首页 > 文献资料
-
静脉用丙种球蛋白治疗40例新生儿毛细支气管炎的疗效观察
新生儿毛细支气管炎是临床新生儿感染的常见危重病,由于病毒感染引起,常见的病原体是呼吸道合胞病毒,也可见于腺病毒等感染等,多由于相关接触史和免疫功能低下等原因引起,并发症重,病死率高[1].目前在治疗上,主要是抗生素和抗病毒治疗,雾化和给氧,呼吸道通畅等,已经有很多静脉用丙种球蛋白治疗婴幼儿毛细支气管炎的报道,但是对于新生儿尚未见报道,因此我科从2009年10月至2010年1月观察毛细支气管炎40例,在抗感染等常规治疗基础上加用静脉用丙种球蛋白治疗新生儿肺炎,取得了良好的疗效,现报告如下.
-
腺病毒肿瘤疫苗研制及临床应用中的伦理问题
腺病毒肿瘤疫苗是近年来医学研究的一大热点,具有广泛的应用前景.就腺病毒肿瘤疫苗的研究现状、临床应用前景等问题做了讨论,并着重探讨了研究及临床应用中的安全性和伦理学问题.
-
AFP启动子控制的在肝癌细胞中特异性表达绿色荧光蛋白报告基因的腺病毒载体的研究
目的 研究由AFP启动子控制的腺病毒载体在肝癌细胞中定向表达报告基因活性.方法 采用分子生物学技术手段,将AFP启动子和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因插入腺病毒载体质粒中,并在293细胞中重组出携带GFP基因的腺病毒AdAFP-GFP.荧光显微镜下观察GFP基因在肝癌细胞中的特异性表达.结果 AdAFP-GFP能够介导GFP基因在肝癌细胞中特异性表达,多数细胞呈现荧光反应,而在正常细胞中未发现GFP的表达.结论 采用AFP启动子可以实现目的基因在肝癌细胞中定向而特异性表达,这项研究应用于抗肿瘤基因治疗,将有利于显著提高治疗效果.
-
病毒性心肌炎腺病毒的中和抗体测定
目的了解血清中和抗体滴度的消长与病毒性心肌炎诊断的相关性,为临床诊断提供依据.方法用微量中和实验测定33例病毒性心肌炎患者腺病毒3、7、11型中和抗体水平,并与32名正常健康人对照作比较.结果病毒性心肌炎患者腺病毒中和抗体滴度≥1:16的阳性率为90.9%,正常对照组为31.3%;患者抗体滴度≥1:32的阳性率为72.7%,对照组为18.8%;患者抗体滴度≥1:64的阳性率为54.5%,正常对照组为12.5%;患者抗体滴度≥1:128的阳性率33.3%,正常对照组为6.3%.结论血清腺病毒中和抗体的检测,可作为病毒性心肌炎诊断依据之一.
-
基因疗法中非整合型病毒载体的应用
在过去的十年间,基因疗法在肿瘤、遗传性疾病以及传染性疾病等多个领域的临床治疗中取得了突破性进展.在基因疗法中,广泛地应用了各种各样的病毒载体,按其生活史可分为整合型病毒载体(如 γ-逆转录病毒、慢病毒)和非整合型病毒载体(如腺病毒、腺相关病毒、单纯疱疹病毒和痘病毒).腺病毒、单纯疱疹病毒是溶瘤病毒中常用的病毒载体,能优先感染肿瘤细胞,经复制后造成其裂解.这些病毒的特点是基因携带量大,但只能维持较短时间的外源性基因表达,加之免疫原性较强,因此需要采取肿瘤内注射的给药方式.腺相关病毒则由于其较低的免疫原性和持久的表达能力而被广泛使用于遗传缺陷性疾病的基因替代疗法中.现就用于直接在体细胞内进行稳定表达的非整合型病毒载体作一概述.
-
埃博拉腺病毒-5载体重组疫苗在中国健康成人中的安全性和免疫原性
到目前为止，所有用于试验的埃博拉病毒疫苗都是基于1976年扎伊尔暴发的病毒株。这里，作者旨在评估表达2014病毒流行株糖蛋白的基于腺病毒-5的新型重组型埃博拉载体疫苗的安全性及免疫原性。
-
双基因重组腺病毒表达载体pAdxsi-GFP-HIF-KGF的构建及表达
目的:构建同时携带低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和角质细胞生长因子(KGF)的腺病毒载体(pAdxsi-GFP-HIF-KGF),观察其在A549中的表达.方法:从低氧处理A549细胞中PCR扩增HIF-1 αcDNA,并连接到载体pShuttle-CMV-EGFP上得到重组质粒pShuttle-GFP-HIF,同时将从质粒pIRES2-EGFP-KGF扩增的KGF基因也克隆其上,获得穿梭重组质粒pShuttle-GFP-HIF-KGF.再将其重组到pAdxsi病毒骨架载体上,构建携带HIF-1α和KGF双基因的重组腺病毒载体.观察重组腺病毒转染A549细胞后表达情况.结果:证实携带HIF-1α和KGF双基因的重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-HIF-KGF成功构建.其转染A549细胞后可有效表达HIF-1和KGF蛋白,48 h时HIF-1蛋白表达水平为(56.36±4.53)ng/ml,KGF蛋白表达水平为(60.20±2.92)ng/ml.结论:成功构建了双基因腺病毒载体pAdxsi-GFP-HIF-KGF,其可有效转染表达,具有进一步在肺损伤防治应用的前景.
关键词： 低氧诱导因子-1α基因 角质细胞生长因子基因 腺病毒 构建 表达 -
重组腺病毒Ad-huVEGF121的制备
目的:构建能够用于骨缺血研究的能表达huVEGF121的重组腺病毒载体.方法:将huVEGF121克隆至穿梭质粒,线性化后转染含骨架质粒的BJ5183菌,构建重组腺病毒质粒.酶切及PCR法鉴定;将其线性化后转染293细胞,通过观察绿色荧光监测病毒产生,免疫组化检测VEGF121表达.结果:成功的将hu-VEGF121克隆至穿梭质粒pTrack-CMV,正确构建了重组腺病毒质粒,感染293细胞得到大量病毒.结论:成功构建了huVEGF121重组腺病毒,为缺血性骨病的进一步研究奠定了基础.
关键词： 血管内皮细胞生长因子 腺病毒 重组 -
Ad-HGF转染对HepG2细胞的生长抑制作用
目的:探讨Ad-HGF转染对HepG2生长抑制作用的影响.方法:用Ad-HGF转染HepG2细胞,检测HGF蛋白表达及对细胞凋亡的影响;并用裸鼠致瘤试验体内观察Ad-HGF对HepG2细胞致癌的影响.结果:转染后24 h HGF即有表达,48 h达高峰.并观察到Ad-HGF可促进HepG2凋亡,体内Ad-HGF可抑制HepG2细胞生长成瘤.结论:Ad-HGF在体外可抑制HepG2细胞增殖、促进其凋亡,体内抑制其致癌作用.
-
重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因治疗大鼠肝纤维化的实验研究
目的:评价携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的重组腺病毒对大鼠肝纤维化模型的治疗作用.方法: DMN法建立Wistar大鼠肝纤维化模型后,将8.6×109 pfu 的Ad-HGF经尾静脉注射入大鼠体内,对照组注射同剂量的Ad-GFP.第40天心脏采血,检测血清GPT、GOT、TP和TBil,并取肝组织做HE染色,观察两组大鼠肝脏的病理形态.结果:治疗组部分动物肝功能有所改善,对照组不明显.与对照组相比,治疗组大鼠的肝组织损伤程度较轻,汇管区看不到明显的纤维增生,并可见双核肝细胞和分裂相细胞.结论:腺病毒介导的HGF基因可能有部分治疗大鼠肝纤维化的作用.
-
腺病毒介导miR-99a过表达抑制人结肠癌HCT-8细胞的生长抑制及其作用机制
目的 探讨miR-99a过表达对人结肠癌HCT-8细胞的生长抑制及其作用机制.方法 构建miR-99a的重组腺病毒Ad5-miR-99a,并感染人结肠癌HCT-8细胞.采用甲基化特异性PCR检测miR-99a、抑癌基因SOCS1和P16的甲基化水平;采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测miR-99a、DNAC5胞嘧啶甲基转移酶、SOCS1和P16的表达情况;采用MTT法、细胞集落形成和流式细胞术检测HCT-8细胞的体外增殖凋亡情况;采用裸鼠体内荷瘤实验检测HCT-8细胞体内成瘤性.结果 成功构建miR-99a腺病毒载体Ad5-miR-99a.Ad5-miR-99a感染HCT-8细胞后,Ad5-miR-99a组细胞中miR-99a表达显著高于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05),而其甲基化水平显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05);Ad5-miR-99a组细胞中DNAC5胞嘧啶甲基转移酶表达显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05);Ad5-miR-99a组细胞中SOCS1和P16表达显著高于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05),而其甲基化水平显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05).MTT法、细胞集落形成、流式细胞术和裸鼠体内荷瘤实验显示,Ad5-miR-99a组细胞的体外增殖和体内成瘤能力显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P＜0.05).结论 miR-99a可显著抑制人结肠癌HCT-8细胞的体外增殖和体内成瘤能力,其机制可能与miR-99a过表达导致DNMTl表达升高,降低抑癌基因SOCS-1和P16甲基化程度,使得SOCS-1和P16高表达,从而发挥抑制肿瘤细胞生长的作用.
-
西宁地区婴幼儿病毒性腹泻的病原分析
婴幼儿腹泻是小儿常见的疾病之一,具有较高的发病率,一年四季均可发病,在全部感染性腹泻中病毒性腹泻占较高比例.我科对西宁地区(海拔2 260m)2004年4月-2004年12月284例腹泻患儿腺病毒、轮状病毒感染情况进行了检测和临床观察,现报告如下.
-
糖皮质激素联合绷带镜治疗腺病毒性角结膜炎的临床观察
目的 探讨糖皮质激素联合博士伦PureVision角膜接触镜治疗腺病毒性角结膜炎的临床效果,评估绷带镜的治疗价值及意义.方法 选取确诊为腺病毒感染的角结膜炎合并结膜伪膜及角膜上皮部分剥脱患者207例246只眼,分为对照组103只眼(口服抗病毒药物联合人工泪液局部点眼)、治疗组143只眼(在对照组治疗的基础上佩戴博士伦PureVision角膜接触镜联合糖皮质激素).随访1个月,观察结膜伪膜及角膜上皮修复的治疗效果,并定期监测眼压变化.结果 治疗组结膜伪膜治疗有效率为91.6％,对照组有效率为57.30％,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组角膜上皮下浸润治疗有效率为90.9％,对照组有效率为62.1％,差异有统计学意义(P＜0.05);角膜上皮修复有效率为92.3％,对照组有效率为44.7％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 糖皮质激素联合绷带镜用于辅助治疗腺病毒性角结膜炎是安全有效的,对缓解眼痛、促进角膜上皮及溃疡修复有明显效果.
-
VEGF165基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗兔激素性股骨头坏死的实验研究
目的 以hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞移植治疗兔激素性股骨头坏死模型,通过影像学观察、病理学及免疫组织化学检查等方法评价疗效.方法 使用马血清与醋酸泼尼松龙制备兔激素性股骨头缺血性坏死动物模型后分为4组,分别进行以下治疗:A组(不作任何处理);B组(髓心减压+自体骨移植);C组(髓心减压+骨髓间充质干细胞+自体骨移植);D组(髓心减压+Ad-VEGF165转染骨髓间充质干细胞+自体骨移植).术后3周处死行病理学、免疫组织化学检查及Western Blot检测股骨头内VEGF的表达,比较各组间的差异.结果 D组在软骨下血管、VEGF阳性面积百分比、股骨头内VEGF的相对浓度均高于其他各组;在VEGF平均灰度值、空骨陷窝率低于其他各组,且各组间差异有统计学意义.结论 转染了Ad-VEGF165的骨髓间充质干细胞在宿主股骨头局部可以表达VEGF蛋白,且较单纯的骨髓间充质干细胞移植表达的强度更高,对激素性股骨头坏死进行早期治疗具有确切疗效.
-
住院患儿MP、ADV、RSV感染的血清流行病学调查
目的了解住院儿童中MP、ADV、RSV感染概况.方法对1997年9月～1999年4月412例住院病例,用固相酶联免疫吸咐(ELISA)方法,定性检测人血清中特异性IgM抗体.结果 412例患儿,4个年龄组的MP、ADV、RSV阳性检出率无明显差异,而MP+ADV+RSV检测,学龄前儿童及婴幼儿组的阳性检出率显著高于学龄期儿童组,在性别比较中,男童的阳性检出率与女童间的差异是显著的(P＜0.05).结论 MP、ADV、RSV的感染在年龄上有明显提前趋势,男童的感染机会高于女童,本检测IgM类抗体,出现早,对临床参考价值大.
-
腺病毒介导的热休克蛋白70对新生大鼠肺组织热休克蛋白70表达水平的影响
目的 探讨腺病毒介导的热休克蛋白70(HSP70)在新生大鼠肺组织内佳转染途径、转染量和转染时间.方法 选取150只Wistar新生大鼠,按照随机数字表法分为: (1)转染途径组:将纳入的48只新生大鼠分为A组(尾静脉注射组)和B组(腹腔注射组).将5 μL×1010 PFU/mL腺病毒热休克蛋白(HSP70)转染液注入新生大鼠体内,分别于注射24、48、72、96 h将各组新生大鼠处死,留取肺组织标本,用荧光显微镜判断HSP70转染到新生大鼠肺组织的佳转染途径.(2)转染剂量组:将54只新生大鼠随机分为:空病毒组、病毒HSP70组、对照组,分别给予2.5 μL×1010 PFU/mL、5 μL×1010 PFU/mL、10 μL×1010 PFU/mL的转染液剂量,经过尾静脉注射转染后72 h将各组新生大鼠处死,留取肺组织标本,用RT-PCR及Western blot检测HSP70的mRNA及蛋白质水平,确定腺病毒介导的HSP70转染的佳转染量.(3)按照不同转染观察时间将48只新生大鼠随机分为24 h组、48 h组、72 h组、96 h组,同时设立盐水空白对照组,分别于不同转染时间点处死新生大鼠,留取肺组织标本,采用RT-PCR及Western blot检测HSP70的mRNA及蛋白质水平,明确HSP70在新生大鼠肺组织内表达的佳转染时间.结果 (1)尾静脉注射组新生大鼠48 h荧光显微镜下见少量绿色荧光信号标记蛋白,72 h及96 h见明显的绿色荧光信号标记蛋白.(2)5 μL×1010 PFU/mL Ad-HSP70转染剂量的新生大鼠肺组织内HSP70mRNA及蛋白质表达量增高.(3)转染新生大鼠72 h组肺组织内HSP70mRNA及蛋白质表达量较24、48 h增高( P<0.05),与96 h比较差异无统计学意义( P>0.05).结论 确定腺病毒介导的HSP70在新生大鼠体内转染的佳途径为尾静脉,佳转染量为5 μL×1010 PFU/mL,转染后佳观察时间点为72 h.
-
重组人hSERCA2a基因腺病毒载体构建和包装
目的：构建携带人肌浆网钙 ATP酶2 a（SERCA2 a）基因重组腺病毒载体，获得重组腺病毒 rAd-SER-CA2a-EGFP，为进一步在细胞和动物水平研究 SERCA2a基因的功能奠定基础。方法根据细菌内同源重组的方法，使用AdEasy腺病毒包装系统将人SERCA2a基因克隆到腺病毒穿梭载体质粒pshuttle-CMV中，腺病毒穿梭质粒 pshuttle-CMV-SERCA2a线性化后与腺病毒载体 pAdEasy发生同源重组，通过脂质体共转染 HEK293细胞，产生重组腺病毒rAd-SERCA2 a，DNA测序鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定。结果通过酶切鉴定和DNA测序鉴定，证实重组腺病毒载体 pAdEasy-SERCA2a-EGFP构建成功，PCR鉴定扩增出2998 bp的目的条带，rAd-SERCA2a-EGFP滴度高达1×1012μg/mL。结论成功构建和包装携带 hSERCA2a 基因的 rAd-SERCA2a-EGFP，为 SERCA2a基因治疗心力衰竭动物实验及临床试验研究奠定基础。
-
人类腺病毒36型感染与肥胖关系的研究进展
随着经济的发展和人民生活水平的提高,肥胖的发病率日益升高,由肥胖导致的各种并发症:高血脂、高血压、冠心病、中风、癌症等对人类的危害也日趋严重,肥胖已呈现为全球性问题.据1998年的统计,在美国约有25%的人群处于肥胖状态,每年的死亡人数中大约有28万～32.5万人是由于肥胖引起的[1];而2004年据美国第3次健康营养教育普查的数据显示,20岁以上的成年人中,约有50.4%处于超重和肥胖状态,同时据估计,到2020年,英国也将有1/3的成年人处于肥胖状态[2].
-
急性毛细支气管炎的治疗进展
急性毛细支气管炎(简称“毛支炎”Bronchiolitis)是婴幼儿较常见的下呼吸道感染，多发生在2岁以下，80％以上病例在1岁以内，男婴重症较多。呼吸道合胞病毒(RSV)是常见的病原，其他还有副流感病毒、腺病毒等。在临床上开始表现为上呼吸道感染，之后出现咳嗽、喘鸣及呼吸困难，部分患儿伴有发热。据有关文献报道，在患“毛支炎”后的2年……
-
普米克令舒、博利康尼水溶液雾化吸入治疗毛细支气管炎疗效观察
毛细支气管炎是婴幼儿常见的下呼吸道感染性疾病,呼吸道合胞病毒是常见的病原体,其次亦有腺病毒,流感病毒及副流感病毒所致,目前无特效治疗,我们用普米克令舒(布地奈德),博利康尼水溶液(硫酸特布他林)雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎取得较好疗效,现报告如下.
