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神经末梢突触囊泡相关的调节蛋白
神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个受到精细调控的过程,涉及多种蛋白质间的网络状相互作用,包括蛋白复合物的组装和构象调节、突触囊泡的定向性运输、囊泡入坞、膜融合、递质释放以及囊泡膜和蛋白的重摄取等,这一大循环里的每一步都离不开各种相关蛋白的相互作用.该文围绕这些调控蛋白的分子结构、生理功能以及蛋白间的相互作用作一综述.
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细胞凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在溃疡性结肠炎表达的研究
溃疡性结肠炎的特征性表现在于结肠上皮表浅广泛的缺失和固有层的炎症改变.关于溃疡性结肠炎上皮层破坏的机制目前还不清楚,认为可能与上皮细胞坏死和凋亡均有关[1].
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角质细胞生长因子对囊肿衬里上皮细胞细胞周期及其调控蛋白表达的影响
目的:研究角质细胞生长因子(KGF)对常染色体显性多囊肾病(ADPKD)囊肿衬里上皮细胞细胞周期及其调控蛋白的影响,以初步探讨ADPKD囊肿发生、发展的细胞学机制.方法:应用MTT法检测KGF对ADPKD囊肿衬里上皮细胞的促增殖作用;应用流式细胞仪观察KGF对ADPKD囊肿衬里上皮细胞细胞周期的影响;应用免疫组化结合病理图文检测KGF对囊肿衬里上皮细胞细胞周期调控蛋白Cyclin D1、P21wafl表达影响.结果:①KGF能明显促进ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖,影响细胞周期,使G0~G1期细胞减少,S期细胞增多;②体外培养的ADPKD囊肿衬里上皮细胞存在CyclinD1和P21wafl蛋白,经图文分析,50 ng/mlKGF刺激后,Cyclin D1蛋白表达(0.41±0.04)较对照组(0.30±0.01)明显增强,P21wafl的表达(0.32±0.02)较对照组(0.37±0.03)明显减弱(P<.01).结论:CyclinD1和P21wafl是ADPKD囊肿衬里上皮细胞细胞周期G1期进展的调控蛋白;KGF可能通过刺激Cyclin D1蛋白的表达,抑制P21wafl蛋白的产生,从而进一步促进细胞通过G1~S调控点,致使ADPKD囊肿衬里上皮细胞明显增殖.
关键词: 角质细胞生长因子 常染色体显性多囊肾病 细胞周期 调控蛋白 -
尖锐湿疣患者淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达
尖锐湿疣 (CA)是由人乳头瘤病毒 (HPV)感染引起的一种性病, CA的发生、发展和转归与患者机体免疫功能尤其是细胞免疫功能关系密切 [1],而患者机体免疫功能与淋巴细胞凋亡状况关系密切 [2]。我们用流式细胞计数法检测了 CA患者外周血淋巴细胞 (PBLC)凋亡调控蛋白 (Fas、 Fas- L、 Bcl- 2)的表达,旨在从凋亡角度探讨 CA的免疫发病机制。
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炎症与创伤性脑损伤后继发脑损伤
创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后的继发脑损伤出现在原发伤后的数小时到数天,是各种细胞、生化介质构成级联网络反应的结果,继而导致了颅内压升高、脑缺血、脑水肿等.TBI后的炎症反应是TBI后病理进程的重要组成部分,是导致TBI后继发脑损伤的主导因素,近年的研究已逐步认识了TBI后炎症反应中所参与的细胞、涉及的细胞因子、可能存在的上游调控蛋白,并提出TBI后炎症反应与神经元凋亡、脑组织水肿及血脑屏障破坏有密切关系.本文对TBI后炎症反应的相关研究作一简述,主要包括TBI后炎症反应的发生,TBI后炎症反应与脑水肿、神经元凋亡的关系,以及主要参与TBI后炎症反应的细胞因子及相关调控蛋白质.
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β-arrestin和NF-KB与细胞凋亡之间的关系
β-arrestin是一类在提纯β肾上腺素受体激酶(βARK)的过程中发现的一种重要的支架蛋白和信号调控蛋白,在G 蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptor,GPCR)信号转导中发挥着重要作用.新近研究发现,β-arrestin是一种肿瘤抑制因子,为内源性核因子-κB (nuclear factor kappaB,NF-κB)的调控蛋白.本文主要探讨β-arrestin和NF-κB之间相互调控的作用和相关分子机制以及它们对细胞生长、凋亡的调控作用.
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分化抑制因子-1和Akt与鼻咽癌关系的研究进展
鼻咽癌是耳鼻咽喉科发病率高的恶性肿瘤.据统计,我国的鼻咽癌患者约占全世界的80%[1],尤以广东、广西高发,俗称"广东瘤".鼻咽癌的发生、发展是多因素、多阶段的过程.分化抑制因子1(inhibitor of differentiation or DNA binding 1,Idl)为转录因子负调控蛋白.已有研究[2]表明Idl在多种恶性肿瘤的发生、发展中有重要作用.
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自噬和线粒体自噬在细胞损伤控制中的作用
自噬和线粒体自噬是细胞内非常重要的生理进程,负责分解细胞内容物、保持能量供给并使细胞免受有害物质积聚所导致的损伤。本文对自噬机制进行总结,并对自噬所调控蛋白的降解过程进行了回顾,着重对自噬及线粒体自噬在细胞应激反应中的作用进行探讨。
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NO-Fluvastain对体外培养的人LECs增生作用的实验研究
目的 研究NO-Fluvastain对体外培养的人晶状体上皮细胞(LECs)增生的影响及其作用机制.方法 用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞增生;流式细胞仪测定细胞周期;RT-PCR测定细胞周期调控蛋白CyclinE mRNA和P21waf1 mRNA表达.结果MTI 检测显示NO-Fluvastain对体外人LECs的增生具有显著抑制作用,并且表现出时间和剂量依赖关系.流式细胞仪检测发现:NO-Fluvastain可阻滞人LECs由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.RT-PCR检测发现:NO-Fluvastain可抑制CyclinE mRNA表达,促进P21waft.mRNA表达.与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 NO-Fluvastain通过抑制CyclinE mRNA表达,促进P21waf1 mRNA表达,使人LECs阻滞于G0/G1期,从而抑制人LECs增生.
关键词: 后发性白内障 NO-Fluvastain 人晶状体上皮细胞 细胞周期 调控蛋白 -
转人CD59基因的猪胚胎成纤维细胞的建立
补体介导的超急性排斥反应(HAR)是异种移植成功应用的主要障碍.CD59是一种补体活化调控蛋白,具有良好的抗超急性排斥反应作用.通过对猪胚胎成纤维细胞进行基因修饰,体细胞克隆,有希望克服上述问题.
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新辅助化疗对结肠癌细胞凋亡及相关调控蛋白表达的影响
目的 观察新辅助化疗(NACT)对结肠癌细胞凋亡及相关调控蛋白表达的影响.方法 收集结肠癌患者114例,采用原位末端标记法和免疫组织化学方法分别观察经NACT的FOLFOX4方案治疗前后结肠癌细胞凋亡和癌组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、环氧合酶-2(COX-2)、p53蛋白的表达,并判定NACT的近期疗效.结果 NACT化疗后结肠癌细胞发生典型凋亡形态学变化,细胞凋亡系数(3.87%比1.17%)和凋亡阻性率(59.65%比23.68%)显著高于化疗前.经NACT治疗后患者结肠癌细胞bcl-2(54.39%比70.15%)、COX-2(28.07%比50.00%)和p53(45.61%比70.05%)的阳性表达率与化疗前比较均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而bax阳性表达率(22.81%比50.88%)显著增强,差异有统计学意义(P<0.01).同时bcl-2/bax比值(3.08比1.07)也显著降低.NACT治疗组的总有效率(39.47%)显著高于对照组(1.75%),治疗后患者无严重药物不良反应.结论 结肠癌患者经NACT化疗后癌组织中bcl-2、COX-2和p53蛋白表达明显降低,而bax蛋白的表达显著增加,促进癌细胞凋亡,且NACT的近期疗效显著.
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MG132对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞Smad泛素化调节因子2和Smad7的影响
近来发现在肾纤维化模型(UUO)中Smad泛素化调节因子2(Smad ubiquitin regulatory factor 2,Smurf2)表达增强,Smad7蛋白表达明显降低,Smuff2能通过泛素蛋白酶体途径增加Smad7降解[1].Smad7是TGF-β信号转导途径中的主要抑制性调控蛋白,因此阻断Smurf2的表达,有可能会起到抗纤维化的作用.MG132是一种有效、可逆的醛基肽类特异性蛋白酶体抑制剂,能阻断泛素蛋白酶体通路.我们主要研究MG132对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)表达Smurf3、Smad7及Ⅳ型胶原的影响,为肾纤维化的防治寻找新的靶点.
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圆斑蝰蛇毒的研究和凝血因子的发现、凝血瀑布学说的建立
1血友病病人的呼救血液凝血过程是一个复杂的生化过程,涉及12个凝血因子和多个调控蛋白.
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牛磺酸通过调控细胞周期蛋白抑制肝星状细胞增殖
目的进一步研究牛磺酸对肝星状细胞(HSC)增殖抑制作用的机制.方法用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖;流式细胞仪测定细胞周期;免疫细胞化学和实时荧光定量PCR测定细胞周期调控蛋白Cyclin D1和P21waf1表达.结果牛磺酸对HSC增殖具有抑制作用,在浓度为5、10、20、30、40、50 mmol/L作用48 h时的抑制率分别为6.7%、14.4%、23.3%、32.2%、36.7%和45.6%,t值为2.939~6.369,P<0.05~0.01.流式细胞仪检测发现牛磺酸可阻滞HSC由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.G0/G1期、S期细胞,牛磺酸浓度为40 mmol/L时,分别为(68.2±1.4)%和(26.2±1.3)%,与对照组分别为(56.2±1.7)%和(38.5±0.8)%,差异有统计学意义,t≥5.422,P<0.01.牛磺酸可抑制Cyclin D1表达、促进P21 waf1表达,用免疫细胞化学染色结合数码图像分析系统软件分析发现牛磺酸浓度在40 mmol/L时HSC的Cyclin D1表达的平均吸光度为0.13±0.02,P21waf1为0.19±0.02,对照组分别为0.18±0.02和0.14±0.01,差异有统计学意义,t=6.689和t=6.528,P<0.01.实时荧光定量PCR检测也发现经40 mmol/L牛磺酸处理的HSC的Cyclin D1 mRNA表达量(拷贝数与10 6磷酸甘油醛脱氢酶比值)降低为5776.7±3345.0,对照组为18 400.6±1374.8,而P21waf1 mRNA表达量(拷贝/10 6磷酸甘油醛脱氢酶)增多为44 866.7±3910.7,对照组为16 933.3±960.9.结论牛磺酸通过抑制Cyclin D1表达、促进P21waf1表达,使HSC阻滞于G0/G1期,而抑制HSC增殖.
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转化生长因子β的丝裂原激活蛋白激酶通路与组织器官纤维化
转化生长因子β(TGF-β)是一类具有多种生物学活性的细胞因子,其超家族是一类结构相关的多肽类调控蛋白,由多种细胞产生.TGF-β在参与组织的修复过程中对其它细胞因子起协同或抑制作用,刺激细胞外基质(ECM)的产生,促进ECM的沉积,抑制纤维蛋白溶酶原活化因子的产生,增加纤维蛋白酶原活化因子抑制因子(PAI-1)的生成.对大多数间充质细胞及几乎所有的上皮细胞、T细胞、B细胞及内皮细胞,TGF-β是一种效力很强的生长促进剂.在正常组织内仅有微量的TGF-β,而纤维化组织中的含量明显升高.已有资料证实:TGF-β在组织器官的纤维化中发挥了十分重要的被公认为纤维化形成与发展的启动枢纽,是关键性细胞因子[1].
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INK4a/ARF基因调控造血干细胞和白血病干细胞衰老的研究进展
人染色体9p21基因位点INK4a/ARF编码两种细胞同期相关调控蛋白,即p16INK4a和p14ARF蛋白,它们在细胞衰老周期调控中发挥重要的作用.本文就这两种蛋白的衰老诱导途径及其影响因素,以及其对造血干细胞和白血病干细胞功能的影响进行综述.
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东方拟无枝酸菌中ECO-0501生物合成基因簇的筛选及其相关调控基因的初步分析
ECO-0501是从东方拟无枝酸菌代谢物中分离到的一种新型线性多烯类化合物,其不但具有良好的抗菌活性,且体内毒性较低,目前处于临床前的开发.本文通过对东方拟无枝酸菌的菌落原位杂交,筛选到4个粘粒克隆NL5B,NL9-3-1,NL3-1C,NL3-3A,可以覆盖整个ECO-0501生物合成簇,并对其中的基因ORF4进行了生物信息学分析,推测其为ECO-0501合成途径中的正调控基因.并通过该基因的过表达,成功地将ECO-0501的产量提高了6倍,为下一步ECO-0501的开发及其调控机制的研究打下基础.
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增殖性细胞抗原的分子生物学研究新进展
增殖性细胞抗原是DNA复制的关键成分之一,他与DNA的损伤修复、细胞周期调控,染色体甲基化、染色体重塑等过程有密切关系,与不同的调控蛋白相结合,增殖性细胞抗原可发挥多种不同的作用.本文对增殖性细胞抗原的分子生物学特点、功能及其在细胞中的工作方法做一综述.
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糖尿病调控大鼠心肌细胞肌浆网钙离子通道表达的研究
目的 评价糖尿病对大鼠心室肌细胞肌浆网钙离子转运通道及其调控蛋白表达的影响.方法 以注射链脲佐菌素的方法制备l型糖尿病大鼠模型;动物分成4组(n=6):对照组、糖尿病4周组、糖尿病8周组和糖尿病12周组.分别以RT-PCR和Western blot的方法测定心室肌细胞肌浆网上主要钙转运通道及其调控蛋白的mRNA和蛋白的表达变化.结果 糖尿病程第4周,心肌细胞肌浆网上主要钙转运通道(雷诺定受体和Serca2ATPase)表达开始显著下降,并持续下降至病程12周.同时,调控蛋白FKBP12.6表达第8周显著下降、phospholamban表达同步上升.结论:随着病程的进展,糖尿病大鼠心肌细胞肌浆网钙离子转运通道及其调控蛋白的表达呈逐步和显著的下降趋势.