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S.neurona肉孢子虫29kDa主要表面抗原分子的特性
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日本血吸虫硫氧还蛋白编码基因的克隆表达及其免疫原性研究
尽管近50年来我国在血吸虫病防治取得了令人瞩目的成就,日本血吸虫病仍然是我国一个重要的公共卫生问题.目前控制血吸虫病的措施仍以灭螺和吡喹酮化疗为主.治愈病人的再感染情况严重、血吸虫抗药虫株的出现及家畜和野生哺乳动物作为重要传染源是我国血吸虫病防治工作当前面临的主要问题.因此积极开展血吸虫病疫苗研究,寻找更加持续有效的防治手段十分重要.迄今,发现了一些疫苗候选抗原,如谷胱甘肽S转移酶(GST)、磷酸丙糖异构酶(TPI)、副肌琼蛋白、肌球蛋白、膜相关蛋白和脂肪酸结合蛋白(FABP)等,但根据动物免疫保护实验结果,这些候选抗原分子都只能诱导出部分保护力,继续寻找新的能诱导较好保护性的疫苗候选分子仍是目前血吸虫病疫苗研究的工作重点之一.
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日本血吸虫三个新跨膜蛋白基因的克隆和分析
目的克隆并分析日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)新的抗原基因,为血吸虫病防治提供有效的疫苗候选分子.方法以旋毛虫感染鼠血清为探针,筛选Sj成虫cDNA文库,对获得的阳性克隆进行PCR鉴定及测序.通过互联网对测序获得的核苷酸序列进行同源性分析,并预测新基因编码蛋白质的结构与功能.结果共筛选出9个阳性克隆,其插入SjcDNA片段大小在0.6~2.1 kb之间.测序分析获5个新基因,其中Sj-Tsl,Sj-Ts3及Sj-Ts5(登录号为AY005816,AF299080,AY024352)分别编码83,83,233个氨基酸组成的跨膜蛋白.Sj-Tsl蛋白含1个潜在的跨膜区,2个蛋白激酶C磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和1个N-肉豆蔻酸化位点.Sj-Ts3蛋白含两个跨膜区,1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点.Sj-Ts5蛋白为具有5个跨膜区的跨膜蛋白,含1个N-糖基化位点、2个cAMP与cGMP依赖的蛋白激酶磷酸化位点、4个蛋白激酶C磷酸化位点、1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和1个N-肉豆蔻酸化位点.结论 Sj-Tsl、Sj-Ts3与Sj-Ts5基因编码的蛋白质均为受磷酸化激活控制的跨膜蛋白,可能为潜在的血吸虫病疫苗候选分子.
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CD4+T细胞与血吸虫感染的保护性免疫
血吸虫病仍是一个严重的世界性公共卫生问题,据WHO近估计,全世界仍有6亿人口处于感染血吸虫的危险环境中,其中约2亿人受感染,每年死于血吸虫病者超过10万人,造成巨大的社会经济损失.虽然全球范围内,血吸虫病防治已持续数十年,全面控制血吸虫病传播的前景仍不容乐观.血吸虫病疫苗的研制与发展已被置于防治研究的重要地位.近年来,许多研究均集中于抗血吸虫感染的获得性免疫应答机制和寻找可能诱导保护免疫的相关寄生虫抗原分子等基础研究.
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重组血吸虫诊断抗原研究进展
免疫学方法为诊断血吸虫病的重要手段,目前,用于血吸虫病免疫诊断的常用的抗原是成虫抗原和虫卵抗原.成虫抗原和虫卵抗原成分复杂,针对两种抗原的血清抗体在宿主体内长期存在,不能区别早期感染和既往感染,不能考核疗效,并且这两种抗原不易大量获得.现代生物技术的发展为解决上述问题提供了机遇.基因克隆技术能够帮助寻找刺激宿主产生短程抗体的某些抗原表位,通过检测短程抗体来评价治疗效果.同时依靠基因重组技术可以生产出相应的重组抗原分子,为现场推广应用所需大量的抗原材料提供了保证.本文主要就国内外研制基因重组抗原及其在血吸虫病诊断中的应用加以综述.
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恶性疟原虫FCCl/HN株环子蛋白基因在BCG中的表达
卡介苗(BCG)由于其广泛应用的安全性和免疫佐剂作用,因而近年来以BCG为载体的重组疫苗研究日益受到重视[1].环子孢子蛋白(circurmporozoim protein,CSP)分子量为40~60kDa.是一种覆盖于子孢子表面的蛋白,是目前已鉴定的子孢子特异性抗原分子,也是疟疾疫苗候选抗原之一[2].本研究将克隆有CSP基因的重组大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG/CSP通过电穿孔转化法导人BCG,观察其在BCG中的表达情况.
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肾病患者β2-m检测的临床应用
β2微球蛋白(β2-m)是人体内有核细胞合成的一种由100个氨基酸残基组成的分子量仅1180的小蛋白,与免疫球蛋白IgM的功能十分相似,是人白细胞抗原分子的一种β轻链.本文用放射免疫法(RIA)对132例各类肾病患者进行了血清、尿液β2-m检测,旨在为肾病早期诊断及预后判断提供诊断依据,现将结果报告如下.
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标记免疫分析对恶性肿瘤诊断的临床表达及其进展
近年来在免疫治疗领域中提出了有关细胞抗原的理论,认为肿瘤细胞携带具有抗原特异性的细胞表面分子,或这些抗原分子并非肿瘤细胞特有,它们可能为正常的细胞表面分子发生了某些变异,在肿瘤细胞中具有较高的含量及细胞分布的差异.为此,国外LIA(Labelling Immunoassay, LIA or Radioimmunoassay and alternative immunoassays)主要集中于肿瘤诊断.而且,血液、胸腹水和尿液的肿瘤标志物的临床应用分为三类:第一类证明有价值的为AFP、HCG、LDH、CEA、TSGF、PSA(fpsA)和CA125,它们具有肿瘤筛选、诊断、预后、监护治疗反应和检出复发的作用;第二类或许有价值的为CA153、CA199、NSE;第三类可能有价值的为MSA(乳房血清抗原),TAG(肿瘤相关糖蛋白)、MCA(类粘蛋白癌相关抗原)和CA50.现将其临床表达及其进展综述如下.
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血吸虫性别差异表达相关基因及其功能的研究
血吸虫具有不同于其他吸虫的特殊生殖发育特点及致病机制,从血吸虫的生殖发育人手,加强对血吸虫抗合抱、抗生殖、抗卵胚及其他抗病免疫途径的研究,将有助于深入了解血吸虫的生殖调控机制、寻找新的疫苗候选抗原分子或药物靶标、开拓防治血吸虫病的新思路.而对血吸虫性别差异表达的研究正是在此基础上展开的.
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B细胞表位预测的研究进展
表位,又称抗原决定簇,是指免疫应答中被特异的效应分子或T、B淋巴细胞识别的抗原分子的特定结构位点.B细胞表位是指抗原中可被B细胞抗原受体(BCR)或抗体特异性识别并相互结合的线性片段或空间构象型结构.B细胞表位的预测对免疫原性多肽和新型疫苗分子的设计都有很大的帮助,并有利于诊断试剂的开发以及临床疾病的诊断.
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免疫佐剂的研究进展
目前正在开发的新型疫苗有合成肽疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗、转基因植物口服疫苗等,这些新型疫苗具有良好的抗原特异性和低毒性.但由于其抗原分子小、纯化程度高,疫苗的免疫原性较差.因此需要安全有效的佐剂来增强疫苗的效力.近年来佐剂的发展迅猛,多种新型佐剂层出不穷,人们对佐剂的作用机理亦有更深入的认识.本文对近年来佐剂的研究进展作一综述.
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金黄色葡萄球菌肠毒素A对B16恶性黑素瘤细胞的杀伤作用
金黄色葡萄球菌肠毒素A(Staphvlococcal enterotoxin A,SEA)系金黄色葡萄球菌分泌的一种肠毒素,是具有高效激活T淋巴细胞能力的蛋白质抗原分子.为了能系统地了解SEA对肿瘤细胞的杀伤作用,我们通过体外试验检测了SEA活化的小鼠脾脏淋巴细胞对B16恶性黑素瘤(malignant melanoma,MM)细胞的杀伤作用.
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人类白细胞抗原-B27检测中实时荧光PCR法的应用价值
人类白细胞抗原(humanleucocyteantigen,HLA)是指一组位于人体细胞膜表面能够识别“自己”或者“非己”的抗原分子,是由位于人类6号染色体短臂上的一组主要组织相容性复合体基因编码[1],其中人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)是HLA-B基因座位上的一个重要等位基因。以往,检测HLA-B27主要有实时荧光PCR法、酶联免疫法、流式细胞术及微量细胞毒试验法。本文对实时荧光PCR法与流式细胞术在HLA-B27检测中的应用作一比较,旨在探讨实时荧光PCR法的可靠性。
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单克隆抗体导向治疗血液肿瘤的研究进展
自从1975年Kohler和Milstein发明了杂交瘤单克隆抗体(单抗)技术以来,已有数百类人类血细胞分化抗原单抗研究成功.截至2000年6月第7届国际人类白细胞分化抗原命名大会(HLDA7),已有247个分化簇(clusterof differentiation)被正式命名.根据抗原分子在血细胞上的不同表达及功能,可分为T细胞、B细胞、髓细胞、NK细胞、树突状细胞、非谱系、血小板、内皮细胞、黏附分子、细胞因子及受体、细胞外酶、红细胞、造血干/祖细胞、碳水化合物/凝集素、动物同源分子共15组.白细胞分化抗原单抗的制作成功,为血液恶性肿瘤的导向治疗提供了工具.
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幽门螺杆菌融合蛋白UreB-Omp11在大肠杆菌中的表达与纯化
近年来,研究者发现了多种Hp的有效保护性抗原成分,UreB、Omp、Hsp、NAP等,其中尿素酶、外膜蛋白等是人们研究的焦点.但它们单独免疫动物时,获得的免疫保护效果均不理想,为克服单一抗原分子诱导的免疫保护水平偏低的问题,本研究用重叠延伸PCR法将H.pylori郑州分离株MELHP27的ureB与omp11两个基因进行融合,中间加入弹性蛋白连接肽编码序列为接头,并通过设计合适的酶切位点,将融合蛋白插入原核表达载体pMAL-c2X中,使其融合表达,为Hp多价抗原基因工程疫苗的研究奠定基础.
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人类白细胞抗原B27的检测及临床应用
人类白细胞抗原B27是一种Ⅰ类组织相容性复合体(MHC)基因,即人类白细胞抗原基因,其表达产物即HLA-B27抗原分子[1].HLA-B27是第一个被发现的人类某一疾病与一种MHC分子相关的抗原.1973年由Brewerton[2]报道了HLA-B27与强直性脊柱炎(AS)的密切相关性.HLA-B27是脊柱关节疾病病闲及发病机制的关键.为了探讨HLA-B27抗原与强直性脊柱炎的相关性,现将我院5年间HLA-B27检测结果报告如下.
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肿瘤相关抗原CA72-4与胃癌
CA72-4或TAG-72是一种高分子(相对分子量>10 6u)的粘蛋白,其抗原分子二糖NueAc(2,6)GalNAc是从乳腺癌肝转移细胞作为免疫原制作的单克隆抗体B72.3和从结肠癌培养细胞的7AG-72抗原作为免疫原制作的单克隆抗体CC49识别的糖链抗原.
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分子寄生虫学简介
1 分子寄生虫学的定义 寄生虫学是一门古老、经典的以形态学研究为主的学科,随着分子生物学技术的广泛应用,分子寄生虫学( Molecular Parasitology)已成为现代寄生虫学重要的学科分支之一和学科研究的前沿领域.所谓分子寄生虫学即寄生虫学中的分子生物学( Molecular Biology in Parasitology).在这里,分子生物学是作为工具使用的,其目的是从分子和基因水平认识寄生现象,探讨寄生虫入侵宿主的分子机制,寻找抗寄生虫药物的分子靶标,分离和鉴定诊断用特异性抗原分子和疫苗候选抗原分子,以解决寄生虫病的诊断、治疗和预防问题.
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ANAE染色和抗Thy 1-SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究报告
Thy抗原[Thy(θ)antigen]是T淋巴细胞表面特异标志,系由第9对染色体等位基因编码的抗原分子.Mueller发现,抗θ血清可破坏ANAE阳性淋巴细胞,ANAE阴性者则否.
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循环肿瘤细胞检测的研究进展
循环肿瘤细胞(CTC)是指进入血液循环中的具有高活力、高转移潜能的肿瘤细胞,在一定条件下可发展为转移癌。CTC 不仅对肿瘤的早期诊断、临床分期、疗效监测及预后判断有重要临床价值,还可为肿瘤个体化治疗提供临床指导,而 CTC 的高效检测则是首要前提。目前常用检测方法大都基于免疫抗原分子、肿瘤细胞物理特性及特异 mRNA 等,而以免疫抗原分子居多。现将近年来关于 CTC 检测相关研究进展作一综述。