++细胞中,加入不同浓度的南蛇藤提取物(20、40、80、160、320 μg·mL-1)作用24 h后,分析南蛇藤提取物对mTOR蛋白的作用.结果:经转染的人肝癌HepG2细胞中,mTOR蛋白的表达水平显著增加.南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞的增殖,并明显降低细胞内mTOR蛋白的表达.结论:本实验成功获得能稳定过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株.南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞内mTOR蛋白的表达水平.

南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响

目的:利用高表达抑癌基因maspin的人胃癌MGC-803细胞探讨南蛇藤提取物对其凋亡的影响.方法:以人胃癌MGC-803细胞为研究对象,不同质量浓度20,40,80,160,320 mg·L-1南蛇藤提取物作用于MGC-803细胞24,48 h后,MTT法检测南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞增殖的影响;以不同质量浓度COE组(0,20,40,80 mg·L-1)及32 mg·L-1的5-FU阳性对照处理24 h后,TUNEL法检测南蛇藤提取物对细胞凋亡的影响,Western blot检测对maspin,Bcl-2,Bcl-2L12及Bax蛋白表达的影响.结果:南蛇藤提取物(20,40,80,160,320 mg·L-1)能明显抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,呈现时间及浓度依赖性;与空白组比较,不同质量浓度的南蛇藤提取物(20,40,80 mg·L-1)作用24 h后,镜下显示,随着药物浓度升高,细胞数目减少,形态变圆,胞浆浓缩,出现凋亡小体,TUNEL结果表明南蛇藤提取物(20,40,80 mg·L-1)能促进细胞凋亡,Western blot结果显示南蛇藤提取物(20,40,80,160 mg·L-1)可呈浓度依赖性地增加抑癌基因maspin蛋白的表达,降低Bcl-2,Bcl-2L12的表达,均具有明显的统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:南蛇藤提取物能够抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与南蛇藤提取物促进抑癌基因maspin的表达以及抑制Bcl-2,Bcl-2L12的表达有关.

药用植物南蛇藤的应用及研究进展

本文通过查阅国内外药用植物南蛇藤的相关文献,总结和归纳了南蛇藤在医药、农业、工业等领域的应用及研究概况,为加快推进其系统研究和应用的步伐,实现资源的综合、高效和可持续利用提供参考.

南蛇藤提取物体内抗肿瘤作用的实验研究

目的:研究南蛇藤提取物体内抗肿瘤作用.方法:采用小鼠肉瘤(S180)、肝癌(Heps)移植性肿瘤模型,观察南蛇藤醋酸乙酯、正丁醇提取物的肿瘤抑制作用;并分别测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果:南蛇藤醋酸乙酯、正丁醇提取物在20mg·mL-1时即可明显抑制S180和Heps移植性肿瘤,与阴性对照组相比,有显著性差异(P＜0.01);并可提高小鼠血清SOD活性,降低MDA水平.结论:南蛇藤醋酸乙酯、正丁醇提取物具有抗小鼠肿瘤作用;并可增强抗氧化能力.

南蛇藤提取物对Hepal-6荷瘤小鼠肝癌移植瘤及血管生成的影响

目的 观察南蛇藤乙酸乙酯提取物对Hepal-6细胞荷瘤小鼠肝癌移植瘤及血管生成的影响.方法 将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、顺铂组及南蛇藤高、中、低剂量组,每组10只.除正常组外,其他各组于左前肢腋部皮下接种小鼠肝癌细胞株Hepal-6(1×106)0.1ml/只.接种后2周,顺铂组腹腔注射顺铂1mg/kg,南蛇藤低、中、高剂量组分别灌胃,药液浓度为10、20、40mg/kg,连续给药28d,末次给药24h后,检测肿瘤重量、移植瘤组织内肿瘤细胞的凋亡,检测移植瘤组织内血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 与模型组相比,南蛇藤提取物高、中、低剂量组平均瘤重均有所减少(P＜0.05或P＜0.01);南蛇藤中、高剂量组移植瘤内凋亡的肿瘤细胞较模型组明显增多,同时VEGF的表达较模型组明显减少.结论 一定浓度的南蛇藤乙酸乙酯提取物有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关.

南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究

目的：探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后，在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的HepG2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化；应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的“DNA梯带”。结果随着南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度的增加，HepG2细胞生长被抑制，凋亡细胞增多。同时，随着作用时间的延长，细胞凋亡的数量增多；30μg/ml的南蛇藤乙酸乙酯提取物作用细胞24 h后，可观察到明显的“DNA梯带”。随着南蛇藤乙酸乙酯提取物作用剂量的提高，DNA梯带更加明显。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可诱导HepG2细胞凋亡，具有量效关系和时间依存性。

南蛇藤乙酸乙酯提取物通过活化caspase依赖的线粒体通路诱导HepG2细胞凋亡

目的：通过检测南蛇藤乙酸乙酯提取物在诱导肝癌细胞HepG2凋亡过程中产生的凋亡蛋白表达量探讨其凋亡途径。方法应用Annexin V-FITC与碘化丙啶（promide iodine，PI）双染色法，通过流式细胞技术检测不同浓度（15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml和240μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物）干预HepG2细胞24小时后的细胞凋亡情况；应用蛋白质印迹法检测不同浓度（30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml）南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞24小时及60μg/ml和120μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞48小时后细胞中细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9（cleaved caspase-9）和胱冬蛋白酶3（caspase-3）的表达。结果当南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时，可诱导HepG2细胞出现细胞凋亡，且细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9和caspase-3的表达量增加；随南蛇藤提取物浓度的增加（30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml），蛋白表达亦增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可能是通过促使膜间蛋白细胞色素c表达和释放活化caspase-9与caspase-3而诱导HepG2细胞的凋亡。

南蛇藤中扁塑藤素对照品的制备及鉴定

目的 建立从南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb.) 根皮中制备扁塑藤素(pristimerin)对照品的方法.方法 采用溶剂提取、硅胶柱层析和重结晶等方法对南蛇藤根皮丙酮提取物进行分离纯化,通过MS、IR、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,通过薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对对照品进行纯度检测.结果 从南蛇藤根皮中分离纯化出扁塑藤素对照品,质量分数＞99.0%.结论 该方法制备的扁塑藤素对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为南蛇藤及其制剂质量控制用的化学对照品.

南蛇藤化学成分研究

目的 研究南蛇藤根皮中化学成分.方法 采用反复硅胶柱色谱及Sephadex LH-20柱色谱进行分离纯化,根据理化常数和光谱数据进行结构鉴定.结果 得到5个化合物,分别鉴定为南蛇藤素(1)、扁蒴藤素(2)、β-谷甾醇(3)、木栓酮(4)、29-咖啡酰氧基木栓酮(5).结论 29-咖啡酰氧基木栓酮(5)为新化合物.

南蛇藤茎的化学成分研究

目的 研究南蛇藤Celastrus orbiculatus茎的化学成分.方法 采用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇分别对南蛇藤茎的乙醇提取物进行萃取;对萃取物运用硅胶、凝胶等分离手段进行反复分离纯化,经理化常数测定,结合UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS方法鉴定结构.结果 分离得到10个化合物,分别鉴定为山海棠二萜内酯A(Ⅰ)、(5β,8α,9β,10α,16β)-16-hydroxykaurane-18-oic acid(Ⅱ)、水杨酸(Ⅲ)、2,4,6-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、异槲皮苷(Ⅴ)、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)、(+)-儿茶素(Ⅶ)、香草酸(Ⅷ)、β-胡萝卜苷(Ⅸ)、β-谷甾醇(Ⅹ).结论 以上化合物均为首次从该植物的藤茎中分离得到,化合物Ⅰ～Ⅲ为本属植物中首次分离得到,化合物Ⅳ～Ⅷ为本植物中首次分离得到.

南蛇藤总萜提取物对肝癌7721细胞侵袭转移能力的影响

目的 研究南蛇藤总萜提取物对肝癌7721细胞侵袭和黏附能力的影响.方法 南蛇藤总萜提取物作用肝癌7721细胞后,MTT法及细胞黏附法检测细胞毒作用及对黏附能力的影响;流式细胞仪检测基质金属蛋白酶-2(MMF-2)表达的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)分泌量的变化.结果 10、20、40、80μg/mL南蛇藤总萜提取物作用肝癌7721细胞后,其生长抑制率分别为(8.62±0.87)%、(13.42±1.07)%、(27.64±2.13)%、(47.16±3.08)%,呈剂量依赖性.南蛇藤总萜提取物可以抑制肝癌7721细胞与人脐静脉内皮细胞和基底膜成分Matrigel的侵袭、黏附能力,能明显下调MMP-2和VEGF的表达,且呈一定的量效关系.结论 南蛇藤总萜提取物可以抑制肝癌7721细胞增殖,降低细胞的侵袭、黏附能力,其机制可能与下凋VEGF和MMP-2的表达有关.

南蛇藤提取物靶向mTOR抑制人肝癌HepG2细胞侵袭与转移能力的研究

目的 探索南蛇藤提取物(COE)靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与转移的分子机制.方法 用siRNA技术,构建敲除mTOR基因的HepG2细胞模型,MTT法检测COE对HepG2/mTOR-细胞增殖能力的影响.划痕实验及Transwell实验检测药物对细胞侵袭转移能力的影响.Western blotting法分析用药后基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平变化.结果 成功构建敲除mTOR表达的HepG2/mTOR-细胞.COE明显抑制HepG2/mTOR-细胞的增殖(P＜0.05),并呈浓度依赖性.划痕实验结果显示COE降低了细胞迁移能力.Transwell实验结果表明,COE (80 mg/L)明显减少了穿膜细胞数目(P＜0.05).Western blotting结果显示,COE(80 mg/L)明显降低MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平(P＜0.05).结论 COE明显抑制HepG2/mTOR-细胞的增殖与侵袭转移,mTOR通路可能是其抑制肝癌的潜在作用靶点之一.

南蛇藤提取物通过调控基质金属蛋白酶组及其抑制因子抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的研究

目的 探讨南蛇藤提取物(COE)对人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和转移的影响及其分子机制.方法 MTT法检测COE对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测COE对SGC-7901细胞侵袭和转移能力的影响.Western blotting检测经COE作用后的SGC-7901细胞中金属基质蛋白酶(MMPs)MMP2、MMP9和金属基质蛋白酶抑制因子(TIMPs)TIMP1、TIMP3的蛋白水平.RT-PCR检测经COE作用后的SGC-7901细胞中MMP2、MMP9、TIMPl、TIMP3的mRNA表达情况.结果 Transwell实验显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞穿膜数明显减少并呈一定的浓度依赖性.Western blotting结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞,MMP2、MMP9蛋白的表达水平明显降低,而TIMP1、TIMP3蛋白表达水平明显上调.RT-PCR结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞中MMP2和MMP9的mRNA水平有轻微升高趋势,而TIMPl和TIMP3的mRNA水平明显大幅上调(P＜0.001).结论 COE能明显抑制人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP2、MMP9蛋白水平直接相关.而其作用的实现,很可能是通过直接上调TIMP1和TIMP3的mRNA转录水平从而提高TIMPs蛋白表达水平实现的.

026 从南蛇藤中分得具抗氧化活性的新化合物苯甲酰化黄烷-3-醇苷

340 用含石防风提取物和南蛇藤科植物提取物的抗肥胖剂防治糖尿病