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桑寄生水煎液对小鼠胚胎肢芽生长发育及Tbx2和BMP-2基因表达影响
目的 探讨桑寄生水煎液对小鼠胚胎肢芽生长发育及T-框蛋白2(Tbx2)和骨形成蛋白2(BMP-2)mRNA和蛋白表达的影响,评价桑寄生的胚胎发育毒性.方法 利用超高高效液相色谱仪鉴定药材桑寄生,常规法制成水提液;取E13(embryos on day 13)前肢芽随机分为低、中、高剂量组和空白对照组,分别加入0.5、1和2 mg/ml不同浓度的桑寄生水煎液和双蒸水悬浮培养,72 h后收获肢芽,测量肢芽长度后,阿利新蓝染色用Neubert评分系统进行评分以评价肢芽软骨的发育情况;采用实时荧光定量PCR和免疫组化法分别检测肢芽中Tbx2和BMP-2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 ①经UPLC分析,槲皮苷峰面积比为38.45％,可鉴定所用药材为桑寄生.②肢芽长度测量:低、中、高剂量组和空白对照组的长度分别为1091.18±94.32、1107.07±80.29、1118.76±97.49和1080±89.54 μm,各剂量组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).③Neuben评分:低、中、高剂量组和空白对照组总评分分别为223.24±28.32、208.24±28.32、213.30±30.59和201.7±28.94.高剂量组评分高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),低和中剂量组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).④实时荧光定量PCR和免疫组化结果显示:各剂量桑寄生水煎液均上调了Tbx2和BMP-2 mRNA和蛋白的表达水平,其中高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而低和中剂量与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 各剂量桑寄生水煎液对小鼠胚胎肢芽的生长发育未体现出胚胎发育毒性,高剂量可诱导Tbx2和BMP-2 mRNA和蛋白表达促进肢芽软骨的发育.
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膀胱尿路上皮癌中TBX2与MDM2蛋白的表达及临床意义
目的 研究膀胱尿路上皮癌中TBX2、MDM2蛋白的表达与膀胱尿路上皮癌患者各临床病理因素之间的关系.方法 采用免疫组织化学EnvisionTM二步法检测90例膀胱尿路上皮癌和20例正常膀胱黏膜组织中TBX2、MDM2的表达情况.结果 在正常膀胱黏膜组织中TBX2、MDM2蛋白的表达阳性率为0,在膀胱尿路上皮癌中,TBX2的阳性率为65.6％(59/90),随着TBX2表达程度的增高,癌组织的分化程度越低、临床分期越晚、更易出现复发(P＜0.01).MDM2的阳性率为31.1％(28/90),随着癌组织分化程度的降低,MDM2的阳性率升高(P＜0.01);出现复发的膀胱尿路上皮癌中MDM2的阳性率为57.5％ (23/40),无复发的膀胱尿路上皮癌中,MDM2的阳性率仅为10.0％(5/50),两者差异有统计学意义(P＜0.01).pTNM分期Ta～T1期MDM2阳性率为0(0/52),T2～T3期MDM2阳性率为73.7％(28/38),MDM2阳性患者pTNM分期更晚(P＜0.01).癌组织中TBX2的表达与MDM2呈正相关(r=0.487,P＜ 0.05).结论 TBX2及MDM2在膀胱尿路上皮癌中的高表达与肿瘤的侵袭及复发有关.
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恶性外周神经鞘膜瘤中TBX2基因突变及相关蛋白表达的临床意义
目的：检测恶性外周神经鞘膜瘤基因组异常并探讨TBX2、CHK2和p53在恶性外周神经鞘膜瘤中的表达及其临床意义。方法：收集天津医科大学肿瘤医院骨与软组织肿瘤科1991年1月至2011年12月手术切除并经病理证实的恶性外周神经鞘膜瘤组织标本63例。从中选取新鲜且DNA质量合格的肿瘤样本12例，采用第二代测序（next-generation sequencing，NGS）方法，检测人恶性外周神经鞘膜瘤组织样本基因组异常情况。应用免疫组织化学方法检测63例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中TBX2、CHK2和p53的表达情况。结果：12例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中，有1例TBX2基因突变。63例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中，TBX2、CHK2和p53的高表达率分别为60.3%（38/63）、47.6%（30/63）及30.2%（19/63）。TBX2的高表达与AJCC分期、复发和转移有显著相关性（P<0.05）；TBX2的表达与CHK2的表达呈正相关（r=0.254，P=0.045），CHK2的表达与p53的表达呈正相关（r=0.343，P=0.006）。高表达TBX2、CHK2和p53的无病生存时间及总生存时间均显著低于低表达组（P<0.05），且TBX2、CHK2和p53均为恶性外周神经鞘膜瘤的独立预后因素。结论：TBX2及其相关蛋白的表达可能在恶性外周神经鞘膜瘤发生发展过程中起重要作用，检测其表达有望为MPNST预后提供理论依据。
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复合荧光RT-PCR技术检测TBX2和p53在甲状腺癌表达及临床诊断意义
目的 探讨TBX2、p53在正常甲状腺组织、甲状腺癌组织中的表达及临床诊断意义.方法 采用复合荧光RT-PCR技术检测45例甲状腺癌组织和10例正常甲状腺组织中TBX2、p53基因mRNA的表达.结果 不同病理学类型甲状腺癌TBX2基因mRNA表达峰高与B-actin基因mRNA表达峰高之比在(1.283 2±0.354 5)～(2.37±0.488 9),较正常甲状腺明显高(P＜0.01)；不同分化程度甲状腺癌TBX2基因、β-actin基因mRNA表达平均峰高比值较正常甲状腺明显高(P＜0.01).不同病理学类型甲状腺癌p53基因mRNA表达峰高与β-actin基因mRNA表达峰高之比在(1.196 4±0.326 7)～(2.838 6±0.467 9),较正常甲状腺明显高(P＜0.01)；不同分化程度甲状腺癌p53基因、β-actin基因mRNA表达平均峰高比值较正常甲状腺明显高(P＜0.01).结论 联合检测TBX2和基因mRNA表达可为甲状腺癌的早期诊断、预后判断提供有价值的指标.
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Tbx2基因调控胚胎心脏发育的研究进展
胚胎心脏的正常发育有赖于各相关基因的精确表达,涉及复杂的基因调控模式,其中任一环节出现偏差都会导致心脏畸形的发生.不同物种的Tbx2基因表达终都局限在非腔室心肌区域的房室管,这提示Tbx2基因在心脏发育中时空表达的一致性和进化过程的高度保守性.Tbx2作为T-box转录因子家族的成员之一,主要参与心脏流出道和房室管的发生,通过调节下游目的基因的转录水平,从而引起一系列的调节通路变化.目前越来越多的研究表明,Tbx2表达水平或调控异常导致了不同模式动物心脏畸形的发生.临床报道也证实TBX2所在片段的微缺失/重复及其非编码区遗传变异与人类先天性心脏病的发生密切相关.该文综述了Tbx2在胚胎心脏发育中的功能、可能的调控机制及与先天性心脏病的关系.
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TBX2在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义
目的:检测TBX2在甲状腺癌组织中的表达,探讨其临床意义.方法:应用RT-PCR方法检测TBX2在9例正常甲状腺、13例甲状腺腺瘤及67例甲状腺癌组织(其中甲状腺乳头状癌28例,甲状腺滤泡癌23例,甲状腺髓样癌14例,甲状腺未分化癌2例)中的表达.结果:TBX2mRNA在甲状腺癌组织中的阳性表达(阳性表达56例,占83.6%)明显高于其在正常甲状腺(阳性表达3例,占33.3%)及甲状腺腺瘤组织(阳性表达6例,占46.2%)中的阳性表达(P<0.05),差异有显著性;TBX2mRNA在甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡癌及甲状腺髓样癌(甲状腺未分化癌例数太少,无统计学意义)组织中的阳性表达强度(相对系数)分别为1.776±0.382、2.627±0.532、2.937±0.481;P<0.05,差异具有显著性.TBX2mRNA在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌组织的分化程度及组织学分型有关.结论:TBX2可能是甲状腺癌发生、发展的促进因子,并有可能成为甲状腺癌临床诊断及预后评估的又一重要参考指标.
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转录抑制基因TBX2在甲状腺癌中的表达及其临床病理意义
目的 检测甲状腺癌组织中TBX2的表达,探讨其表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学技术,检测正常甲状腺、甲状腺腺瘤及甲状腺癌组织中TBX2的表达.结果 TBX2在甲状腺癌组织中的阳性表达明显高于其在正常甲状腺及甲状腺腺瘤组织中的阳性表达(P＜0.05)；TBX2在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌的组织学分型及分化程度有关(P＜0.05).结论 TBX2在甲状腺癌的发生、发展中起重要作用,检测甲状腺癌中TBX2的表达,可为临床甲状腺癌的诊断、治疗方案的选择及预后评估提供参考指标,同时也为甲状腺癌的治疗提供新靶点.
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TBX2基因在结肠癌患者癌组织中的表达及其临床意义
目的 探究TBX2基因在结肠癌患者癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 60例结肠癌患者癌组织和40例正常结肠黏膜组织,采用ELISA法和免疫组织化学法检测TBX2基因的表达,分析其表达与结肠癌的临床分期、病理类型及有无淋巴结转移的关系.结果 ELISA法检测TBX2蛋白在正常黏膜组和结肠癌组的含量分别为25.00％和85.00％,组间差异有统计学意义(P＜0.01);免疫组织化学法检测TBX2基因在正常黏膜组和结肠癌组的灰度值分别为135.29±3.17和95.62±2.51,组间差异有统计学意义(P＜0.01);TBX2基因阳性表达率与临床分期、病理类型及有无淋巴结转移均有明显相关性(P＜0.01).结论 TBX2基因表达上调与结肠癌发生发展存在相关性.
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子宫内膜样腺癌中TBX2、PAX9的表达及其相关性
目的 探讨TBX2、PAX9在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达及临床病理学意义.方法 采用组织芯片技术和免疫组化检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生内膜、30例复杂伴不典型性增生内膜、82例EA组织中TBX2、PAX9蛋白的表达.结果 TBX2蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜增殖症(P均＜0.01),TBX2过表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01),与淋巴结转移无相关性(P＞0.05);PAX9蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜、子宫内膜单纯性增生(P均＜0.01),而和复杂伴不典型性增生之间没有统计学意义(P＞0.05),在复杂伴不典型增生中表达明显高于正常子宫内膜和单纯性增生内膜(P均＜0.01),PAX9阳性表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),但与淋巴结转移无相关性(P＞0.05).TBX2与PAX9蛋白呈正相关(rs=0.427,P＜0.01).结论 TBX2和PAX9均在子宫内膜样腺癌中发生、发展中发挥重要作用,联合检测其表达可为子宫内膜样腺癌的早期诊断、预后判断提供有价值的指标.
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乳腺浸润性导管癌中TBX2和MDM2的表达及临床意义
目的 探讨TBX2和MDM2蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测TBX2、MDM2蛋白在90例乳腺浸润性导管癌和30例正常乳腺组织中表达.结果 90例乳腺癌浸润性导管癌中TBX2和MDM2蛋白的阳性率分别为75.6%和81.1%,明显高于正常乳腺组织中的阳性率16.7%、23.3%,差异均有统计学意义(P<0.01).TBX2过表达与病理分级、临床分期、腋窝淋巴结转移密切相关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05).MDM2过表达与病理分级、腋窝淋巴结转移密切相关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期无关(P>0.05).TBX2和MDM2蛋白在乳腺癌表达呈正相关(rs=0.240,P<0.05).结论 TBX2、MDM2蛋白在乳腺癌组织中的异常表达,可能在乳腺癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测两者可为监测乳腺癌的预后及治疗提供理论依据.
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TBX2和MDM2在子宫内膜样腺癌中的表达及相关性
目的 探究T-box转录因子TBX2与鼠双微体基因MDM2在正常增生期内膜、各型增生内膜和子宫内膜样腺癌中的表达及相关性.方法 组织芯片技术结合免疫组化SP法检测92例子宫内膜样腺癌、30例复杂伴不典型性增生内膜、30例单纯性增生内膜及30例正常增生期内膜中TBX2与MDM2蛋白表达.结果 TBX2阳性表达率在子宫内膜样腺癌(76.1％,70/92)中显著高于正常增生期内膜及单纯性增生内膜(30.0％,9/30;36.7％,11/30),亦显著高于复杂伴不典型增生内膜(43.3％,13/30),差异均具有统计学意义(P＜0.01),TBX2表达过高与病理学分级、肌层浸润及临床分期均有关(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),与淋巴结转移不具相关性(P＞0.05);MDM2蛋白在子宫内膜样腺癌及复杂伴不典型增生中阳性率分别为81.5％(75/92)和43.3％(13/30),显著高于正常子宫内膜及单纯性增生内膜(10.0％,3/30;20.0％,6/30),差异均有统计学意义(P＜0.01),MDM2阳性表达与病理学分级、肌层浸润无关,与临床分期及淋巴结转移也不具相关性(P均＞0.05).TBX2与MDM2蛋白表达呈正向相关(ra=0.346,P＜0.01).结论 TBX2和MDM2蛋白在子宫内膜样腺癌中异常高表达,并在其发生及恶化进展中扮演一定角色,为子宫内膜样腺癌的靶点探寻及预后评判提供了新的方向.
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Wnt/β-catenin信号通路可能调节胰腺癌细胞TBX2基因表达
目的 探讨Wnt/β-catenin信号途径是否参与胰腺癌细胞中TBX2基因的表达调节.方法 运用免疫细胞化学SP法,检测胰腺癌细胞株SW1990中是否有Tbx2和β-catenin蛋白表达;以不同浓度的糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的特异性抑制剂氯化锂作用于SW1990,应用RT-PCR检测TBX2基因及Wnt/β-catenin信号通路的已知靶基因c-myc的mRNA表达变化;Western 印迹法检测β-catenin、Tbx2蛋白的表达变化.结果 在SW1990细胞中有Tbx2和β-catenin蛋白表达;氯化锂作用于SW1990细胞后,TBX2、c-myc、β-catenin表达水平均升高(P＜0.05);Tbx2蛋白随着β-catenin表达水平的升高而升高(r=0.583,P＜0.05).结论 Wnt/β-catenin信号通路可能参与了胰腺癌细胞中TBX2基因表达的调节.
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cFLIP 、TBX2在颅内外鳞癌中的表达及意义
目的：探讨颅内外鳞癌中cFLIP及TBX2的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测了57例颅内外鳞癌、38例癌旁不典型增生及30例正常组织中cFLIP、TBX2蛋白表达情况。结果颅内外鳞癌组织中cFLIP及TBX2的阳性表达率明显高于不典型组织及正常组织。cFLIP及 TBX2的表达水平与患者性别、部位之间的差异无统计学意义（P＞0.05），而肿瘤TNM分期及淋巴结转移的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 cFLIPL及TBX2在颅内外鳞癌中的表达水平较高，两者可能在鳞癌发生、发展中发挥重要作用。
