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从抗击腺病毒实践谈医院应对生物恐袭策略
双链脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)各型腺病毒具有细胞泛嗜性,基因组全长约34.7 kb,耐酸不耐热,56℃、30 min可灭活此病毒.腺病毒广泛分布于自然界,能够感染脊椎动物多种细胞,引起呼吸道、胃肠道、泌尿道、心血管等多系统临床症状,是成人社区获得性肺炎的重要病因[1],易在托幼机构、学校、部队,特别是在新兵中暴发流行,又称“军营”病毒.各型腺病毒曾在西班牙、土耳其、新加坡、日本等国家暴发流行.2009年、2012年分别在陕西某高校、山西和河北某军营发生大规模暴发流行[2],近两年来在武汉、张家口等地也有暴发.医院近年来救治当地多起较大规模疫病疫情,并成功将疫情控制在了院内,实现了零感染、零扩散目标,社会舆情总体平稳.
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苏州地区单中心6岁以下住院儿童急性呼吸道感染病毒病原分布特征研究
目的 分析苏州地区6岁以下住院儿童急性呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)病毒病原分布特征,为临床抗感染及疾病控制提供理论依据.方法 以2011年1月至2016年12月在苏州市立医院本部儿科住院治疗的1 602例ALRTI患儿为研究对象,采用直接荧光免疫法对患儿鼻咽部上皮细胞进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Adv)、流感病毒A(Flu A)和B(Flu B)、副流感病毒1～3(PIV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)的检测对照.结果 1 602例ALRTI患儿的共1 602份标本中7种病毒阳性453份(28.28％),阳性率从高到低依次为RSV、PIV(PIVⅢ、PIVⅠ、PIVⅡ)、Flu (Flu A、Flu B)及Adv.不同性别病毒检测阳性率之间差异无统计学意义(P＞0.05);不同季节和不同年份的病毒检测阳性率差异有统计学意义(P＜0.05);不同年龄组病毒检测的总体阳性率、RSV阳性率两项的差异有统计学意义(P＜0.05),余各项差异均无统计学意义.结论 呼吸道病毒是本地区住院儿童ALRTI的常见主要病原之一,其分布存在年龄、季节和年份的差异,本地区以RSV、PIV(主要是PIVⅢ)为主.伴随年龄的增加,总体病毒和RSV感染的阳性率下降.病毒总体感染率以冬季高,夏季低;RSV以秋、冬季为主,PIV以春、夏季为主,Flu、Adv和混合感染均以冬季为主.
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3种藏药提取物对腺病毒和甲型H1N1流感病毒的体外抑制作用
目的 探讨3种藏药提取物体外抗腺病毒和甲型H1N1流感病毒的作用.方法 采用细胞病变法检测3种药物对Hep-2细胞的毒性作用以及其抗腺病毒的活性作用;采用MTT法检测3种药物对MDCK细胞的毒性作用,并通过蚀斑法观察3种藏药提取物甲型H1N1流感病毒的抑制作用.以治疗指数(TI)值作为药物抗病毒效果的评价指标.结果 3种藏药提取物A、B、C对Hep-2细胞半数毒性浓度分别为0.872、0.872、0.438 g/L,抗腺病毒作用的半数有效浓度分别为0.244、0.288、0.250 g/L,治疗指数分别为3.574、2.819、1.752; 3种药物对MDCK细胞半数毒性浓度分别为1.076、1.745、0.399 g/L,抗甲型H1N1流感病毒的半数有效浓度分别为0.240、1.663、0.891 g/L,治疗指数分别为4.491、1.050、0.447.结论 3种藏药提取物具有一定的抗腺病毒和抗甲型H1N1流感病毒的作用,具有较广的抗病毒谱,其抗病毒作用强弱程度依次为A、B、C,说明其具有潜在的临床应用前景,值得进一步深入研究.
关键词： 藏药提取物 腺病毒 甲型H1N1流感病毒 体外抗病毒 -
社区获得性病毒性肺炎病原学治疗研究进展
呼吸道病毒在社区获得性肺炎中起着重要作用,可直接导致病毒性肺炎,也可以使患者易于发生细菌感染,导致疾病严重及复杂化,及早进行有效的抗病毒治疗不仅可以避免经验性抗菌药物的应用,而且可以有效改善病情.本文对常见呼吸道病毒的特异性病原学治疗进行总结,以期为临床治疗提供参考.
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重组病毒载体疫苗研究进展
近年来,重组病毒载体疫苗受到了广泛的重视,它是将外源保护性抗原基因插入到病毒基因组内获得重组病毒,免疫机体后表达出相应的目的蛋白,从而诱导免疫应答的一类载体疫苗.重组病毒载体疫苗具有插入外源基因长、接种途径多、能诱导体液免疫和细胞免疫反应及易生产制备等优点,且能克服传统疫苗的某些弊端,能极大地提高疾病的预防性,已在疫苗研制中得到了广泛的应用.以重组病毒作为表达载体制成的预防性疫苗已开展多项临床试验,本文综述了重组病毒载体疫苗当前的新研究进展,并分析了其发展趋势,为进一步研制新型重组病毒疫苗提供参考.
关键词： 重组病毒载体疫苗 腺病毒 痘病毒 水泡型口炎病毒(VSV) 临床试验 -
成人重症腺病毒肺炎临床研究
目的 分析重症腺病毒肺炎患者的临床特征,确定成人重症腺病毒肺炎的早期评估方法.方法 回顾性分析24例7型腺病毒呼吸道感染致重症腺病毒肺炎患者的临床资料,总结咳嗽评分、咳嗽时间、影像资料、生化指标及并发症,并就以上指标与42例轻症患者进行比较.结果 24例重症腺病毒肺炎患者危重症评分为(69.75±8.24)分,表现高热和剧烈咳嗽,发热持续时间12～24(16.21±6.54)d.66例中生命体征异常和低氧血症28例,胸部CT示叶、段性的实变伴毛玻璃影29例,影像学上进展多表现为大片实变为主的病灶,可出现范围迅速扩大、密度增高和多种不同形态的新发病灶,入院白细胞计数、中性粒细胞增高25例,血小板计数减少5例(血小板计数重症组与轻症组比较,P<0.05).结论 持续高热并咳嗽评分>2分,胸部CT出现大片实变和迅速进展为大叶性病灶,氧合指数降低,血小板减少,肝功能异常,是成人腺病毒肺炎向重症发展早期的主要特点.
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穿琥宁致过敏性休克报告
穿琥宁是从中药穿心莲叶中提取的有效成分穿心莲内脂,与琥珀酸酐反应所得的脱水穿心莲内脂琥珀酸钾盐制成的灭菌水溶液.其对腺病毒(Adv )3型,流感病毒1型、甲3型,呼吸合胞病毒(Rjv)等均有灭活作用.对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎链球菌等多种致病菌均有抑制作用,与抗生素合用能克服对青霉素和头孢菌素不敏感的呼吸道感染.近年来,穿琥宁的应用日益增多,笔者曾遇穿琥宁致过敏性休克3例,报告如下.
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深圳市南山区腹泻儿童腺病毒检测结果及其基因分型的研究
目的 深入了解深圳市南山区腹泻病患儿腺病毒感染的发生率、临床特征、流行特点,以及主要致病亚型.方法 以来深圳市南山区西丽人民医院就诊的深圳市南山区5岁以下腹泻病患儿的粪便标本为研究对象,通过多聚酶链反应(PCR)方法进行腺病毒核酸扩增;并将PCR阳性扩增产物进行克隆、测序,进行腺病毒基因分型的研究.结果 516例5岁以下腹泻病患儿共检出腺病毒感染患者57例,检出率为11.05％,其高发季节为3月、4月和8月;其中新生儿腹泻病患儿腺病毒的阳性感染者低,各个年龄段之间腺病毒感染情况差异无统计学意义(x2=2.030,P=0.730).57例腺病毒的阳性患者基因测序发现有30例腹泻病患儿感染F组Ad40和Ad41病毒(52.63％).结论 在深圳市南山区F组Ad40和Ad41病毒感染引起的腹泻发生率较高,相关部门应该加大对F组腺病毒感染腹泻的研究与预防.
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转前强啡肽基因修饰人骨髓间充质干细胞株的建立
目的 建立前强啡肽(PDP)基因修饰的人骨髓间充质干细胞株并验证其可在体外增强细胞强啡肽的分泌.方法 本实验运用载体Ad5F35-PDP转染人骨髓间充质干细胞hBMSCs,获得分泌强啡肽的干细胞株(hBMSCs-PDP),以转染空载体的细胞(hBMSCs-空载体)和未转染的细胞hBMSCs作为对照,此3组细胞分别采用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD44、CD34、CD45的表达,免疫荧光法检测强啡肽的表达,RT-PCR法检测强啡肽mRNA的表达、Western Blot法测定强啡肽蛋白的分泌.结果 体外实验以流式细胞仪检测此3组细胞的表面标志物CD29、CD44表达均阳性,CD34、CD45表达均阴性且这3组细胞的表达差异比较无统计学意义(P＞0.05).与hBMSCs和hBMSCs-空载体比较,hBMSCs-PDP细胞株强啡肽mRNA的表达和强啡肽蛋白的表达均上调(P＜0.05).结论 本实验成功构建了前强啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞,并证明转染后的细胞株hBMSCs-PDP可稳定分泌强啡肽并保留干细胞原有的特征表型.
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盈江地区4 422例腹泻患儿轮状病毒与腺病毒感染情况调查
腹泻病是世界范围内影响儿童健康的常见病和多发病,也是导致儿童死亡的重要原因,尤其在发展中国家,腹泻仍是导致儿童死亡的主要原因.我院采用轮状病毒、腺病毒抗原检测试剂盒(乳胶法)同时检测门诊和住院腹泻患儿粪便中的RV、ADV抗原.现报道如下.
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合肥市某小学急性呼吸道感染疫情的病原学分析
目的 分析合肥市某小学一起急性呼吸道感染疫情病原学, 为疫情发生的生物学病因提供依据.方法采用实时荧光PCR方法 (Real-time PCR) 对采集的10份患者咽拭子标本进行流感病毒和腺病毒核酸筛查, 检出的腺病毒核酸阳性标本经普通PCR扩增腺病毒六邻体基因片段以进行序列测定, 测序结果在Genbank上进行Blast比较并作系统进化树分析, 以确定其病毒型别.结果 10份咽拭子标本流感病毒核酸检测结果均为阴性, 7份标本检出腺病毒核酸, 进一步通过基因测序、序列比对、基因进化树分析确定为腺病毒3型.结论 依据实验室检测结果并结合流行病学调查和临床症状, 确认该起急性呼吸道感染疫情的病原体为人腺病毒3型.
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一起游泳池腺病毒感染暴发疫情的流行病学调查
目的 调查传播来源与可能的传播途径,为有效控制疫情提供科学依据.方法 根据暴发疫情调查步骤开展病例的流行病学调查,游泳馆卫生学调查,探索疫情暴发原因.结果 62例疑似病例腺病毒感染临床症状以发热为主,咽炎占80.00％(48/62)、咳嗽占56.45％(35/62)、眼结膜炎占25.81％(16/62).60例患者咽试子标本实验室检测结果显示腺病毒核酸阳性,患者均有游泳馆游泳史,该起暴发疫情可能是由游泳馆游泳导致的腺病毒感染引起.结论 本次疫情为发生在游泳场馆内的腺病毒感染暴发疫情,确切感染途径不清.应加强公共场所传染病防控,将消杀措施有效落实.
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安庆市呼吸道感染疫情人腺病毒的病原分析
目的 对一起呼吸道感染疫情人腺病毒进行病原鉴定.方法 将4株腺病毒核酸阳性患者标本接种于Hep-2细胞进行培养,利用产生病变的细胞提取核酸DNA,PCR扩增六邻体蛋白基因,对扩增的产物进行测序,并通过BLastn序列分析以确定其型别.结果 4株腺病毒毒株六邻体蛋白基因PCR产物测序和Blastn分析结果证明该腺病毒与人7型腺病毒同源性为高,大于99％.结论 本研究从患者标本中分离到的病毒毒株为腺病毒7型.
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萍乡市一起咽结膜热暴发疫情调查报告
目的 分析萍乡市一起咽结膜热暴发的流行特征和病因,为今后此类传染病防控提供参考.方法 制定病例定义进行病例搜索,对所有病例进行个案调查,对游泳馆进行现场卫生学调查,对患者咽拭子标本和游泳池水进行实验室检测.结果 本起疫情累计病例84例,发病高峰在8月1～5日;年龄以5～13岁多,占总病例数的77.38％.患者发病前均有游泳史,临床表现主要为发热伴咽痛、扁桃体红肿、眼结膜充血等.8份现症病人咽拭子标本经Real-time PCR方法检测,确定为腺病毒感染.结论 本起咽结膜热暴发疫情的病原体为腺病毒,暴发可能是通过被污染的游泳池水造成传播.
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腺病毒引起呼吸道感染疫情调查分析
目的 探讨一起家庭呼吸道感染疫情的病原学,及腺病毒感染流行病学特征.方法 采用相应的流行病学个案调查表进行现场调查,描述流行特征；采集患者咽拭子或呼吸道吸取物,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行病毒核酸检测,确定致病原.结果 累计发病7例,其中1例中老年患者出现重症肺炎并死亡,RT-PCR病毒核酸检测确认腺病毒感染；临床表现主要为发热,38℃以上,伴有乏力、肌肉酸痛、咳嗽、咽痛等症状,潜伏期大约4～ 10d,病程1W左右,通过封闭环境短距离长时间接触呼吸道传播.结论 此起疫情由腺病毒感染引起,通过不明原因肺炎监测报告机制发现.
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腺相关病毒载体基础研究及其在造血系统的应用进展
基因转移方式分为病毒载体和非病毒载体两类。前者常用的病毒有反转录病毒(RV)、腺病毒(AV)、腺相关病毒(AAV)、单纯疱疹病毒(HSV)及人免疫缺陷病毒(HIV)等；后者有物理和化学方法等。病毒载体各有优点及局限性。近年来腺相关病毒载体基础研究以及在造……
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂提高腺病毒对K562细胞转染及杀伤效率的研究
目的 研究通过观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人类白血病细胞系K562柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达水平的影响,并探讨HDAC抑制剂在以腺病毒为载体的基因治疗中的应用价值.方法 在mRNA和蛋白水平检测TSA处理K562细胞前后CAR的表达情况,采用流式细胞术测定病毒的转染效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测腺病毒及其携带的基因的体外抗瘤效应.结果 TSA处理后,K562细胞CAR的mRNA和蛋白表达明显增高;流式细胞仪分析ADV-GFP转染K562后GFP的表达发现:未处理组的转染率为(8.74±0.34)%,1、10和100 nmol/LTSA处理细胞48h后的转染率分别为(12.26±0.55)%、(20.83±1.22)%和(28.66±0.43)%.未处理组与处理组间及各处理组间转染效率的差异有统计学意义(P《0.05).MTT结果表明腺病毒M1介导的体外杀伤效应TSA处理组比未处理组增强(P《0.05),TSA各处理组间的体外杀伤效应随TSA浓度的提高而增强(P《0.05).结论 低浓度的TSA可以增强腺病毒对K562细胞的感染及杀伤效率,可以提高以腺病毒为载体的血液肿瘤基因治疗的疗效.
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腺病毒介导p55γ基因N末端的过表达对胃癌细胞增殖和迁移的抑制
背景与目的:通过腺病毒介导,观察P13K P55γ调节亚基N末端对胃癌细胞增殖和迁移的影响. 材料与方法:在腺病毒EI基因转化的人胚肾细胞HEK293中扩增复制缺陷型霞组腺病毒Ad-N24-GFP以及空载体病毒Ad-GFP,分别用Ad-GFP和Ad-N24-GFP感染MGC803细胞后,通过荧光显微镜观察病毒对肿瘤细胞的感染效率,计数活细胞,制作细胞生长曲线,观察Ad-N24-GFP对细胞生长的影响;并采用流式细胞术和细胞迁移实验分别检测Ad-N24-GFP对MGC803细胞周期和细胞运动迁移能力的影响. 结果:重组腺病毒经过感染HEK293细胞后大量扩增,在病毒感染复数(MOI)为100时病毒对细胞的感染效率高.与感染空载体的细胞相比,感染Ad-N24-GFP的MGC803细胞生长速度减慢、细胞倍增时间延长;Ad.N24-GFP的过表达使MGC803细胞G_0/G_1期百分率由(68.7±5)%上升到(84.2±5.4)%,差异具有统计学意义(P<0.05);感染Ad-N26.GFP的MGC803细胞其细胞迁移能力明显降低,与空载体组细胞相比,差异亦具有统计学意义(P<0.05). 结论:腺病毒介导p557 N末端24肽的过表达能够显著抑制胃癌MGC803细胞的增殖和迁移,其在胃癌的基因治疗上可能具有潜在的应用前景.
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儿童重症腺病毒肺炎不同阶段的临床影像学特征
目的 探讨儿童重症腺病毒肺炎不同阶段影像学特征与临床表现的相关性.方法 回顾性分析2016年1月～2017年12月入住我院重症监护室的31例重症腺病毒肺炎病例,将患儿病程分为急性期(起病1月内)、恢复早期(起病1～6月)和恢复后期(起病6月后)3个阶段,分析急性期患儿胸片病变范围与反映肺损伤严重程度的氧和指数的相关性;分析恢复期胸部CT特征与临床表现的相关性.结果 31例患儿中25例<2岁,6例≥2岁,所有重症腺病毒肺炎患儿急性期均有持续高热、喘息气促症状,白细胞计数多在正常范围或降低,胸片改变早期主要表现双肺内带散在斑片影,随病情进展,肺部渗出快速向中外带发展,呈现肺段及大叶性肺实变,患儿胸片病灶范围越大,其肺损伤程度越重;胸片病灶范围与机械通气时间、ICU住院时间、死亡率呈正相关(P<0.05),但与总住院时间无明显相关性(P>0.05).死亡4例均发生在急性期,15例患儿在恢复期行胸部CT检查,11例在恢复早期即表现为肺部"马赛克"征伴反复咳喘症状,在恢复后期喘息症状虽减轻,但复查胸部CT无改善,这11例患儿中<2岁10例,≥2岁仅1例,另有1例<2岁患儿恢复期后期CT表现为支气管扩张和单侧透明肺,其余3例患儿恢复期胸部CT基本恢复正常.结论 儿童重症腺病毒肺炎急性期胸部X片改变可较准确反映病情严重程度与进展情况,与预后相关;而恢复期伴肺部后遗症患儿胸部CT典型"马赛克"征可长期存在,<2岁患者可能较≥2岁患者在恢复期更容易发生肺部后遗症.
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不同年龄儿童中腺病毒所致喘息性支气管炎分析
目的 通过分析儿童各年龄段喘息性支气管炎中腺病毒感染所致的比例特点,指导临床诊治.方法 收集1132例于2014年1月～2016年7月在清远市人民医院儿科门急诊就诊或住院部治疗,临床并结合胸片结果诊断为喘息性支气管炎的儿童,依据年龄分为5组:＜6个月组、≥6个月且＜1岁组、≥1岁且＜3岁组、≥3岁且＜6岁组、≥6岁且＜14岁组,分别根据呼吸道病毒检测结果,记录各组腺病毒阳性例数,计算腺病毒感染率并予统计分析.结果 各组腺病毒感染率差异有统计学意义,以≥6岁且＜14岁组腺病毒感染率高(38.2％,x2=35.216,P=0.000).结论 腺病毒感染所致儿童喘息性支气管炎在≥6岁且＜14岁年龄段所占喘息性支气管炎比例高,临床中应引起重视.
