四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
鞘内氯诺昔康对正常大鼠痛阈的影响
目的 探讨鞘内注射氯诺昔康对正常大鼠的机械痛阈及热痛阈的影响.方法 雄性SD大鼠18只,用于机械痛阈测定,随机平均分为3组,鞘内溶剂组(S组,鞘内注射氯诺昔康注射用水20 μL)、肌注组(IM组,肌注氯诺昔康120 μg/20 μL)、实验组(IT组,鞘内注射氯诺昔康120 μg/20 μL).另取雄性SD大鼠18只,用于热痛阈测定,动物分组及处理同前.分别于注射前(痛阈基础值)和注射后10、30、60、90、120、150 min采用足底力学感觉测量仪和足底温觉测量仪对机械痛阈和热痛阈进行测定.结果 S组在鞘内注射前后的机械痛阈和热痛阈值无明显变化.IM组在肌注后30 min,机械痛阈值[(31.1±4.05) g]和热痛阈值[(20.82±2.15) s]出现高峰 (P＜0.05或P＜0.01);分别于60 min和90 min 恢复至基础水平.IT组在鞘内注射后10 min,机械痛阈值[(35.0±2.76) g]和热痛阈值[(26.72±3.75) s]均大于基础值 (P＜0.01);分别于90 min和120 min 恢复至基础水平.3组机械痛阈和热痛阈的基础值差异无统计学意义.在10、30、60 min,IT组的机械痛阈值高于S组(P＜0.01或P＜0.05);在 10、30 min,IT组高于IM组(P＜0.05).在 10、30、60、90 min,IT 组的热痛阈值均高于S组和IM组(P＜0.01或P＜0.05).结论 鞘内注射氯诺昔康可以提高正常大鼠的机械痛阈和热痛阈,与全身系统给药相比,该作用起效快,维持时间长.
-
自身反应性T淋巴细胞在抗血小板抗体产生中的作用
目的 探讨自身反应性T淋巴细胞在抗血小板抗体产生中的作用.方法 采用亲和层析柱分离血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa,并以此为抗原刺激ITP患者(实验组)和正常人(正常对照组)的单个核细胞,观察单个核细胞的增殖活化情况及IL-6、抗GPⅡb/Ⅲa IgG抗体产生水平.结果 实验组单个核细胞的增殖数量明显多于正常对照组,且增殖的细胞以T细胞为主,CD4+T细胞略高于对照组, 实验组CD28+、CD25+T淋巴细胞均明显高于对照组.在9例增殖的ITP患者单个核细胞培养的上清液中检测到高于正常对照组的IL-6和抗GPⅡb/Ⅲa IgG抗体水平,12例ITP患者中3例T淋巴细胞增生不明显,其IL-6和抗GPⅡb/Ⅲa IgG抗体水平亦很低,对照组虽然有淋巴细胞的增殖,但在体外培养过程中产生的相应抗体含量极低.结论 GPⅡb/Ⅲa 抗原刺激增强了抗GPⅡb/Ⅲa IgG抗体的产生, 对GPⅡb/Ⅲa自身反应的T淋巴细胞在激活B细胞及抗GPⅡb/Ⅲa IgG抗体的产生中起到了重要作用.
关键词： 免疫性血小板减少性紫癜 淋巴细胞 -
可生物降解凝胶膜预防腹腔术后粘连的实验研究
目的 拟研制一种新型的防肠粘连的材料及其应用剂型,并探索该剂型材料的应用技术和效果.方法 采用新西兰大白兔24只,分为实验组(18只)和对照组(6只),全麻下于兔回盲部结肠浆膜层人工形成创面,建立腹腔手术的动物模型.实验组创面用可生物降解凝胶膜对创面进行喷涂保护,对照组创面用生理盐水冲洗,缝合关闭腹腔.分别于术后2周、4周、8周处死动物取样,行大体和组织学观察.结果 实验组术后2周、4周肠壁间可见有少许的粘连带,术后8周肠壁间粘连带消失不见.对照组术后2周可见肠壁间有少许粘连带,术后4周肠壁间可见明显粘连带,术后8周见条索状瘢痕.结论 该生物降解凝胶膜能有效的预防术后肠粘连,并有良好的操作性.
-
金属硫蛋白抑制阿霉素引起的心肌细胞凋亡作用研究
目的 研究锌诱导的金属硫蛋白(MT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的的抑制作用并探讨其作用机制.方法 雄性C57BL小鼠随机分成4组(每组7只),即对照组、锌处理组、给药组和锌预处理给药组.各组小鼠连续2 d皮下给予ZnSO4 300 μmol/kg(锌处理组和锌预处理给药组)或等量生理盐水(对照组和给药组),第3 d单次腹腔注射DOX 15 mg/kg(给药组和锌预处理给药组)或等量生理盐水(对照组和锌处理组).DOX给药后第4 d处死小鼠,采用血红素镉饱和法测定心脏组织MT含量,ELISA法测定心肌凋亡指数,蛋白印迹分析(Western blot)测定心肌组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平.结果 与对照组相比,DOX引起小鼠心脏质量下降10%,且显著引起小鼠心肌细胞凋亡;经锌诱导后,心脏组织MT水平提高约25倍,且MT高表达能抑制DOX引起的凋亡细胞增加;进一步的研究发现,Bax蛋白表达水平在DOX给药后明显升高,而MT高表达抑制了Bax的表达升高;Bcl-2蛋白表达水平各组间的差异无统计学意义.结论 锌诱导的MT高表达能抑制DOX引起的心肌细胞凋亡,其作用机制主要与抑制DOX引起的Bax蛋白表达升高以及Bax/Bcl-2比值增加有关.
-
β淀粉样肽与HbcAg/MIR融合蛋白的免疫血清在AD转基因细胞模型中的生物效应
目的 研究β淀粉样肽(Aβ)与乙肝核心抗原主要免疫优势区(HbcAg/MIR)的融合蛋白(c-Aβ-c)在BL21/pET28原核表达体系的表达并进行腹腔内注射表达的融合蛋白免疫小鼠,检测免疫血清的免疫原性以及体外的生物学效应.方法 应用分子克隆技术构建原核表达质粒pET-28a/c-Aβ-c并进行c-Aβ-c融合基因在BL21菌的IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达的融合蛋白,用纯化的c-Aβ-c融合蛋白腹腔注射免疫动物,ELASA检测其抗Aβ抗体效价,MTT法和流式细胞术检测它应用于Alzheimer's disease(AD)转基因细胞的生物效应.结果 表达的c-Aβ-c融合蛋白主要以包涵体形式存在于细菌的沉淀中,表达水平占细菌总蛋白量的30%以上.免疫小鼠血清中抗Aβ抗体效价达1∶16000,抗血清抑制了AD转基因细胞中Aβ的神经细胞毒性,明显降低了细胞凋亡的比率.结论 c-Aβ-c融合蛋白具有良好的Aβ免疫原性,其动物免疫血清有效抑制Aβ肽的细胞毒性.
-
唇腭裂患者患龋情况的调查
目的 通过横断面调查了解唇腭裂患者的患龋现状,特点,以及患龋的影响因素.方法 调查对象为380名非综合征唇腭裂患者和339名非唇腭裂人群.记录其龋坏情况.结果 6～12岁组及13岁以上组中,唇腭裂患者比对照人群有较高的患龋率、龋均(dmft/DMFT)和龋面均(dmfs/DMFS)(P＜0.05);3～5岁组唇腭裂患者和对照人群的患龋率,龋均和龋面差异均无统计学意义(P＞0.05).在唇腭裂的不同类型中,伴有腭裂患者比单纯型唇裂患者龋坏更加严重(P＜0.05).已行外科手术的唇腭裂患者的龋坏程度好于未行手术者(P＜0.05).结论 唇腭裂患者的患龋率及严重程度均重于非唇腭裂人群.唇腭裂的类型以及外科手术将减轻其患龋的严重程度.提示对唇腭裂患者的早期干预和序列治疗对保持其良好口腔卫生和功能具有重要意义.
-
融合DNA疫苗CRT180/HPV6E7的构建及其免疫学特性研究
目的 构建融合DNA疫苗CRT180/HPV6E7,并评价其体外实验和动物模型上的免疫学特性,尤其是抗病毒致病基因的特异性细胞免疫反应.方法 分别构建DNA重组体pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7,pcDNA3.1-CRT180,pcDNA3.1-HPV6E7.将pcDNA3.1-HPV6E7质粒经脂质体介导转染B16细胞,以G418筛选阳性细胞集落,荧光显微镜观察和RT-PCR鉴定表达HPV6E7的阳性细胞株.将质粒DNA肌注免疫C57BL/6小鼠,3次后取全血经流式细胞仪检测T细胞亚群的变化,LDH法检测小鼠的脾细胞和淋巴细胞与靶细胞B16/HPV6E7孵育后的CTL活性以及ELISA法检测共孵育上清中IL-2和IFN-γ浓度的变化.结果 各组质粒经鉴定表明构建正确.转染后细胞株稳定表达HPV6E7.DNA疫苗免疫小鼠后,pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7免疫组较pcDNA3.1-HPV6E7免疫组的外周血CD8+T细胞和TCRγδT细胞的比例显著增加,脾细胞和淋巴细胞针对靶细胞B16/HPV6E7的CTL杀伤活性更明显,分泌IL-2和IFN-γ的水平升高(P＜0.05).结论 CRT180与HPV致病基因6E7相连的重组质粒疫苗pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7能引发小鼠T细胞亚群CD8+分化并诱导出显著的特异性CTL反应.推测CRT180/HPV6E7 DNA疫苗在动物模型上可以有效激活抗HPV特异性细胞免疫,有利于病毒感染的清除.
-
铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因在生物被膜的表达
目的 研究携带Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌在浮游状态和生物被膜状态Ⅰ类整合酶基因(intI1) mRNA的表达水平,探讨生物被膜中整合子相关的基因转移的分子机制.方法 采用竞争RT-PCR方法定量检测intI1在两株临床分离的铜绿假单胞菌(PA10和PA39)生物被膜菌和浮游菌中mRNA的表达水平.首先用PCR方法从Ⅰ类整合子阳性铜绿假单胞菌全基因组DNA中扩增竞争体DNA (cDNA),再以cDNA为模板体外转录合成竞争体RNA (cRNA);再将不同稀释度的cRNA分别与铜绿假单胞菌的浮游菌和生物被膜菌的总RNA提取物进行竞争RT-PCR,产物经电泳分析,以已知cRNA的量确定待测样本中intI1 mRNA的表达量.结果 两株铜绿假单胞菌在其浮游状态和生物被膜状态都有intI1 mRNA表达;两菌的浮游菌和生物被膜菌intI1 mRNA表达量分别近似相等;但两菌生物被膜菌intI1 mRNA的表达量都较其浮游菌高(约15倍).结论 铜绿假单胞菌在生物被膜状态下Ⅰ类整合子intI1 mRNA的表达上调是耐药性广泛传递和多重耐药性形成的可能原因之一.
-
99Tcm-MIBI骨显像判断骨良恶性病变的初步应用
目的 探讨99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)在判断骨良恶性病变中的应用价值,并与99Tcm-亚甲基二膦酸盐(MDP)进行比较.方法 对39例确诊为恶性肿瘤或怀疑有骨转移的患者,分别给予静脉"弹丸"注射99Tcm-MDP和99Tcm-MIBI,行99Tcm-MDP三相骨扫描和动态及静态99Tcm-MIBI显像.用视觉读片分析法和ROI定量分析法对两种显像方法进行比较.结果 169个病灶中有139个确诊为骨转移.99Tcm-MDP显像和99Tcm-MIBI显像的敏感性分别是90.3%和68.4%(P＜0.05),特异性分别是33.3%和96.7%(P＜0.05),假阳性率分别是6.71%和1.04%.99Tcm-MDP摄取在骨的良恶性病变中差异无统计学意义,99Tcm-MIBI显像在恶性肿瘤和良性病灶的差异有统计学意义(P＜0.05).99Tcm-MIBI 显像在探测股骨(96.0% vs 76.0%)、肱骨(90.9% vs 63.6%)和胫骨(88.9% vs 55.6%)的癌转移灶方面比99Tcm-MDP敏感性高(P＜0.05);与99Tcm-MDP相比,99Tcm-MIBI 显像能较早发现17个骨转移灶,并对11个良性病灶和2个癌症骨转移导致的病理性骨折做出明确诊断.结论 99Tcm-MIBI显像总的敏感性低于99Tcm-MDP,但特异性较高,假阳性率低,能较早发现骨转移灶并判断其良恶性,对评价骨转移癌并指导临床治疗有重要意义.
-
人工合成小分子多肽P16抑制大鼠肾小管上皮细胞纤维化的初步研究
目的 观察人工合成的与结缔组织生长因子(CTGF)同源的16个氨基酸小分子多肽(P16)能否与CTGF竞争性地和CTGF受体相结合,以阻止大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)转分化为肌纤维母细胞,并抑制细胞纤维化的发生.方法 以NRK-52E细胞株为实验对象,用异硫氰酸荧光素标记P16(FITC-P16),激光共聚焦显微镜观察P16和CTGF与细胞竞争性结合能力.用CTGF诱导NRK-52E细胞并加入P16竞争结合,通过细胞免疫荧光和RT-PCR分别在蛋白和基因水平上检测反映NRK-52E细胞向肌纤维母细胞转化的α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth action muscle protein, α-SMA)和反映NRK-52E细胞纤维化的胶原Ⅰ和Ⅳ.结果 CTGF能诱导NRK-52E细胞高表达α-SMA和胶原Ⅰ、Ⅳ.P16可与CTGF竞争性结合细胞表面的整合素аvβ3,并显著抑制CTGF诱导的α-SMA和胶原Ⅰ、Ⅳ高表达.结论 人工合成的小分子多肽P16可通过与CTGF竞争性结合于细胞表面,显著抑制CTGF的促细胞转分化和纤维化作用,可望成为抗纤维化治疗的一种新策略.
-
EGFR反义cDNA联合p16β干预喉癌细胞信号转导的实验研究
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)反义cDNA联合野生型p16β在体外对人喉癌Hep-2细胞信号转导的干预作用.方法 将已纯化的EGFR反义cDNA重组腺病毒和p16β在体外转染Hep-2喉癌细胞,采用MTT实验、流式细胞术(FCM)、免疫组化、Western blot等方法检测Hep-2细胞增殖抑制作用;进行细胞周期、DNA含量、细胞凋亡率的定量分析;检测重组腺病毒对Hep-2细胞EGFR蛋白表达的抑制和p16β蛋白过表达.结果 反义EGFR mRNA表达重组腺病毒能有效抑制Hep-2细胞的增殖活性;超过77.7%以上的被转染Hep-2细胞被阻滞在G0/G1期;转染细胞的凋亡率升高;同时出现EGFR蛋白表达的抑制和p16β蛋白的过表达.当p16β重组腺病毒和EGFR反义cDNA重组腺病毒联合转染Hep-2细胞后其抑制Hep-2细胞增殖活性、细胞周期阻滞、抑制细胞调亡作用明细增强.结论 p16β和EGFR反义cDNA能有效地干预人喉癌Hep-2细胞的信号转导机制,从而达到抑制Hep-2细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用.
-
实时荧光定量PCR检测职业砷暴露人群p53基因损伤
目的 探讨云南某砒霜厂工人p53基因第5和第8外显子损伤与砷的代谢转化关系;建立实时荧光定量PCR检测人群基因特异DNA损伤的方法.方法 选择云南某砒霜厂一线工人37例(高暴露组)、管理和后勤人员16例(低暴露组)和当地近期无毒物接触人员25例(对照组)为研究对象,应用实时荧光定量PCR检测人群p53基因第5和第8外显子损伤,同时检测尿中总砷和有机砷含量,评价人群对砷的代谢转化与p53基因损伤的相关性.结果 高、低暴露组男性尿有机砷浓度分别为(1.18±0.76) mg/L、(0.32±0.28) mg/L,女性分别为0.23 mg/L、(0.53±0.30) mg/L;高、低暴露组男性尿总砷浓度分别为(0.48±0.37) mg/L、(0.08±0.05) mg/L,女性分别为0.11 mg/L、(0.30±0.24) mg/L.男性尿总砷和有机砷高暴露组均高于低暴露组(P＜0.05),对照组均低于检出值下限0.02 mg/L.p53基因第5外显子实时荧光定量PCR检测的Ct相对值,男性高暴露组高于男性对照组(P＜0.05),Ct相对值随尿中有机砷含量上升有升高趋势(rs=0.355, P=0.011);p53基因第8外显子Ct相对值,男性低暴露组高于对照组(P＜0.05),但男性高暴露组与低暴露组、对照组比较,差异均无统计学意义,Ct相对值与尿中有机砷含量无相关性.结论 职业砷暴露可能致p53基因第5和第8外显子损伤,砷的代谢转化可能在第5外显子损伤中起关键作用;实时荧光定量PCR用于检测人群基因特异DNA损伤切实可行.
-
SHP-1基因重组腺病毒的构建与表达
目的 构建并鉴定人蛋白酪氨酸磷酸酶基因(SHP-1)重组腺病毒Ad-SHP1.方法 将人SHP-1 cDNA克隆于穿梭质粒pAdTrack-CMV,PmeⅠ线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得带有SHP-1基因的重组腺病毒质粒pAd-SHP1,经PacⅠ线性化后通过Lipofectamine2000转染HEK293包装细胞,观察细胞内绿色荧光蛋白表达情况.收获重组腺病毒,经PCR和Western Blotting鉴定后,扩增并纯化重组腺病毒,测定病毒滴度.结果 经测序、酶切电泳和感染后蛋白表达检测均表明成功构建重组腺病毒Ad-SHP1;病毒滴度为1.58×1010 pfu/mL.结论 成功构建带有人SHP-1 cDNA的重组腺病毒,为进一步研究结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤发生机制及肿瘤的基因治疗奠定了基础.
-
脂肪乳后处理对心脏缺血再灌注损伤的保护作用
目的 研究脂肪乳预处理和后处理是否具有心脏保护作用,并初步探讨其机理.方法 雄性SD大鼠20只.采用Langendorff 灌流模型,随机分为4组:持续灌注组(CTL组,持续灌注3 h 50 min),缺血再灌注组(ISCH 组,心脏平衡50 min, 37℃缺血45 min, 复灌3 h),脂肪乳预处理(I-preC组,脏平衡30 min, 给予含30%脂肪乳的灌注液预处理15 min,洗脱15 min, 37 ℃缺血45 min, 复灌3 h),和脂肪乳后处理组(I-postC组,心脏平衡50 min,37 ℃缺血45 min,复灌3 h,复灌开始给予含30%脂肪乳的灌注液15 min).基础和复灌期间连续监测心率(HR)和机械功能(LVDP).平衡20 min和复灌60min时测定流出液中LDH的含量.复灌结束, 剪下心脏左室前壁,做病理切片.余下的心肌组织液氮速冻后-70 ℃冰箱保存,做Western Blotting.结果 与ISCH组相比,I-postC组心脏做功增强,而I-preC并不增加左室做功.与ISCH 组相比,I-preC组和I-postC组复灌60 min时LDH的释放均降低,I-postC组心肌凋亡细胞指数降低(P＜0.05);I-preC组和ISCH组心肌凋亡细胞指数之间差异无统计学意义.与ISCH组相比,I-postC组的Bax表达量较低;I-postC组的Bcl-2的表达量较高.与ISCH组相比,I-preC组Bax的表达量比较高,I-postC组Bcl-2的表达量较低.结论 脂肪乳后处理通过抑制心肌细胞凋亡而增强心脏机械做功,并减少LDH 的释放而减轻心肌缺血再灌注损伤.
-
VEGF在糖尿病大鼠肾脏中表达变化的研究
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠肾脏中表达的变化规律及其与糖尿病肾病(DN)发生发展的关系.方法 实验分为糖尿病模型组和正常对照组.采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠DN模型,分别于造模成功后2、4、8、12、16、20、24周,用RT-PCR、免疫组织化学及计算机图像分析技术连续多时点观察肾脏VEGF表达变化,并分析其与肾脏病理变化指标的相关性.结果 VEGF mRNA在糖尿病模型组大鼠肾脏中持续高表达,各时点与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);糖尿病组2～24周肾小球VEGF蛋白表达强于对照组(P＜0.05), 24周时有所减弱,但仍强于对照组;糖尿病组各时点肾小管VEGF蛋白表达均强于对照组(P＜0.05),8周后表达明显增强;VEGF表达变化与肾质量/体质量(r=0.518,P=0.001)、尿蛋白(r=0.409,P=0.001)、肾小球面积(r=0.499,P=0.000)和体积(r=0.499,P=0.000)呈正相关.结论 VEGF在糖尿病大鼠肾脏中持续高表达,早中期以肾小球表达上调为主,中后期突出表达在肾小管,其表达变化与糖尿病大鼠肾脏病变发生发展相关.
-
嗜肺军团菌PAL抗原基因的克隆及真核表达
目的 构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-PAL,并观察其在NIH3T3细胞中的表达.方法.结论PCR扩增嗜肺军团菌PAL基因,定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,将经酶切、PCR扩增及序列测定正确的重组质粒命名为pcDNA3.1-PAL.脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-PAL转染NIH3T3细胞,经免疫荧光和RT-PCR检测其瞬时表达和稳定表达产物.结果 重组质粒pcDNA3.1-PAL转染NIH3T3细胞后获得了有效表达.结论 成功构建了真核表达重组质粒pcDNA3.1-PAL为嗜肺军团菌核酸疫苗的进一步研究奠定了基础.
-
SOCS3与LIGHT在诱导DC分化成熟中的相互作用
目的 探讨SOCS3与LIGHT在刺激树突状细胞(DC)分化成熟过程中的相互作用.方法 用重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导培养小鼠骨髓单核细胞产生骨髓来源树突状细胞(BMDC).RT-PCR、Western blot检测受LIGHT刺激后BMDC中SOCS3 mRNA及SOCS3蛋白表达的时间动力学;利用反义核苷酸技术抑制SOCS3的表达,通过流式细胞术测定BMDC 表面分子CD40、CD86的表达水平.结果 LIGHT刺激后,BMDC的SOCS3 mRNA水平有不同程度增高(P＜0.05),并呈双峰度变化(分别出现在LIGHT刺激后2 h和10 h,增高幅度分别为92%和83%,其蛋白表达亦有所增加(LIGHT刺激24 h后表达量增加80%,P＜0.05);反义寡核苷酸能阻断SOCS3的表达,其对mRNA和蛋白表达的抑制率分别为49%和45%;经反义寡核苷酸处理后的BMDC在LIGHT刺激下其CD40、CD86表达均升高(P＜0.05).结论 LIGHT在刺激BMDC分化成熟过程中同时上调了SOCS3的表达;阻断SOCS3能使BMDC 对LIGHT 的反应更敏感,从而促使BMDC 成熟度更高;SOCS3对LIGHT 诱导的BMDC 分化成熟有负反馈调节作用.
-
基质溶解因子在人直肠癌中的表达及其临床意义
目的 通过检测基质溶解因子(matrilysin,MMP-7)在人直肠癌中的表达,探讨其在直肠癌浸润与转移中的作用.方法 对100例直肠癌与自身配对的正常直肠组织采用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(Quantitative-Real-Time RT-PCR)、免疫组化及计算机图像分析方法检测MMP-7 mRNA和蛋白水平的表达,定量分析其表达与临床病理特征的关系.结果 MMP-7在肿瘤组的mRNA表达水平高于正常组(P=0.001),表达比值大于1的67例(67%),mRNA表达与Dukes分期、淋巴结转移及组织学分化程度相关.MMP-7在直肠癌中的免疫组织化学染色强度(1.94±0.21) 高于正常组(1.15±0.20, P=0.002).蛋白表达与年龄、Dukes分期及淋巴结转移相关.结论 MMP-7在直肠癌中的表达明显升高,在直肠癌的浸润与转移中具有重要作用.
-
钙蛋白酶参与压力超负荷下肥厚心肌的信号调控机制探讨
目的 探讨压力超负荷下,血管紧张素受体(AT1及AT2)拮抗剂对肥厚心肌组织中钙敏感的钙蛋白酶系统的信号调节.方法 采用腹主动脉缩窄法建立大鼠压力超负荷模型,实验动物分为手术组、手术+缬沙坦(valsartan,1 mg/kg·d)组、手术+PD123319(30 mg/kg·d)组和假手术组,每组大鼠10只.免疫沉淀法检测大鼠左室间隔心肌组织钙蛋白酶系统(calpains)、钙调神经磷酸酶(CaN)及其抑制蛋白(cain/cabin1)的表达、CaN磷酸化.RT-PCR检测大鼠室间隔心肌组织肌球蛋白(β-MHC)mRNA表达.结果 手术后14 d, valsartan组大鼠血浆AngⅡ浓度高于假手术组及PD123319组(P＜0.05),valsartan组心肌AngⅡ浓度则低于假手术照组及PD123319组(P＜0.05).手术组大鼠左室间隔心肌组织u-calpain蛋白表达、CaN磷酸化、β-MHC mRNA表达高于假手术组(P＜0.01).手术组大鼠左室间隔心肌组织cain/cabin1蛋白表达低于假手术组(P＜0.01);valsartan组大鼠心肌u-calpain蛋白表达、CaN磷酸化、β-MHC mRNA表达显著低于手术组及PD123319组(P＜0.05),valsartan组cain/cabin1高于手术组及PD123319组(P＜0.05),u-calpain蛋白表达及CaN磷酸化、cain/cabin1蛋白表达及β-MHC mRNA表达手术组与PD123319组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 压力超负荷下, 心肌组织中的calpain降解cain/cabin1,进而激活CaN信号通路,参与心肌肥厚的病理过程,主要通过AT1起作用.
-
Lactoferricin B基因与几种变异克隆的构建及其在酿酒酵母中的表达与鉴定
目的 构建牛乳铁多肽(Lactoferricin B)的真核表达质粒pYES2/Lactoferricin B,实现其在酿酒酵母S.cerevisiae中的表达,并初步检测其不同变异的体外抗菌活性.方法 通过分别合成Lactoferricin B基因两条单链的部分序列,让其互为模板、引物进行PCR扩增,得到Lactoferricin B与3种变异的基因序列.将它们克隆到穿梭质粒pYES2中,构建pYES2/Lactoferricin B 及3种变异基因重组质粒,转化到大肠杆菌Top10中,让其大量增殖.提取重组质粒经纯化后将其转化到S.cerevisiae中,通过营养缺陷型筛选获得重组酵母菌并通过半乳糖诱导使其表达目的蛋白.经离子交换柱纯化收集目的蛋白后,通过体外抑菌实验比较Lactoferricin B及3种变异重组蛋白的抗菌活性.结果 经PCR扩增检验、DNA测序表明成功构建pYES2/Lactoferricin B与3种变异基因重组质粒.提取诱导后的蛋白进行SDS-PAGE电泳及质谱检测,证实目的蛋白的存在,相对分子质量约为3.4×103.在大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌的抑菌实验中观测到Lactoferricin B和A17-Lactoferricin B产生了抑菌圈.结论 成功构建pYES2/Lactoferricin B及变异基因重组质粒,该重组质粒能在S.cerevisiae中诱导表达目的蛋白,为进一步研究其生物功能及抗菌活性奠定了基础.
-
多孔聚乙烯醇水凝胶复合物的制备及其生物相容性的初步观察
目的 探讨多孔聚乙烯醇水凝胶复合物的制备,并观察其性能和生物相容性.方法 采用乳化发泡–冷冻固化-去除表面活性剂法获得多孔聚乙烯醇(PVA)、多孔聚乙烯醇/纳米羟基磷灰石(PVA/n-HA)、多孔聚乙烯醇/壳聚糖(PVA/Cs),并采用图像分析、力学测试、MTT法、肌肉植入实验检测材料性能和生物相容性.结果 3种多孔材料亲水性好、有相似的孔隙率(80%),但孔径以PVA/n-HA为小(154.5 μm),抗拉强度以PVA为大(0.60 Mpa);MTT法检测表明,3种材料细胞毒性为0级,且PVA的吸光值、细胞相对增殖率高于无材料的细胞对照组(P＜0.05);肌肉植入后,PVA/Cs除在第1周炎性反应略大外,在第4、12周炎性反应小,且在第4周观察到大量肌组织长入孔隙内,其余两种材料炎性反应小,在第1、4、12周均有纤维组织长入孔隙内.结论 3种支架均有较好的生物相容性、弹性和亲水性,添加n-HA和Cs后,材料孔径和力学性能有一定改变,其中PVA/Cs还具备成肌诱导活性,有望在需长期植入的组织工程中或作为组织填充物进一步发挥作用.
-
叶黄素对人食管鳞癌细胞诱导分化效应与机制探讨
目的 探讨叶黄素对食管癌EC9706 细胞诱导分化的影响及其机制.方法 食管癌EC9706细胞采用开放式单层贴壁培养.实验设溶剂对照及叶黄素3个剂量组,采用MTT法及流式细胞术,对EC9706 细胞的增殖和细胞周期进行分析,HE染色对细胞的形态学进行观察,酸解DNA甲绿-派洛宁技术了解增殖与分化型细胞比例,免疫组化检测cyclin D1的表达.结果 与溶剂对照组比较,叶黄素(100 μg/mL和150 μg/mL)可明显抑制EC9706 细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期, 降低细胞增殖指数,细胞形态趋向良性分化,cyclin D1 表达水平降低.结论 叶黄素可通过抑制cyclin D1 表达而介导食管癌EC9706细胞增殖抑制和诱导成熟分化.
-
影响内氏放线菌尿素酶活性相关因素的初步研究
目的 探讨多种生态环境因素对内氏放线菌尿素酶活性的影响.方法 采用生物化学的方法检测氮源物质、糖源物质、酸性环境对内氏放线菌尿素酶活性的影响.结果 当细菌生长环境中pH值呈弱酸性、或氮源物质缺乏或糖源物质丰富,内氏放线菌尿素酶活性均有不同程度提高.在pH6.0,氮源缺乏而糖源丰富的培养条件下,内氏放线菌尿素酶活性可高达149.7 nmol/min·mg cell protein.结论 氮源物质、糖源物质、pH值均是影响内氏放线菌尿素酶活性的环境因素;当牙菌斑致龋性增强时,内氏放线菌尿素活性表达可能也随之提高.
-
乙肝核酸疫苗对荷瘤小鼠免疫保护作用的实验研究
目的 观察乙肝病毒(hepatitis B virus, HBV)核酸疫苗pCMV-S2S免疫小鼠后的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答, 及对表达HBV preS2S抗原的SP2/0-S2S肿瘤细胞攻击的保护作用.方法 将BALB/c小鼠随机分为3组, 于0、4及8周分别接种pCMV-S2S(实验组)、乙肝表面抗原蛋白疫苗(HBsAg,对照组1)、空载质粒( pCMV,对照组2 )各3次.末次免疫后4周,每组各取3只小鼠,以乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL活性.各组其它小鼠均用于肿瘤细胞攻击实验:分别于一侧胁部皮下种植SP2/0-S2S细胞,同时于另一侧种植不表达HBV preS2S抗原的SP2/0-CMV 细胞作阴性对照.种植肿瘤细胞(荷瘤)后观察成瘤时间、肿瘤大小和荷瘤后小鼠的生存时间及生存率.结果 pCMV-S2S组CTL活性为(34.21±1.38)%,高于HBsAg组[(19.64±1.50)%]和pCMV组[(3.45±1.89)%](P＜0.05).荷瘤后10 d,pCMV-S2S组小鼠SP2/0-S2S细胞的成瘤率为58.3%,低于SP2/0-CMV细胞的成瘤率(91.7%)(P＜0.05);两对照组SP2/0-S2S细胞与SP2/0-CMV细胞的的成瘤率无明显差异.荷瘤后pCMV-S2S组初次出现死亡小鼠的时间为24 d,较两对照组均延迟了13 d,平均生存时间为(31±1) d,较两对照组延长(P＜0.05);4周生存率(75%)高于两对照组(P＜0.05), 两对照组之间生存时间及生存率差异无统计学意义.结论 HBV核酸疫苗pCMV-S2S能在小鼠体内诱生较强的特异性CTL活性,对荷瘤小鼠具有特异性免疫保护作用,可望用于HBV感染的免疫保护.
-
TLR4(896A＞G)基因错义突变与重型急性胰腺炎胰腺坏死组织感染的相关性研究
目的 研究Toll样受体4(TLR4) 896A＞G基因错义突变与重型急性胰腺炎(SAP)胰腺坏死组织感染的相关性.方法 采用错配PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法在SAP伴胰腺组织坏死的病人和健康自愿者人群中检测TLR4(896A＞G)的等位基因频率.结果 ①所有TLR4 (896A＞G)的基因突变均为杂合子;②SAP胰腺组织坏死伴胰腺感染组(50例) TLR4基因错义突变频率为20%,与健康志愿组TLR4基因错义突变频率5.6%相比,TLR4基因错义突变频率明显升高,差异有统计学意义(P=0.019);③在SAP伴感染病人中,TLR4基因错义突变组G-细菌感染率为44.1%(15/34),明显高于无TLR4基因错义突变组18.5%(15/81), 差异有统计学意义(P=0.04).结论 TLR4(896A＞G)基因错义突变与SAP胰腺坏死组织的感染相关联.
-
儿童臀肌挛缩对骨骼发育的影响
目的 探讨儿童臀肌挛缩对骨骼生长发育的影响.方法 对1995年5月至2005年6月我院收治的368例臀肌挛缩症患儿骨盆平片其中30例骨盆CT扫描,及200例非臀肌挛缩症患儿进行骨盆平片其中25例骨盆CT作对照分析.比较两组的骨盆X线平片及髋关节、髋臼指数、颈干角、CE角、骨盆闭孔形态以及有无髂骨纵向密度增强影等数据,并进行统计分析处理.结果 病例组68例发生骨盆倾斜, 321例(87.23%)骨盆平片见骶髂关节旁髂骨致密线,对照组仅见5例(2.5%).368例臀肌挛缩症患儿中,髂骨致密线出现于7岁以上组和7岁以下组分别为306例(306/314)和15例(15/54);出现于臀大肌挛缩为主组和臀中肌挛缩为主组分别为313例(313/336)和8例(8/32),差异均有统计学意义(P＜0.01).对照组中无骨盆倾斜发生.30例CT扫描显示在臀肌挛缩症患者,髂骨后部增厚、变形,外缘皮质斜面变小,近乎前后走行,25例对照组均无上述改变.经统计学分析,病例组术前与对照组测量CE角、颈干角、闭孔纵、横径的均数以及骨盆骶髂旁致密线的差异均有统计学意义(P＜0.01),术后与对照组测量上述指标差异均无统计学意义(P＞0.01).病例组术前后与对照组测髋臼指数差异无统计学意义(P＞0.01).结论 儿童臀肌挛缩会影响儿童骨骼生长发育,臀肌挛缩可导致不同程度的骨盆倾斜、髋外翻、肢体假性不等长以及CE角变大等改变.髂骨致密线可能是臀肌挛缩的一种影像学上的特征性改变.
-
PER1与RACK1蛋白作用位点分析
目的 筛选人下丘脑视交叉上核(SCN)区域内与PERIOD1(PER1)相互作用的新蛋白,研究RACK1与PER1的作用特点,明确其结合的关键结构域.方法 采用酵母双杂交方法,筛选得到人SCN区域内与PER1-PAS结构域相互作用的新蛋白,并构建5种表达不同长度RACK1片段的酵母文库质粒与PER1诱饵质粒共转染酵母AH109进行杂交,通过营养缺陷筛选、报告基因检测获得阳性克隆,并采用体外转录、免疫共沉淀实验证实阳性克隆蛋白间的相互作用.结果 酵母双杂交筛选得到人SCN区域内表达RACK1蛋白的克隆,重组RACK1表达质粒与PER-PAS诱饵质粒进行酵母双杂交筛选后得到三个阳性克隆:RACK1(WD1-7)、RACK1(WD4-7)和RACK1 (WD5-7),β-半乳糖苷酶测试阳性证实报告基因表达,免疫共沉淀结果显示阳性克隆与PER1蛋白间存在相互作用.结论 RACK1与PER1存在直接相互作用,RACK1含有7个WD40结构域,本研究发现与PER1结合的小区域位于Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ三个WD40结构域,提示其碳端序列为其结合的关键部位.
-
盐亭饮食及维生素对人食管癌细胞株生长增殖的影响
目的 采用血清生理学方法,观察添加维生素的盐亭食管癌高发区饮食喂饲大鼠血清对人食管癌细胞株Eca-109生长增殖的影响.方法 将SD大鼠随机分为6组,每组10只.分别喂饲大鼠常规饲料、盐亭饮食、盐亭饮食添加两组维生素[组合Ⅰ:维生素A、E、叶酸,组合Ⅱ:维生素A、E、叶酸、维生素B2(核黄素)、C;两组合均设高、低两个剂量].喂饲30 d后取大鼠血清培养人食管癌细胞株Eca-109和人正常肝上皮细胞株HL7702.采用MTT、3H-TDR掺入实验及流式细胞术研究不同饮食喂饲大鼠血清对两株细胞生长增殖的影响.结果 与小牛血清对照相比,大鼠常规饲料喂饲大鼠血清对两株细胞生长增殖作用相近(P＞0.05);盐亭饮食喂饲大鼠血清可促进Eca-109细胞生长增殖,但抑制HL7702细胞生长增殖;添加维生素后,高剂量维生素组抑制Eca-109细胞增殖和促进HL7702细胞增殖的作用均强于低剂量组(P＜0.05);高剂量组引起Eca-109细胞生长周期G1期阻滞,但可促进HL7702细胞进入S期及G2期(P＜0.05).结论 盐亭饮食可促进人食管癌细胞Eca-109 生长增殖,而添加维生素可逆转该作用,细胞生长周期G1期阻滞可能是维生素抑制癌细胞生长增殖的机制之一.
-
镀金对铜基合金桩核金属离子析出的影响
目的 研究镀金对铜基合金桩核在人工唾液中金属离子析出的影响.方法 ①用原子吸收光谱检测普通铜基合金桩核(对照组)、喷砂镀金铜基合金桩核(喷砂镀金组)、抛光镀金铜基合金桩核(抛光镀金组)在人工唾液中第1个月,第3个月,第6个月,第8个月镍离子(Ni)和铜离子(Cu)的析出量,比较镀金在不同时间段对铜基合金桩核离子析出的影响.②在第8个月磨去牙体组织,取出桩核,肉眼观察桩核表面氧化情况.结果 ①Ni的析出量:镀金组与对照组第6个月,第8个月差异有统计学意义;喷砂镀金组与抛光镀金组,4个时间段差异均没有统计学意义.Cu的析出量:镀金组与对照组第3个月、第6个月、第8个月差异有统计学意义;喷砂组与抛光组第1个月差异有统计学意义.镀金组金属离子析出量少于对照组.②随着浸泡时间的延长3组试样Ni 和Cu的析出量都增加,但第1个月和第3个月差异没有统计学意义,第3个月,第6个月与第8个月之间差异有统计学意义,第6个月增幅大,镀金组的增幅明显低于对照组.③肉眼观察:对照组桩核表面全部覆盖较厚黑色氧化层;镀金组近核边缘处和核下方桩颈1/3处有较薄散在的氧化层.结论 镀金表面处理能降低铜基合金桩核Ni 和Cu的析出量,减少表面氧化层形成,提高铜基合金桩核的生物相容性.
-
sGC-cGMP信号通路在CO介导的呼吸节律调节中的作用
目的 探讨可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)-环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路是否参与一氧化碳(CO)在延髓水平介导的呼吸节律调节.方法 电生理实验分为5组(每组n=8):单纯人工脑脊液(ACSF)对照组、外源性CO组、ODQ(sGC的选择性抑制剂)组、ODQ+CO组和二甲基亚砜(DMSO)组,制备SD大鼠离体延髓脑片标本,以舌下神经根节律性自发放电频率(burst frequency,BF)为指标,分别灌流以上药物,观察呼吸节律的变化;并以放射免疫方法检测单纯ACSF对照组、外源性CO组、ODQ组和ODQ+CO组给药后脑片cGMP水平的改变(每组n=6).结果 外源性CO可以使BF减慢(P＜0.05),cGMP水平升高(P＜0.05).ODQ使BF增快(P＜0.05),cGMP水平降低(P＜0.05).在灌流ODQ的同时给予CO,BF和cGMP水平均无明显变化(P＞0.05);给药结束后,BF增快(P＜0.05).结论 在延髓水平,sGC-cGMP信号通路在CO介导的呼吸节律调控中具有重要作用.
-
人体牙髓感觉功能昼夜节律性的增龄性变化
目的 探讨人体牙髓感觉昼夜节律的增龄性变化,以指导牙体牙髓疾病的诊断和治疗.方法 在24 h内7个等距间隔时间点,测定青年、中年、老年人下颌第一恒磨牙牙髓活力的阈值,运用Halberg余弦法分析各年龄组牙髓感觉功能的生物节律,并比较三者的差异.结果 青年、中年、老年人牙髓感觉功能均具有近似余弦的昼夜节律变化,且三者昼夜节律性的整体变化趋势一致,感觉阈值的高峰和低谷分别出现在0∶00点与12∶00点.牙髓感觉阈值的中值和昼夜节律的振幅为青年＞老年＞中年.结论 人体牙髓感觉功能昼夜节律性具有增龄性变化,从青年到中年,牙髓感觉阈值逐渐下降,并且牙髓感觉的昼夜波动幅度减小;从中年到老年,牙髓感觉阈值略有上升,昼夜波动幅度也略有增大.
-
siRNA 表达载体抑制宫颈癌SiHa细胞增殖的实验研究
目的 观察HPV16E7 siRNA表达载体对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响.方法 利用脂质体将HPV16E7特异性siRNA表达载体转染SiHa细胞,通过荧光定量RT-PCR检测E7 mRNA的变化;流式细胞仪检测E7蛋白的变化和细胞周期的分布;MTT法检测细胞增殖的变化.结果 HPV16E7 siRNA表达载体可明显抑制SiHa细胞E7 mRNA和E7蛋白的表达,抑制率分别为92.15%、84.30%;阻滞SiHa细胞由G1期进入S期;抑制细胞的生长.结论 HPV16E7 siRNA表达载体可以特异高效地抑制宫颈癌SiHa细胞E7基因的表达,从而调控肿瘤细胞周期,抑制肿瘤细胞增殖.
-
微植体支抗-骨界面的生物力学研究及微植体颈部优化设计探讨
目的 分析比较在正畸力载荷作用下,不同的微植体-骨界面的应力分布规律,为优化设计微植体的颈部构型提供依据.方法 螺旋CT扫描一完整成人干颅,采用Mimics软件三维重建,再导入ABAQUS6.5有限元分析软件,建立了初始稳定态、完全骨结合以及纤维骨性固位三种不同微植体-骨界面状态下的三维有限元模型,施加大小为2N的相同载荷并计算分析三种界面的应力分布情况.在微植体颈台以下1.5 mm范围内将其直径增粗0.2 mm,再对比计算分析三种界面上微植体颈部构型改变前后的应力分布状态变化情况.结果 在三种微植体-骨界面状态下,微植体周围的应力都主要集中分布在颈部,其中完全骨结合的微植体-骨界面应力分布水平低.微植体颈部经优化设计后,三种微植体-骨界面状态的颈部应力分布水平都有较大幅度的降低.结论 不同微植体-骨界面状态,以及微植体颈部(骨皮质部)直径均是影响微植体周围应力分布水平的重要因素.
-
体外循环中去白细胞血再灌注对犬缺血心肌能量代谢的影响
目的 观察去白细胞血再灌注对犬体外循环(CPB)中心肌能量代谢的影响.方法 18只犬随机分为对照组、全血组和去白细胞血组(去白组).分别于CPB前、阻断40 min、阻断60 min、开放30 min和开放60 min时,取心肌进行腺苷酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和线粒体肿胀度检测.结果 去白组在阻断60 min、开放30 min和60 min时SOD、GSH-PX、腺苷酸含量高于对照组和全血组(P＜0.01),而MPO、MDA和线粒体肿胀度均低于对照组和全血组(P＜0.01).结论 CPB中心肌能量代谢障碍,而应用去白细胞血再灌注缺血心肌能够明显改善缺血心脏的能量代谢,保护线粒体的结构与功能,从而减轻心肌缺血再灌注损伤.
-
低渗作用对人成骨样细胞MG63功能的影响
目的 本试验通过研究低渗透压的静牵张作用对成骨样细胞MG63的增殖能力、碱性磷酸酶活性以及[Ca2+]i的影响,探讨该应力形式下成骨样细胞MG63的力学响应特征.方法 用不同渗透压的低渗透液,对成骨样细胞MG63分别进行2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h持续牵张作用后,用MTT法检测细胞增殖情况,用ALP试剂盒检测ALP活性的变化,用钙试剂盒检测[Ca2+]i含量波动情况.结果 随着作用时间的延长,成骨样细胞MG63在277 mmol/L和240 mmol/L低渗透液的持续性膨胀作用下,其细胞增殖能力增强,[Ca2+]i、ALP活性缓慢增高;而细胞在163 mmol/L低渗液作用下,细胞增殖受到抑制,8 h时出现[Ca2+]i急剧升高,ALP活性明显高于其对照组.结论 低渗膨胀对MG63的增殖分化、ALP活性以及Ca2+-ATPase都有一定的影响作用,且Ca2+内流与ALP活性之间存在一定的相关性.
-
磁性附着体静磁场对人牙周膜细胞骨架影响的研究
目的 研究牙科磁性附着体静磁场对人牙周膜细胞骨架的影响.方法 采用细胞静磁场加载装置,模拟磁性附着体静磁场,对体外培养的人牙周膜细胞加载10 mT、120 mT静磁场12～60 h,采用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架形态,图像分析软件测定分析细胞面积、长宽比以及微丝蛋白(F-actin)含量.结果 加载10 mT、120 mT静磁场12～60 h后,随加载强度和加载时间增加,细胞微丝骨架变短,排列紊乱,细胞长宽比减小(P＜0.05),加载静磁场60 h后细胞面积减小(P＜0.05),加载12 h后F-actin含量较对照组下降(P＜0.05),而加载36、60 h后与对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 磁性附着体静磁场在本实验条件下能使人牙周膜细胞细胞骨架发生一定程度的改变.
-
妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织缺氧诱导因子HIF-1α、HIF-2α mRNA表达水平的研究
目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织上的表达,探讨其与ICP胎儿缺氧的关系.方法 ICP患者和正常晚孕妇女各20例, RT-PCR法检测两组胎盘组织上HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA的表达.结果 ICP患者胎盘组织HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA的表达和正常晚孕妇女差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 低氧条件下,ICP患者胎盘组织HIF蛋白合成的调节可能并不在mRNA表达水平,而在转录后水平.
-
112例Rh阴性孕妇妊娠结局分析
目的 探讨Rh阴性血型孕妇妊娠结局及其影响因素.方法 对四川大学华西第二医院1995年1月1日至2005年12月31日间住院分娩的112例Rh阴性孕妇临床资料进行回顾性分析,并抽取紧随Rh阴性孕妇后住院分娩的112例Rh阳性孕妇作对照.结果 Rh阴性孕妇早产、新生儿高胆红素血症发生率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).随产次及抗体效价增加新生儿溶血病发病率增高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 对Rh 阴性妇女孕前应进行宣教,孕后加强管理,尽量减少无效妊娠.孕期应定期监测Rh抗体效价,结合胎儿B超检查可预测新生儿溶血病的发生及严重程度,积极治疗可改善新生儿愈后,降低围产儿死亡率.
-
原发性中枢神经系统淋巴瘤-脑室周围型53例临床分析
目的 探讨原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)-脑室周围型的临床特点、诊断、治疗及预后.方法 对我院1996至2006年诊治的53例PCNSL-脑室周围型病例临床资料进行回顾性分析,术前患者均行头颅CT和/或MRI检查,术后经病理证实,术后均辅以放疗(全脑普放或γ刀)和/或化疗.结果 本组全切除18例(33.96%),近全切除25例(47.17%),部分切除10例(18.87%);45例(84.91%)术后症状及神经功能得到明显改善;随访51例,随访时间5～30月,短存活时间5月,长30月,中位生存时间20月.结论 PCNSL-脑室周围型恶性程度高,病程短,起病快,临床表现缺乏特异性,术前诊断较困难,预后较差,对放化疗敏感,手术结合放化疗可改善预后.
-
卵巢癌术后复发及腹膜转移的多排螺旋CT表现及其与血清CA125的关系
目的 探讨多排螺旋CT(MDCT)显示卵巢癌术后局部复发及远处转移的诊断价值.方法 选择我院经手术和病理确诊的原发性卵巢癌患者30例,其中术后及化疗后血清CA125持续升高者25例,正常5例.均行MDCT膈顶至盆底增强扫描,并采用多层面重组(MPR)等重建技术获得三维图像,观察并分析病变解剖部位、形态大小、强化特点等.结果 ① 30例患者中,盆腔术后局部复发9例(30%),MDCT表现为盆内术区强化肿块和局部肠壁不规则增厚并强化;腹膜种植转移10例(33.3%),右肝周腹膜不规则增厚及结节并有强化3例、肠系膜腹膜增厚及强化结节3例、胃结肠韧带上强化肿块2例、盆腹膜2例;其他包括肝转移2例、脾转移1例、腹主动脉旁淋巴结肿大1例、腹股沟淋巴结肿大2例、腹水5例、胸水2例、肺转移1例.卵巢癌术后以盆腔术区局部复发及腹膜种植转移为主.②血清CA125水平升高的25例患者中有22例MDCT检查有阳性发现(88.0%),正常的5例患者中有2例MDCT检查阳性(40.0%),血清CA125水平升高时MDCT阳性发现率较高(P＜0.05).结论 MDCT及其三维重建图像有助于明确卵巢癌术后盆内术区局部复发及远处转移;在卵巢癌术后化疗后,尤其是CA125水平升高时,可应用MDCT进行监测,并为下一步治疗方案提供依据.
-
5771份尿培养结果分析及药敏监测
目的 分析5771份尿培养结果及其体外药敏情况,为临床治疗和研究提供参考.方法 对我院近三年多临床尿培养结果和药敏情况进行分析.结果 培养阳性率为29.2%;分离阳性率较高的科室是外科(42.4%)和老年科(39.0%).病原细菌中81.1%为G-菌(857株),大肠埃希菌占绝对优势且17.7%产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星和三四代头孢菌素等的耐药率相对较低(＜25%),而对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星和复方磺胺甲恶唑的耐药率较高,分别为90.1%、85.5%、72.2%和72.2%.三年来大肠埃希菌对氨曲南、头孢他啶的耐药率呈逐年升高的趋势(χ2分别为12.5及12.1,P＜0.05).粪肠球菌、屎肠球菌和表皮葡萄球菌等的检出率逐年增加,肠球菌对多种抗生素耐药率＞50%,此外真菌性尿路感染也不容忽视.结论 尿路感染常见的病原菌仍是大肠埃希菌;细菌耐药性监测对指导临床合理用药具有重要意义.
-
慢性阻塞性肺疾病急性加重期病原菌检出情况与病情评估
目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期病原菌的分布、耐药情况与患者临床肺功能损伤情况、BODE积分之间的关系.方法 对2005年3月～9月我院慢性阻塞性肺疾病急性加重的患者108例合格痰标本进行细菌和真菌培养,对细菌培养阳性者作菌落鉴别和以K-B琼脂扩散法检测药物敏感性.所有患者均行肺功能检查并进行BODE指数评测.结果 108例患者的痰标本共分离出致病菌184株,其中G-菌117株(63.6%);G+菌38株(20.7%);真菌29株(15.8%).G-菌主要以铜绿假单胞菌为主(42株),该类细菌对酶抑制剂复方制剂、四代头孢、碳青酶烯类敏感.极重度COPD患者G-菌、真菌的检出率明显高于中重度COPD患者; BODE积分越高的患者G-菌和真菌的检出率也越高.结论 慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸道感染仍以G-菌为主,其中以铜绿假单胞菌、大肠杆菌、克雷伯杆菌、不动杆菌多见,酶抑制剂复方制剂及碳青酶烯类是治疗该类细菌的有效抗生素.G-菌(铜绿假单胞菌)和真菌可能是肺功能差、病情危重患者的优势菌.
-
心因性非癫痫性发作时的症状学研究
目的 探讨心因性非癫痫性发作(PNES)的临床症状学,并对其进行分类.方法 对16例诊断PNES患者的视频脑电图录像(VEEG)资料进行分析.所有的连续变量均计算均数,并用聚类分析对症状进行分类.结果 16例患者VEEG监测时间共226 h 38 min,平均每人监测14 h左右.监测中共记录到53次发作.PNES症状包括:过度运动、肢体抖动、肢体痉挛、头部运动、跌倒、过度换气、发声.运用聚类分析,可将心因性非癫痫性发作症状归为三类:第一类为过度运动、头部运动、过度换气及发声,称为大运动发作类;第二类为肢体抖动及肢体痉挛,称为小运动发作类;第三类表现为跌倒,称为无显著运动发作类.结论 PNES的症状学及其分类的研究可能对临床诊断PNES及与癫痫鉴别有帮助.
-
头高位对0.75%罗哌卡因蛛网膜下腔阻滞平面的影响
目的 观察头高位对0.75%罗哌卡因蛛网膜下腔阻滞平面的影响.方法 80例择期行下腹部以下手术的患者随机分4组:Ⅰ组麻醉时手术床置水平位;Ⅱ～Ⅳ组麻醉时手术床置头高25°;4组注药后分别于0、2.5、5、7.5 min转为水平仰卧位.每组药量均为0.75%罗哌卡因原液3 mL,注药速度1 mL/5 s.观察腰麻注药后麻醉起效时间以及0、2.5、5、7.5、10、12.5、15、20、25、30 min的痛觉减退平面(镇痛平面)和麻醉阻滞平面(痛觉消失平面)、镇痛向头延伸时间和向尾延伸时间、运动阻滞起效时间、大运动阻滞时间、Browage评分、腰麻后镇痛总时间和运动阻滞持续时间、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸(RR)、血氧饱合度(SpO2)等指标以及腰麻后出现的副反应.结果 各组SBP、DBP、MAP、HR、RR、SpO2等指标差异均无统计学意义,麻醉起效时间、镇痛向尾延伸时间、镇痛总时间、运动阻滞起效时间、大运动阻滞时间、运动阻滞持续时间均相似.镇痛向头延伸时间Ⅲ、Ⅳ组＞Ⅱ组＞Ⅰ组(P＜0.05).痛觉减退平面:Ⅳ组与Ⅱ、Ⅲ组相似,但较Ⅰ组高,且于注药后7.5 min开始差异有统计学意义(P＜0.05).麻醉阻滞平面:各组间7.5 min后有差异,20 min时明显,Ⅳ组较Ⅰ、Ⅱ组分别高2.6和1.2个节段而与Ⅲ组几乎相等.在Ⅳ组中,注药后2.5 min开始出现阻滞平面不对称,直至麻醉阻滞平面固定,左右两侧始终相差两个节段.结论 0.75%罗派卡因溶液在体温下属相对轻比重溶液,注药时取头高位,可使麻醉平面升高,头高位时间5 min已经足够.
-
COX-2和Survivin在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义
目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)和Survivin在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达及临床意义.方法 以免疫组化SP法检测43例B-NHL和10例良性淋巴结病变组织中COX-2和Survivin的表达.结果 COX-2和Survivin在B-NHL中的阳性表达率分别为55.8%(24/43)和69.8%(30/43),与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).Ⅲ/Ⅳ期B-NHL患者COX-2蛋白的表达要高于Ⅰ/Ⅱ期患者(P＜0.05).Survivin的表达在B-NHL的不同组织病理学等级和不同国际预后指数(IPI)间的差异有统计学意义(P＜0.05).Spearman相关分析表明COX-2的表达与Survivin的表达呈正相关(r=1.000, P=0.030).结论 COX-2和Survivin在B-NHL中表达上调以及两者之间的阳性表达密切相关,表明COX-2和Survivin在B-NHL的发生和发展中具有协同作用.
-
血脂正常者血清HDL亚类分布特征的研究
目的 研究血脂正常的成人血清高密度脂蛋白(HDL)亚类分布特征以及血脂对HDL亚类分布的影响.方法 采用双向电泳-免疫印迹方法检测血清HDL亚类含量,Kolmogorov-Smirnov检验HDL亚类分布类型、直线相关分析血清HDL亚类分布与血脂的关系.结果 在总人群血清preβ1-HDL、HDL3c、HDL3a、HDL2b呈正态分布,而preβ2-HDL、HDL3b、HDL2a呈偏态分布.但是,无论在男性或女性其HDL各亚类均呈正态分布.频率分布发现,在HDL2b含量低的组段内,男性在血脂正常的成人中的累积频率高于女性;而在HDL2b含量高的组段内,女性的累积频率显著高于男性.相关分析发现,血脂正常的男性及女性血清中preβ1-HDL含量与TG均呈显著正相关(P＜0.01,P＜0.05);HDL2b的含量与HDL-C呈显著正相关(P＜0.05,P＜0.01),而与TG、apoB100呈显著负相关( P＜0.05,P＜0.05).此外,随着TG含量升高或HDL-C含量降低,血清preβ1-HDL含量均呈增加趋势,HDL2b含量呈减少趋势.结论 血脂正常的成人血清preβ1-HDL、HDL3c、HDL3a、HDL2b含量呈正态分布,而preβ2-HDL、HDL3b、HDL2a含量呈偏态分布,血清TG、HDL-C水平对于HDL亚类分布具有重要的影响.
-
超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响
目的 比较超排卵对小鼠卵母细胞和胚胎发育潜能的影响.方法 建立超排卵妊娠小鼠模型,获取孕4 d胚胎,观察获取卵母细胞的数目、受精率、卵裂率、优质胚胎率和囊胚形成率,并与自然周期排卵小鼠的比较.结果 超排周期组获取的卵母细胞的数目高于自然周期组;超排周期组的受精率(88.57%)和卵裂率(92.17%)与自然周期组的受精率(92.86%)和卵裂率(96.70%)相似,但超排周期组的优质胚胎率(76.50%)和囊胚形成率(22.50%)低于自然周期组的优质胚胎率(88.64%)和囊胚形成率(43.18%).结论 超排卵能增加卵母细胞和胚胎的数量,不影响受精和卵裂,但会降低优质胚胎率和囊胚形成率,影响卵裂后胚胎的进一步发育的潜能.
-
成年大鼠嗅鞘细胞的原代培养与鉴定
目的 探索一种简便、经济实用的获得成年大鼠嗅鞘细胞的方法.方法 无菌条件下取2.5月龄的SD大鼠嗅球外二层,经分散后将细胞种植于含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中.采用差速贴壁和阿糖胞苷抑制相结合的方法培养.定期进行形态学观察并摄片.在培养第14 d行胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和神经生长因子受体(NGFRp75)的免疫细胞化学染色鉴定,并计算嗅鞘细胞的纯度.结果 培养的嗅鞘细胞呈双极、多突起形、扁圆形三种,其中扁圆形较少,嗅鞘细胞的纯度在90%以上.结论 差速贴壁和阿糖胞苷化学抑制相结合进行成年大鼠嗅鞘细胞原代培养是一种简便经济实用的方法,可获得高纯度的嗅鞘细胞.
-
工作场所安全氛围的测量及其效度与信度的评价
目的 建立工作场所安全氛围的量表评价方法,并验证其效度与信度.方法 根据预防性安全文化理论模式,构建7个维度共27个条目的量表;选取某人造板厂342名工人填写量表并调查研究对象过去一年的工伤事故发生情况;应用主成分因子分析、关联效度和同质性信度检验方法评价量表的效度与信度.结果 删除6个条目,21个条目组成的工作场所安全氛围量表由7个公因子支配,分别为员工的能力意识、沟通交流、工作组织环境、管理层支持、危险的判断、安全措施以及安全培训,累计贡献率达70.50%;各条目的公因子方差除一个条目为0.595,其余均高于0.6;方差分析显示,工伤事故发生与安全氛围总得分以及危险的判断、安全措施各得分有关(P＜0.05);安全氛围的总得分与各维度得分之间呈正相关(P＜0.01),相关系数分别为0.700、0.728、0.705、0.703、0.354、0.571、0.485;安全氛围量表总的Cronbach's α系数、分半Spearman-Brown系数、θ系数和Ω系数分别为0.879、0.790、0.979和0.712,说明量表内部一致性较好.结论 初步建立工作场所安全氛围的量表评价方法,该方法具有较好的信度和效度.
-
固态发酵贵州绿僵菌产壳聚糖酶的亲和层析纯化及其性质研究
目的 寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺.方法 将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析.结果 该菌株在发酵120 h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9) U.经亲和层析和分子筛分离可获得电泳纯的壳聚糖酶,酶活力回收率为43.52%.每克干培养基可获壳聚糖酶328 μg,比活达106.39 U/mg.酶蛋白相对分子质量为50.3×103.结论 固态发酵贵州绿僵菌生产壳聚糖酶可作为壳聚糖酶的新酶源.用交联壳聚糖树脂亲和层析、Cu2+洗脱和分子筛分离的方法可以纯化壳聚糖酶.
-
石蜡包埋组织快速DNA提取方法在诊断病理PCR分析中的应用研究
目的 改良石蜡组织DNA快速提取方法的流程,评价其提取效率,探讨其应用于病理诊断PCR分析的可行性.方法 选取包括淋巴瘤及反应性病变的52例存档蜡块,以缓冲液煮沸方法快速提取DNA,并以传统酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法作为对照,采用PCR反应扩增看家基因β-Globin以确定模板DNA质量,并通过测序确定结果的可靠性;同时根据临床病理诊断选择性的进行免疫球蛋白重链基因(IgH)或T细胞受体γ基因(TCRγ)重排检测.结果 快速法提取DNA的浓度虽低于对照方法,但β-Globin扩增效率与对照方法相比差异没有统计学意义(P＞0.05),对IgH和TCRγ重排的检出率与对照相比差异亦没有统计学意义(P均＞0.05).测序结果显示扩增片段与目的基因序列完全符合.DNA可在-20 ℃保存至少4周.结论 快速DNA提取法可以从存档的石蜡包埋组织中提供足量的PCR反应模板,结果稳定可靠,且省时省力,在病理诊断PCR分析中具有应用价值.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
