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TA克隆的快速鉴定
TA克隆技术原理是Taq酶参与的PCR反应中,产物双链核酸中的3′端各多连接一个脱氧腺嘌呤核苷酸(A),与商业开发的5′端各多一个脱氧胸腺嘧啶核苷酸(T)的质粒载体,在DNA连接酶作用下,按碱基配对形成环状的完整质粒,转化细菌,质粒扩增形成克隆.由于存在载体自连的现象,TA克隆的鉴定十分必要,本文利用快速质粒提取和载体中现有的成对限制性内切酶位点,使TA克隆技术更方便实用.
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静脉灌注氟尿嘧啶致3级静脉炎的药学监护
氟尿嘧啶为抗代谢药类抗肿瘤药物,进入人体内后先转变为5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸,能够抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶,阻断脱氧尿嘧啶核苷酸转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸,从而抑制DNA的生物合成,起抗肿瘤的作用。静脉灌注为氟尿嘧啶化疗常用的给药方式,由于该药物的细胞毒性,对局部组织皮肤具有较强的刺激性,易形成静脉炎。本文针对1例因静脉灌注氟尿嘧啶而致3级静脉炎的患者,探索氟尿嘧啶致静脉炎患者的药学监护模式。
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HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质
目的 HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质方法的建立.方法 色谱柱为Agilent Zorbax SAX(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.80g加水800 mL,用磷酸调节pH值至3.3,加水稀释至1000 mL),流速0.5 mL.min-1,检测波长258nm.结果 脱氧核苷酸钠中脱氧胞嘧啶核苷酸(d-CMP)、脱氧腺嘌呤核苷酸(d-AMP)、脱氧胸腺嘧啶核苷酸(d-TMP)、脱氧鸟嘌呤核苷酸(d-GMP)4种单核苷酸的进样量分别在0.0176~3.3827μg、0.0196~ 3.7580μg、0.0148~2.8477μg和0.0180~3.4528μg内与峰面积线性关系良好(r均为1.000); d-CMP、d-AMP、d-TMP、d-GMP的平均回收率分别为96.73%,97.51%,97.98%,98.39%;RSD分别为0.17%,0.39%,1.32%,0.32%(n=9);精密度、重复性良好.结论 采用本方法主峰与杂质峰的分离度好,结果准确可靠,灵敏度高,为本品质量标准的修订和提高提供了基础.
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氟尿嘧啶的临床新用途
氟尿嘧啶(5-Fu)为嘧啶类抗代谢药,对多种动物肿瘤都有抑制作用,而且与常用抗肿瘤药无交叉耐药现象,是一种广泛应用于临床的抗肿瘤药.该药在体内先转变为5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸,后者抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶,阻断脱氧尿嘧啶核苷酸转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸,从而抑制DNA的生物合成,此外,还能掺入RNA,通过阻止尿嘧啶和乳清酸掺入RNA而达到抑制RNA合成的作用.