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2006-2016年四川省急性弛缓性麻痹患者柯萨奇病毒A组4型基因特征分析
目的 了解2006-2016年四川省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)患者柯萨奇病毒A组4型(coxsackie virus A4,CV A4)的基因特征.方法 收集2006-2016年四川省各县区级疾病预防控制中心采集的AFP患者粪便标本,共3 816份.用人横纹肌肉瘤细胞和转人脊灰病毒受体的小鼠肺细胞进行病毒分离,采用微量中和试验法确定病毒型别,应用RT-PCR对分离到的CV A4进行VP1区全序列测定,并进行序列比对和构建进化树.结果 3 816份粪便标本分离到病毒383株,分离率为10.0％.其中,获得多的是CV A4,共17株,占所有分离株的4.4％.毒株来源患者的临床诊断分别为:肠道病毒感染8例,格林巴利综合征4例,心肌炎4例和脑炎1例.经测序鉴定15株CV A4为C基因型,2株为B基因型.17株CV A4之间核苷酸同源性为85.4％～98.3％,氨基酸同源性为94.7％～99.6％.结论 2006-2016年四川省AFP患者中分离到的CV A4以C基因型为主,同时也发现了罕见的B基因型.
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一起由柯萨奇病毒A2型引起的疱疹性咽峡炎暴发疫情调查分析
目的 对某幼儿园一起疱疹性咽峡炎暴发疫情的流行病学特征进行分析,为疫情防控提供科学依据.方法 收集病例基本情况、临床表现、流行病学特征等资料,采集病例咽拭子标本进行检测,采用描述流行病学研究方法对疫情的流行病学特征和临床特点进行分析.结果 2017年7月4至11日,北京市石景山区某幼儿园累计报告疱疹性咽峡炎或发热伴口腔疱疹、咽痛症状 病例20例,病例均为同一班级儿童,罹患率为90.9%(20/22).患儿临床表现以发热、咽痛、口腔疱疹为主,高体温38.5~41.0℃.采集6例患儿的咽拭子样本进行检测,检测结果均为柯萨奇病毒A2型阳性.结论 本次疱疹性咽峡炎暴发疫情由柯萨奇病毒A2型引起,该病毒传染性强,易引起托幼机构等集体单位疱疹性咽峡炎暴发流行.
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2008-2011年河南省手足口病患儿病原学监测结果
目的 了解2008-2011年河南省手足口病(HFMD)的病原体型别及分布特征.方法 于2008-2011年收集河南省各市级CDC门诊就诊和住院的30 486例HFMD患儿的粪便、肛拭子或咽拭子标本,共30 486份.采用RT-PCR、实时荧光RT-PCR法对河南省临床诊断HFMD患者标本进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)和其他肠道病毒核酸检测及病毒分离鉴定；扩增EV71分离株VP1区基因并测定序列,利用生物信息学软件分析序列,构建序列遗传进化树.结果 30 486例患者中实验室诊断17 876例,EV71、CA16和其他肠道病毒阳性率分别为62.70％(11209/17 876)、12.03％(2150/17 876)、25.27％(4517/17 876),差异有统计学意义(x2=157.17,P ＜0.05).男性EV71、CA16、其他肠道病毒阳性率分别为63.40％ (7370/11 624)、11.58％(1346/11 624)、25.02％ (2908/11 624)；女性分别为61.40％ (3839/6252)、12.86％ (804/6252)、25.74％(1609/6252),性别间差异有统计学意义(x2=4.06,P＜0.05).5岁以下儿童为HFMD的高危人群,占实验室诊断病例的97.67％(17 459/17 876)；其中1～3岁儿童患者多,占诊断病例的86.92％( 15 537/17 876).EV71构成比随季节而发生变化,4-6月份较高,5月份高达69.34％(2384/3438).实验室诊断6929例重症患者中的82.48％( 5715/6929)为EV71感染,1.76％( 122/6929)为CA16感染,15.76％ (1092/6929)为其他肠道病毒感染,EV71感染率明显高于CA16和其他肠道病毒(x2值分别为9259.17、6170.81,P值均＜0.05).重症患者中死亡117例,实验室诊断55例,诊断率为47.01％,以EV71感染为主(50例).遗传进化分析显示,EV71毒株VP1基因属于C基因型的C4亚型.结论 河南省HFMD主要病原是EV71和CA16；EV71病毒为优势流行株,属于C基因型的C4亚型.
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2013—2014年上海市污水中人类肠道病毒的基因型分布
目的 分析上海市闵行和嘉定区污水处理厂中人类肠道病毒(HEV)的时间分布特点及其基因分型.方法 于2013—2014年,选取闵行和嘉定区两所污水处理厂入水口作为采样点,每月24—28日采集污水标本1份,每份1 L,共48份.经阴离子膜吸附的方法浓缩,再用牛肉汤洗脱,取上清液并接种RD、HEp-2和L20B细胞进行病毒分离,共分离HEV 249株,其中非脊髓灰质炎病毒(NPEV)185株,脊髓灰质炎病毒(PV)64株(均为疫苗相关株).通过RT-PCR鉴定基因型,采用Bioedit 7.0.0对VP1核苷酸序列进行序列同源性分析,使用MEGA 5.0软件,通过邻位法构建系统发生树,分析优势株及病毒传播链.结果 185株NPEV中178株鉴定出基因型,包括:柯萨奇B组病毒(CVB)2、3、5基因型,埃可病毒(ECHO)1、3、6、7、11、13、19、20、24、25、30基因型,柯萨奇A组病毒(CVA)4基因型.CVB5和ECHO6是在NPEV分离株中比例较高的两个基因型,分别占33.5%(56株)和24.9%(43株).闵行区污水水样中HEV分离株主要集中在4—9月份,其中优势株ECHO6主要分布在2013下半年和2014上半年采集水样中,优势株CVB5主要在2013—2014年散在分布.嘉定的ECHO6和CVB5两个优势株的流行趋势与闵行区的基本一致.2013—2014年CVB5形成C6和C8基因亚型2个传播链,而与国外毒株有较大的差异;ECHO6形成C3、C6和D9基因亚型3个传播链,而D9基因亚型在上海属于优势基因亚型,在国内外有一定地域性的传播.结论 2013—2014年上海市污水中的分离到的PV均为疫苗株.HEV优势株为CVB5和ECHO6,其中ECHO6在2013下半年和2014上半年较为流行,CVB5在2014年下半年开始流行.CVB5和ECHO6存在多条传播链的共同流行现象.
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2010-2012年广州市柯萨奇病毒A4、A10型VP1基因特征分析
目的 检测广州市2010-2012年手足口病(HFMD)病例粪便样本中的肠道病毒,并对其中的柯萨奇病毒A4型(CoxA4)和柯萨奇病毒A10型(CoxA10) VP1基因核苷酸序列进行进化分析.方法 收集2010-2012年广州市HFMD疑似病例粪便样本5 484份,采用RT-PCR进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16型(CoxA16)、CoxA4、CoxA10和其他肠道病毒阳性检测,阳性样本共4 111份.对其中的CoxA4及CoxA10阳性样本分别进行巢式RT-PCR,扩增肠道病毒VP1基因片段,并对VP1基因片段进行测序,利用生物信息学分析序列,构建系统进化树,进行进化分析.结果 在4 111份肠道病毒阳性样本中,EV71、CoxA16、CoxA10、CoxA4的阳性率分别为35.1％(1443/4111)、30.7％(1261/4 111)、2.0％(82/4 111)、0.8％(31/4 111),不同肠道病毒阳性率差异有统计学意义(x2=148.34,P＜0.05).CoxA4样本以3岁组阳性率高,为1.3％ (7/534),CoxA10样本以0岁组阳性率高,为3.7％(34/914);CoxA4样本阳性率4月份达到高峰,为2.6％(12/460),CoxA10样本阳性率8月份达到高峰,为4.3％(12/278).VP1基因核苷酸遗传进化分析显示,CoxA4阳性样本VP1基因核苷酸序列可分为A、B2个亚型,Cox A10阳性样本VP1基因核苷酸序列可分为A、B、C3个亚型,广州市2010-2012年CoxA4和CoxA10阳性样本VP1基因核苷酸序列均属于A亚型.结论 广州市2010-2012年HFMD病例粪便样本中CoxA4和CoxA10阳性样本VP1基因核苷酸序列均属于A亚型.
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基于颜色判定的环介导逆转录等温扩增技术检测柯萨奇病毒A6型
目的 建立基于羟基萘酚蓝(hydroxy naphthol blue, HNB)颜色变化的简单、灵敏和快速的环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)检测方法,应用于柯萨奇病毒A6型(coxsackievirus A6,CV-A6)的检测.方法 针对CV-A6的VP1基因设计6条特异引物,在等温条件下(63℃)进行50 min扩增反应.扩增前在反应体系中加入HNB,通过观察颜色变化进行检测结果判定.使用多种肠道病毒进行特异性验证,使用梯度稀释的体外转录CV-A6全VP1基因RNA进行灵敏度分析,同时与实时荧光定量逆转录PCR(rRT-PCR)检测结果进行比较,并对92份手足口病患者临床标本进行检测.结果 本研究建立的RT-LAMP方法对除CV-A6外的23种肠道病毒的检测结果均为阴性,灵敏度为100拷贝/反应,与rRT-PCR方法相当.在对92份手足口病临床标本的检测中,检测结果与rRT-PCR方法相符,Kappa值为1,灵敏度和特异性均为100％.结论 本研究建立的针对CV-A6的LAMP检测方法,特异度高,灵敏度与rRT-PCR相当,有望应用于CV-A6感染的快速筛选,具有在基层医疗卫生机构和现场推广与应用的潜力.
关键词： 聚合酶链反应 柯萨奇病毒感染 环介导逆转录等温扩增 -
2013-2014年宁夏回族自治区柯萨奇病毒A10型分离株VP1区基因特征
目的 分析宁夏回族自治区(宁夏)手足口病病例中柯萨奇病毒A10型(CV-A10)分离株的基因特征.方法 于2013年1月-2014年12月,利用手足口病实验室网络监测系统,采集宁夏各市、县到当地人民医院就诊的手足口病病例标本,共采集2470份,其中粪便标本450份,咽拭子2 020份.使用人横纹肌肉瘤细胞进行病毒分离,获得的各种毒株用兼并引物进行VP1区基因扩增和序列测定.测序结果利用Blast进行病毒型别鉴定后,对鉴定为CV-A10的所有毒株进行同源性和系统进化分析.结果 共收集到非EV-A71和非CV-A16的肠道病毒标本450份,分离到CV-A10 36株,其中,2013年6株,2014年30株.36株毒株间的核苷酸和氨基酸同源性分别为90.6％～ 100.0％和90.2％～ 100.0％.与A、B、C、D各型别代表株的同源性比较发现,36株毒株与C型代表株的核苷酸和氨基酸同源性高,分别为90.2％～ 98.9％和95.7％～ 99.7％.系统进化分析显示,36株宁夏CV-A10分离株与C基因型代表株处于同一分支.结论 CV-A10是引起宁夏地区手足口病的常见病原体,本次分离到的CV-A10均属于C基因型,具有较宽的同源性范围.
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2014年上海市手足口病的病原谱及EV-A71和CV-A16分子流行病学特征分析
目的 研究2014年上海市手足口病的病原谱,及肠道病毒A组71型(EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(CV-A 16)变异变迁规律.方法 采集上海市2014年手足口病患者的咽拭子标本,进行核酸检测,对核酸检测结果为EV-A71、CV-A16以及其他EV阳性的临床标本进行病毒分离.对病毒分离结果阳性株进行全长VP1编码区基因的扩增以及核苷酸序列的测定和分析,然后与EV-A71、CV-A16各基因型和基因亚型的代表株构建亲缘性进化树.结果 2014年上海市辖区共对2017例HFMD临床标本进行了核酸检测,共有1644例检测结果为阳性.从中随机地选择出75份临床标本接种RD细胞和Vero细胞,共有60份出现EV特征性CPE,病毒分离的阳性率为82.67％,其中23株被鉴定为EV-A71、32株被鉴定为CV-A16、5株被鉴定为其他EV.23株EV-A71全部属于C4a进化分支;32株CV-A16中,有8株属于B1a进化分支,有24株属于B1b进化分支.结论 2014年上海市辖区手足口病呈现EV-A71与CV-A16共同流行的模式.C4a进化分支的EV-A71在上海市持续传播,而Bib进化分支成为上海市CV-A16的流行优势株.研究和掌握EV-A71和CV-A16等肠道病毒流行株的基因特征,发现其变异位点和变异趋势,对HFMD预防控制策略措施的制定将有重要的参考意义.
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反义寡聚核苷酸对CVB3蛋白基因表达的抑制作用及量效关系的研究
目的观察病毒基因组5′端非编码区内与翻译起始有关的位点和结构蛋白编码区的特异性反义核酸对病毒蛋白表达的影响及其量效关系.方法应用病毒致细胞病变作用保护实验、空斑形成实验和空斑形成减少实验、Western blot实验等方法,观察特定的反义核酸抑制病毒感染的效果.结果针对IRES位点、AUG区域和VP1区的3条反义核酸Scb561、Scb733、scb2785,对病毒感染有明显的抑制作用.病毒的感染量为0.01 MOI时,3种反义核酸在5μmol/L时对病毒的抑制率均在90%以上,当病毒增加到10 MOI时,抑制率仍在50%以上.Scb561和Scb733可明显的抑制病毒基因表达,当Scb561的浓度在0.625μmol/L时感染后的细胞内病毒蛋白量明显减少,增加到2.5μmol/L时病毒蛋白表达几乎看不到.另外Scb561、Scb733剂量与抗病毒效果呈现正相关关系.随着Scb561和Scb733浓度的增加,其抗病毒活性也随之增加直到抑制率达到90%以上,有效剂量在0.6～5μmol/L之间,且对细胞无毒性作用.非特异寡聚核苷酸对照实验显示,5μmol/L浓度时对病毒感染无明显抑制作用.结论针对核糖体进入位点和翻译起始位点的反义核酸,有明显的特异性抑制病毒基因表达的作用.为反义寡聚核苷酸成为一个潜在的治疗病毒感染的药物提供了重要的研究基础.
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临沂地区1426例手足口病流行病学及临床特征分析
目的 探讨山东省临沂地区手足口病的流行病学及临床特征,为制定本地区疾病防治措施提供依据.方法 制定手足口病观察项目表,采集2012年4-9月山东省临沂地区1426例手足口病患者的流行病学及临床特征,采用描述流行病学方法进行分析.结果 临沂地区手足口病发病高峰为5月,以3岁以下散居及幼托儿童为主,发病率男童多于女童,农村高于城镇.临床表现主要包括发热、皮疹等,重症患儿可发生多系统并发症.辅助检查可见白细胞及中性粒细胞比值增高等特征.EV71为重症病例的主要病原,占重症病例的77.21％.结论 山东省临沂地区手足口病流行具有明显季节性、人群性及地区性.针对本地区流行病特点,制定区域特异性防治措施至关重要.
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青岛地区2008-2011年柯萨奇病毒A组16型流行及VP1基因特征
目的 阐明2008-2011年青岛地区手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)相关柯萨奇A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及VP1基因特征.方法 首先采用荧光RT-PCR法对HFMD患者咽拭子标本进行总肠道病毒(enterovirus,EV)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)和人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)检测;对CA16阳性的标本进行病毒分离培养,选取阳性分离株的代表株进行VP1基因全长序列的扩增及基因序列测定,并与GenBank中的CA16代表株进行核苷酸和氨基酸的同源性和亲缘性分析.结果 2008-2011年青岛地区CA16在HFMD相关肠道病毒中所占比例分别为39.0％、10.6％、46.9％和2.0％.46株CA16病毒VP1基因核苷酸和氨基酸的差异性分别为11.0％和2.0％.所有VP1序列在进化树上可分为2个分支,分别属于B1a亚型和Bib亚型.2008-2011年间CA16分离株中B1a亚型与B1b亚型的数量分别为9/7、7/1、3/11和2/6.结论 2008-2011年CA16青岛地区每两年出现一次流行高峰,B1a和B1b两个亚型一直共循环流行,2009年与2010年分别以B1a亚型和B1b亚型为优势流行,至2011年CA16在HFMD的病原谱中检出率极低.
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CVB 2A蛋白酶抑制帽样结构依赖的蛋白翻译
目的 探讨CVB3的蛋白酶2A对真核细胞帽样蛋白翻译和内部核糖体进入位点(IRES)翻译机制的影响.方法 构建表达载体pcDNA3.1-2A,将此表达载体分别与pEGFP-N1、pGL3(F-luc)以及pIRES-GFP载体共转染细胞后,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,检测荧光素酶蛋白的表达.Western Blot检测CVB3病毒和pcDNA3.1-2A对真核生物翻译起始因子4GI(eIF4GI)及多聚A尾结合蛋白(PABP)的影响.结果 pcDNA3.1-2A可以减少帽样依赖的GFP和荧光素酶蛋白的表达,但可以促进IRES依赖的GFP表达.CVB3 2A基因质粒转染和CVB3感染后,均可发现细胞内eIF4G的切割现象;同时CVB3对PABP也有降解作用,而CVB32A基因转染对PABP无明显作用.结论 CVB3的蛋白酶2A抑制真核细胞帽样途径蛋白翻译,促进IRES途径的翻译.
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柯萨奇B组病毒VP1胞质表达系统的建立
目的利用T7RNA聚合酶介导的胞质表达系统增加目的抗原的表达量,提高基因疫苗的免疫效果.方法(1)构建带有T7启动子、脑心肌炎病毒(EMCV)5'非编码区和柯萨奇B组病毒衣壳蛋白VP1的质粒pT7 EMCVP1.将该质粒和编码T7 RNA酶的pAR 3132共转染HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞;(2)将上述质粒分别转化减毒鼠伤寒沙门菌SL7207,让带有不同质粒的两种载体细菌共感染小鼠腹腔巨噬细胞.结果(1)经共转染,在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞中,目的抗原VP1在胞质中的表达比单独转染真核表达质粒pcDNA3 VP1增加2～4倍;(2)两种质粒载体细菌感染小鼠巨噬细胞后,目的抗原VP1也能在细胞中较好表达.结论pT7 EMCVP1和pAR 3132能在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞胞质中表达,且表达量比单独转染真核表达质粒pcDNA3 VP1明显增加.
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2001年徐州地区暴发性病毒性脑膜炎病原的研究
目的确定引起2001年江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体.方法组织培养法从患者脑脊液分离病毒,标准血清中和试验鉴定分离毒株;中和试验检测双份血清中和抗体效价;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠道病毒特异性基因片段.结果22份脑脊液中分离出4株柯萨奇B5型、2株柯萨奇B3型、1株艾可7型肠道病毒,分离阳性率31.8%.RT-PCR检测脑脊液21份,肠道病毒阳性11份,阳性率52.4%.19例双份血清中11例中和效价呈4倍以上增长或转阳,阳性率57.9%.结论此次江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体是以柯萨奇B5为主要血清型的肠道病毒.
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海南省2010年柯萨奇病毒A组16型VP1区基因特征分析
目的 分析2010年引起海南省手足口病流行柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)的分子流行病学特征.方法 从海南省2010年手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)标本中分离到56株CA16毒株,用RT-PCR的方法对VP1编码区扩增及核苷酸序列的测定和整理分析,并与CA16各基因型和基因亚型的代表株序列构建亲缘关系进化树.结果 其中34株属于B基因型中的B1a基因亚型,22株属于B1b基因亚型.B1a基因亚型的毒株主要分布于海口市以及海南省西北部相邻的4个县市,B1b基因亚型的毒株主要分布于海口市以及海南省中部、西南部相邻的4个县市.结论 2010年海南省B1a和B1b基因亚型在人群中共循环,两个基因亚型呈现一定区域性分布的特点,提示在海南省CA16至少存在两条大的传播链.在2008年至2010年,海南省手足口病例中CA16感染的比例明显上升,分别为8.05％、5.35％、35.45％.
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2010年湖北省急性出血性结膜炎病原鉴定及基因进化分析
目的 鉴定引起2010年湖北省急性出血性结膜炎(acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)疫情的病原体,并对其进行基因进化分析.方法 采集20份门诊AHC患者眼结膜拭子,对其进行病毒分离,随后通过PCR方法分别检测阳性分离物中肠道病毒70型(human enterovirus D-70,EV-D70)和柯萨奇A24变异株(Coxsackievirus A24 variant,CV-A24v).对CV-A24v分离株进行VP1区和3C区全序列测定,分析其与全球流行CV-A24v的基因进化关系.结果 20份标本中有11份病毒分离阳性,PCR检测表明这11份病毒分离物为CV-A24v.基于3C区和VP1区构建的基因进化树表明湖北CV-A24v属于GenotypeⅣ基因型的Cluster 3(GⅣ-C3),而且在GⅣ-C3内湖北CV-A24v分属于A和B两个传播链.结论 本研究表明2010年至少有两个CV-A24v传播链在湖北同时流行.
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病毒性心肌损伤时总RNA表达及cTnI基因的扩增分析
目的 研究心肌型肌钙蛋白(cTnI)-mRNA在监测病毒性心肌损伤发生发展和预后中的价值.方法 于BALB/c小鼠腹腔接种1×108 TCID50柯萨奇病毒B3(CVB3)液诱发心肌损伤发生,分别在CVB3感染后第3、6、9、12、15、18和21天采集外周血后处死小鼠,留取鼠心脏作病理组织学检查,并以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析心肌及外周血中cTnI基因的表达状态.结果 CVB3感染后,鼠心肌组织及循环血中cTnI-mRNA均表达增加,且与心肌细胞肿胀、炎性细胞浸润、核固缩及碎裂、变性、坏死、钙化等组织学改变相关.cTnI-mRNA基因扩增,心肌组织全数阳性;外周血阳性率在对照组及感染后第3、6、9、12、15、18和21天分别为0、0、0、16.7%、40.0%、71.4%、83.3%和87.5%.结论 病毒性心肌损伤时cTnI-mRNA上调表达并释放入血,循环血cTnI-mRNA为监测心肌损伤发生发展及预后的灵敏基因标志物.
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2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究
目的 了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CA16特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71-IgM抗体检测.同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本.结果 240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72.50%(174/240),其中EV71感染率为57.92%(139/240),CoxA16感染率为9.17%(22/240),其他EV感染率为5.42%(13/240).240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV71-RNA阳性率为45.94%(102/222)、咽拭子EV71-RNA阳性率为25.68%(57/222),114份急性期血清中EV71-IgM抗体阳性率为86.84%(99/114).254份健康儿童咽拭子EV71-RNA阳性率为1.57%(4/254),未检出CoxA16-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2.71%(7/258).密接(医护人员)咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性.结论 徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起.3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体.成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71.疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率高(86.84%),其次为肛拭子EV71(45.94%)和咽拭子EV71(25.68%)的RNA检测阳性率.ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广.
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2009-2011年上海市手足口病病原学检测及其临床特点分析
目的 了解上海市手足口病不同病原体的感染现状以及所致的手足口病的临床特点之间的差异,为制定观察、治疗方案,做好手足口病防控工作提供参考.方法 采集2009年3月至2011年12月在本院传染科门诊诊断为手足口病的357例病例的咽拭子、疱疹液、粪便共551份标本进行病原学检测.用RT-PCR法对肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)、肠道病毒通用型(PE)进行鉴别.结果 357例手足口病患儿共采集到551份标本,检测病毒总阳性率为79.7％,2009年手足口病以CoxA16流行为主,2011年以EV71流行为主,三年病毒流行株差异有统计学意义(P =0.005);疱疹液病毒检出率高;EV71、CoxA16、PE病毒感染的手足口病患儿在发热、易惊的发生比例比较差异有统计学意义(P＜0.05);EV71感染的患儿外周血白细胞计数和中性粒细胞比例要高于CoxA16和PE感染的患儿,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上海市手足口病在不同时期病原体呈现交替流行;对不同病原体临床特征的分析比较有助于EV71感染的防控、早期治疗、重症病例的筛查.
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中药心康口服液对柯萨奇B3病毒感染小鼠促干扰素诱生和保护心肌的作用观察
目的研究中药心康口服液对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染小鼠体内促内源性干扰素(IFN)诱生,抗病毒保护心肌的作用效果,以探讨中药治疗的作用机制.方法用嗜心肌株CVB3感染小鼠腹腔,诱发心肌炎.感染前小鼠以30和12 g·kg-1·d-1的心康口服液灌胃2 d,病毒对照组以相同剂量的饮用水替代安慰用药;以外源性IFN 10 6 U·kg-1·d-1皮下注射作为阳性对照组.同时设正常小鼠对照,不作任何处理.持续用药至感染后5、10、和20 d,取全血分离血清,采用细胞病变法检测血清中IFN的活性;剖取心脏固定后制片,光镜下进行心肌病理形态学检察.结果心康口服液有促进感染小鼠体内诱生IFN的作用,感染期不同时间IFN诱生水平平均为29.2 U/0.1 ml,较病毒对照组平均12.6 U/0.1 ml水平有较大提高,且心肌病变程度与IFN诱生水平密切相关.接受外源性IFN组的小鼠,心肌病变程度明显比病毒对照组轻,但血清IFN水平低于心康口服液各组.结论中药心康口服液能使感染CVB3产生心肌炎的小鼠体内促进IFN诱生,从而发挥抗病毒、保护心肌的作用效果;这将有助于了解心康口服液临床治疗病毒性心肌炎的作用机制.
