首页 > 文献资料
-
免疫分析法在食品检测中的应用
食品安全面问题及检测
随着人们物质生活水平的提高,我国的食品安全问题越来越突出,从食品原料的生产到食品加工过程均有食品安全的事件发生。现代养殖业日益趋向于规模化、集约化,使用抗生素、维生素、激素及金属微量元素等,已成为保障畜牧业发展必不可少的一环。总体来说,引发食品安全问题的因素有三个,其一为自然因素,主要是畜牧养殖中动物在正常自然饲养中感染的一些对人类也有健康危害的疾病。目前在较短的时间周期常有局部禽流感爆发,由于病疫的可传染性,对人们身体、心理均可造成伤害。其二为环境因素,污染物主要由大气、水质、土壤中带来,目前城市河道普遍存在着多达几十种的抗生素残留和其他药物,这些残留的药物也会随着生活用水进入人们的身体,虽然含量仅为ppt级别,但长期被人体摄入,其隐患也不少。随着工业的发展,一些有毒有害的化学成分,还或多或少地分散于大气、土壤中,通过动植物的富集而被人体摄入。其三为人为因素,主要是在食品原料、加工过程中,食品企业为了追求更高的经济效益,非法使用或不合理使用一些农兽药、饲料添加剂等其他有毒有害物质。 -
梓醇人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
基于单克隆抗体的免疫分析方法具有高特异性、高灵敏性等特点,在中药的质量控制和动物体内微量成分的检测等方面均具有重要的意义,该方法建立的前提条件就是成功制备中药活性小分子化合物的人工抗原.该研究采用高碘酸钠氧化法,首次制备了梓醇的人工抗原,通过基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)和分子排阻色潽法鉴定梓醇与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功,用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗梓醇抗体效价在1∶8000以上,成功制备梓醇的人工抗原,为下一步单克隆抗体的制备和相关免疫方法的建立奠定基础.
关键词: 梓醇 人工抗原 免疫分析法 基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法 分子排阻色潽法 -
心肌损伤标志物检测方法进展
心肌损伤标志物包括心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)等.在心肌损伤相关疾病的诊断上,cTnI特异性强,Mb和CK-MB早期敏感性高,三者联合检测可提高诊断的特异性、敏感性,临床广泛应用于心肌梗死和心绞痛的诊断、危险性估计和预后判断,心肌梗死后临床溶栓治疗效果判定,诊断各种心肌损伤和判断心肌缺血损伤面积,判断左心室功能以及某些治疗药物的l临床疗效观察等.
-
雅培全自动化学发光免疫分析仪i2000SR故障维修一例
0 引言全自动化学发光免疫分析仪是医院检验科常用设备之一,大连大学附属中山医院使用的是美国雅培公司i2000SR全自动化学发光免疫分析仪,可同时检测25个项目,每小时能完成200个测试,具有较高的工作效率及准确性和灵敏度.化学发光免疫分析(chemilumineseent immunoassay,CLIA)是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物直接标志抗体或抗原的数量,进而对抗体或抗原进行特定量检测的一类免疫分析法.检测技术中检测小分子抗原使用竞争法,检测大分子抗原用夹心法.i2000SR全自动免疫发光分析仪中肝炎检测项目优势明显,在肝炎定量检测方面属于全球金标准测试,其中的HbsAg和HbsAb为全定量检测,HbeAg、HbeAb、HBcAb为半定量检测.i2000SR全自动免疫发光分析仪对甲状腺的检测项目中促甲状腺素(thyroid Stimulating Hormone,TSH)具有优灵敏度.
-
颅脑伤患者血清IL-6、IL-8和NSE变化与预后关系
白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)是血清中能测出的少数细胞因子,它不仅参与各种损伤局部炎性反应,而且在复杂的细胞因子网络中处于中心地位[1].神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)是烯醇酶的γγ同工酶,主要存在于大脑神经元和神经内分泌细胞内并参与糖酵解的特异性酶.血清NSE含量变化是检测脑中神经元损伤的客观指标[2-3].本实验应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定血清IL-6和NSE水平,探讨炎性介质IL-6和IL-8及NSE与脑神经元损伤的相关性及临床意义.
-
基于口腔黏膜分泌物的快速检测HIV1/2型抗体方法建立及其临床应用研究
感染个体进行 HIV 抗体的检测对 HIV 的诊断和控制至关重要,传统的血液检测法对医院的环境设施及相关医务人员水平的要求较高,也存在交叉感染的危险。研究表明, HIV 感染者的唾液或口腔黏膜渗出液中几乎不含 HIV 病毒,但含有抗 HIV 抗体,并且检出率高。这一发现为艾滋病检测提供了一个全新的发展方向[1-2]。在以口腔分泌物为样本的 HIV 抗体诊断试剂研发领域,虽然国内外曾有报道,但国内至今可成熟应用到临床检测的试剂非常少见。本研究通过工艺摸索及优化,建立了一种基于口腔黏膜渗出液样本检测 HIV1/2型抗体的诊断方法(免疫分析法),为临床提供了适用于 HIV 抗体检测的安全、无创、快速诊断试剂。研制的检测试剂可广泛用于高危人群的流行病学调查和监测,对推进社区医疗和家庭 POCT(point of care testing)在传染病诊断领域的发展具有重要意义。
-
D-二聚体增高对交叉配血试验结果的影响
输血治疗是其他治疗无法代替的挽救患者生命的特殊治疗.输血前必须进行交叉配血试验,相合的血液才能输给患者.交叉配血试验必须严格按照试验的方法学进行,确保相合的血液输给患者,防止输血不良反应的发生.但在交叉配血过程中,往往会发生次侧凝集的现象,如果不予以快速、正确的分析处理,将严重影响输血的安全、及时性.微柱凝胶交叉配血是临床输血科中常采用的一种新型免疫分析法,能够有效检出IgM类的抗体以及IgG类的不完全抗体,可有效抑制溶血性输血反应的发生.D-二聚体极易吸附在红细胞表面,是造成微柱凝胶交叉配血次侧试验阳性结果和受血者红细胞直接抗人球蛋白"Coombs"次侧试验阳性的重要原因.
-
测定胰岛素原、胰岛素及C肽的价值
纪宝华教授:本刊编委随着生物化学和免疫学技术的发展以及分子生物学技术的应用,特异性检测血中整分子胰岛素原(proinsulin,PI)及其中间裂解产物(总称胰岛素原样分子,proinsulin-like-molecules,PLMs)、胰岛素(insulin, INS)及C肽水平的新一代免疫分析法业已问世,因此可更确切阐明其生理和病理意义.1 血中PLMs、INS及C肽的来源[1]在正常情况下,PI的基因在胰岛β细胞核中转录为前胰岛素原的mRNA,在胞浆中翻译成前胰岛素原,后转移至粗面内质网中;数分钟后,经微粒体蛋白酶的作用形成PI,转移并贮存于高尔基复合体中,形成不成熟的分泌颗粒.PI在不成熟的分泌颗粒中经PI转换酶2(PC2)和3(PC3)的作用分别形成65,66断裂PI、32,33断裂PI,再又经羧肽酶H(CPH)裂解形成不饱和的脱64,65PI和脱31,32PI,后又分别经 PC3和CPH、PC2和CPH形成等克分子的INS和C肽,INS贮存于成熟分泌颗粒的中部而C肽则贮存在其外围.当β细胞受到释放INS信息刺激时,成熟分泌颗粒中的INS和C肽即分泌到细胞外并进入门静脉.进入门静脉中的INS有40~60%,而C肽有10~15%经肝脏首过代谢而失活,其余部分则进入外周循环发挥其生理作用.但即使在生理情况下,PC2、PC3及CPH的作用也不十分完全,因此有少量PI、PLMs也可直接分泌到血中.因此,外周血中既有INS和C肽,又存在PLMs.
-
复方雌二醇片在健康绝经妇女体内的生物等效性
目的 评价国产与进口复方雌二醇(雌激素)在健康绝经妇女的生物等效性.方法 20名健康受试者单剂量口服复方雌二醇(雌二醇2 mg、炔诺酮1 mg)国产制剂与进口制剂后,用化学发光免疫分析法、放射免疫分析法和高效液相色譜-质譜联用技术测定雌二醇、雌酮和醋酸炔诺酮的体内血药浓度;计算药代动力学参数,评价2制剂的生物等效性.结果 口服复方雌二醇受试制剂(国产)与参比制剂(进口)后的主要药代动力学参数,①雌二醇:Cmax分别为(102.92±26.68)、(93.52±18.91)pg·mL-1;tmax分别为(1.05±0.78)、(2.32±1.54)h;t1/2分别为(18.97±11.94)、(26.74±16.83)h;AUC0-t分别为(1.62 ± 7.38)、(1.62±7.35)ng·h·mL-1;AUC0-∞分别为(1.98 ± 8.21)、(2.19±9.55)ng·h·mL-1,相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为(99.84±17.78)%、(94.41±24.98)%.②雌酮:Cmax分别为(313.72±93.89)、(313.05±103.76)Pg·mL-1;tmax分别为(3.93±1.32)、(4.16±1.21)h;t1/2分别为(11.86±3.76)、(12.04±5.10)h;AUC0-t分别为(4.48±1.75)、(4.62±1.73)ng·h·mL-1;AUC0-∞分别为(4.67±1.77)、(4.88±1.86)Pg·h·mL-1,相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为(97.47±15.18)%、(96.71±15.11)%.③炔诺酮:Cmax分别为(12.73±6.53)、(12.62±6.32)ng·mL-1;tmax分别为(1.39±0.69)、(1.15±0.57)h;t1/2分别为(7.04±2.66)、(7.98±2.66)h;AUC0-t分别为(46.92±28.16)、(49.28±31.46)ng·h·mL-1;AUC0-∞分别为(52.99±32.96)、(56.81±37.07)ng·h·mL-1,相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为(99.74±16.19)%、(97.15±16.04)%.表明健康志愿者口服单剂量复方雌二醇片受试及参比制剂后,体内药代动力学行为没有显著差异.结论 2种制剂具有生物等效性.
-
免疫分析法在中药化学成分分析中的应用
免疫分析法因其特异性强、灵敏性高和检测速度快的特点,在各个分析领域都有所应用,目前逐步成为中药化学成分分析的技术手段之一.本文根据不同的免疫分析技术,分别阐述了放射免疫分析法、酶联免疫分析法、免疫亲和色谱、免疫胶体金测定技术、荧光免疫分析法、化学发光免疫分析法、毛细管电泳免疫分析、免疫芯片、免疫传感器等在中药化学成分分析中的应用,并对免疫分析法的应用前景予以展望.
-
生物检材中美沙酮及其代谢产物的检测
美沙酮维持治疗自20世纪60年代初首先在美国开展以来,在降低因吸毒引发的公共卫生(HIV/AIDS和乙、丙肝的感染、传播)和社会问题等方面取得了显著的效果.我国政府为降低因吸毒引发的HIV/AIDS及其相关危害,于2003年2月启动了海洛因成瘾者社区药物(美沙酮)维持治疗试点工作.几年来,我国的美沙酮维持治疗工作在覆盖地区、接受治疗人群数量和降低毒品相关危害等方面取得了重要的进展和成效[1].美沙酮及其代谢产物的检测,对美沙酮维持治疗者特别是同时接受抗HIV、抗结核治疗的病人具有重要的意义.检测美沙酮及其代谢产物常用的生物检材包括:头发、血液、尿液、汗液、唾液等.常用的检测方法包括:免疫分析法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、气相-质谱联用法、液相-质谱联用法等.随着萃取、分离、检测技术的不断发展,各种检测方法用于生物检材中美沙酮及其代谢产物的检测也取得了较大的突破.
-
酶联放大免疫测试方法在毒品检测中的应用
目前通用的毒品检验方法主要有化学显色法、仪器分析法和免疫分析法等,笔者仅就这几种方法作一探讨.
-
生物制品药动学研究中的药物分析方法
目的介绍生物制品药动学研究中的药物分析方法.方法以国内外的研究为依据,对生物制品药动学研究中的药物分析方法进行了综述.结果与结论针对生物制品的特殊性建立与之适应的、灵敏特异的药动学药物分析方法具有明显的现实意义.在条件许可的情况下建议几种方法并用,互相补充,互相印证,以得到比较可靠的结果.
-
高强度聚焦超声治疗胰腺癌的临床观察
目的 探讨高强聚焦超声(HIFU)热疗对胰腺癌患者的疗效,安全性及肿瘤标志物CA19-9和cE^的影响.方法 观察41例自愿接受HIFU治疗的胰腺癌患者的临床受益反应(CBR),用化学免疫分析法检测CA19-9和CEA浓度,进行疗效评价.结果 41例胰腺癌患者中3例完全缓解(CR),15例部分缓解(PR).11例稳定(SD),27例临床受益,OBR率达65.8%.治疗后22例(54%)患者疼痛症状明显缓解;14例(34%)肿瘤明显缩小;18例(44%)无变化,9例(22%)有不同程度的增大;23例CA19-9、CEA的浓度下降;中位生存期6.5个月;所有患者均未见明显不良反应.结论 高强度聚焦超声热疗能控制肿瘤进展、改善生活质量、对肿瘤标志物CA19-9、CEA有明显下调作用.无明显不良反应,作为一种新的安全有效的局部治疗方法可用于胰腺癌的治疗.
-
试纸法在重金属检测中的应用浅谈
经济发展和社会进步开启了全新的时代,而环境问题的严重性也日益显现出来,重金属污染问题越来越严重,涉及到医药、食品、环境等多领域的重金属污染问题受到了人们的广泛关注.近年来,关于重金属检测的技术手段在不断进步和完善,其中试纸法是一种简单、快速、方便的检测方法,可简化检测步骤,节约检测成本,从而实现重金属的快速检测.本文主要对重金属检测的几种常用方法和试纸法在重金属检测中的应用价值进行综述.
-
马钱苷人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
目的 首次合成并鉴定马钱苷(loganin)人工抗原,为进一步制备马钱苷单克隆抗体,建立相关免疫分析方法奠定基础.方法 采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原(loganin-BSA)和包被原(loganin-OVA);应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功;通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性.结果 经MALDI-TOF-MS检测,马钱苷与BSA偶联成功.竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合,血清抗体效价在1:40 000.结论 成功合成了马钱苷人工抗原,为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础.
-
中药活性小分子人工抗原合成的技术要点
中药免疫分析技术适用于中药复杂组分的研究,基于此技术的研究思路与方法越来越引起研究者的重视.免疫分析的前提是抗体制备,中药活性小分子人工抗原的合成是中药活性成分抗体制备的关键步骤.从载体的选择、交联方法的选择、纯化及鉴定方法、合成条件的优化及影响免疫原性的因素等方面,对中药活性小分子人工抗原合成的技术要点进行综述,从而为中药免疫分析技术的建立和发展奠定基础.
-
化学发光免疫分析法测定血清糖链抗原19-9的临床应用探讨(附193例分析)
糖链抗源19-9(carbohydrate antigen,CA 19-9)目前主要作为胰腺癌的血清肿瘤标志物应用于临床[1].为探讨其应用价值,我院从1998年1月~2000年7月应用化学发光免疫分析法对138例患者进行了全面系统的检测,现报道如下.
-
007 胰岛素抵抗与肾脏病变对2型糖尿病患者体内同型半胱氨酸水平的影响
研究了不同程度的2型糖尿病肾病患者的胰岛素抵抗(IR)和肾脏病变对血浆总同型半胱氨酸(tHcy)的影响. 对象与方法 75名2型糖尿病患者(男46名,女29名)选自Osaka大学医院糖尿病中心,平均年龄(56.0±9.9)岁,均无糖尿病酮症酸中毒病史.连续3 d留24 h尿,取平均值,测定微量白蛋白排泄率(UAE),依据UAE和血肌酐水平分为4组,Ⅰ期:39人,UAE<30 mg/24 h;Ⅱ期:17人,30 mg/24 h<UAE<300 mg/24 h;Ⅲ期:9人,UAE>300 mg/24 h;Ⅳ期:10人,肌酐>176 μmol/L.肌酐清除率以Cockcroft-Gault公式计算,59人(Ⅰ期39人,Ⅱ期17人,Ⅲ期3人)肌酐清除率>60 ml/min,16人(Ⅲ期6人,Ⅳ期10人)肌酐清除率<60 ml/min.这些患者中,37人用磺脲类,2人用葡萄糖苷酶抑制剂,4人上述两药联合,20人用胰岛素,12人饮食控制治疗.54名对照者(男28名,女26名)为体检健康成人,平均年龄(53.8±10.5)岁.所有受试者采空腹静脉血,酶转换免疫分析法测定tHcy,然后进行高胰岛素血症-正常血糖钳夹试验,利用人工胰腺模型以1.25 mU(kg·min)-1速度持续输注胰岛素,每5 min测血糖一次,使血糖保持在5 mmol/L左右,胰岛素水平为(647±191)pmol/L,此时计算胰岛素敏感指数.同时测定血糖、糖化血红蛋白A1c(HbA1c)、胰岛素、血VitB12、叶酸、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及血、尿肌酐.
-
静脉PCA期间吗啡的药代动力学
吗啡是阿片类药物μ-受体激动剂的典型代表,其血药浓度的测定采用双抗体放疗免疫分析法(RIA)法的优点是灵敏度高,取样少,操作简便[1],而目前PCA期间吗啡的吸收、分布、稳态情况的临床研究未见报道。随着吗啡静脉病人自控镇痛(PCIA)的广泛应用,其血药浓度及其安全性问题受到关注。本文旨在探讨国人吗啡PCIA期间的药代动力学特点,分析LCP镇痛模式的血药浓度变化规律,以期为临床安全应用吗啡镇痛提供依据。