四川大学学报（医学版）杂志
Journal of Sichuan University(Medical Science Edition) 사천대학학보（의학판）
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嗜肺军团菌mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体的构建及表达
目的 选取嗜肺军团菌mip和flaA优势抗原表位基因,构建mip/ flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础.方法 运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如理化性质、亲水性、可塑性、抗原指数以及胞外区等方面进行分析,选择其活性表位可能存在的区域为优势抗原表位区.通过PCR扩增和T4连接酶构建pET-mip、pET-flaA和pET-mip/ flaA优势抗原表位基因融合表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.结果 Mip和FlaA都存在多个潜在的抗原表位位点,选取其优势抗原表位区域进行克隆和表达获得成功,并成功表达了mip/ flaA二联优势抗原表位融合蛋白.结论 DNA Star软件和Expasy在线蛋白分析系统能够成功预测嗜肺军团菌Mip和FlaA抗原的表位;选取其优势抗原表位成功构建了pET-mip/ flaA二联原核表达载体,并高效表达.
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ACE2在慢性间歇低氧肺组织氧化应激损伤中的作用
目的 观察血管紧张素转换酶2 (ACE2)在慢性间歇低氧(CIH)大鼠肺组织氧化应激损伤中的动态变化,探讨其在CIH肺损伤中可能的作用机制.方法 96只Wistar大鼠随机分为正常对照组(UC组)、CIH组、依达拉奉治疗组(NE组)、安慰剂(0.9％ NaCl)治疗组(NS组),并分为1周、2周、3周、4周4个时间亚组,每亚组6只大鼠.UC组暴露于空气中,CIH组、NE组及NS组分别暴露于CIH环境下,NE组每日给予依达拉奉注射液(3 mg/kg)尾静脉注射,NS组给予0.9％生理盐水(3 mg/kg)尾静脉注射.实验结束后,取各组大鼠肺组织标本,观察肺组织病理变化、应用免疫组化检测肺组织ACE2蛋白的表达,丙二醛(NDA)测定试剂盒检测MDA水平、实时荧光定量PCR法检测ACE2 mRNA、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)mRNA的表达.结果 UC组未见明显病理损害,而CIH组及NS组肺泡壁水肿增厚,肺泡萎缩不张,肺间质及支气管上皮内也可见中性粒细胞浸润,且随时间延长病理损伤逐渐加重,与NS相比NE组出现病理损伤的时间较晚且程度较轻;与UC组比较,CIH组及NS组MDA含量、AngⅡmRNA表达在观察时间点内均逐渐增加(P＜0.05),于4周达到高峰;而ACE2蛋白及ACE2 mRNA1周、2周呈逐渐增高趋势(P＜0.05),于2周时达到峰值,然后逐渐下降(P＜0.05);与NS组比较,NE组各指标升高幅度较低,依达拉奉能抑制CIH引起的各指标的的增加(P＜0.05);CIH组肺组织AngⅡmRNA水平与MDA含量均呈正相关(r=0.782,P＜0.01).结论 提示ACE2对慢性间歇低氧大鼠肺组织氧化应激损伤有一定的保护作用,其机理可能与对AngⅡ降解作用增强有关.
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钒暴露与hsp70-hom基因多态性对神经行为功能的交互作用研究
目的 探讨钒暴露与hsp70-hom基因多态性对作业人群神经行为的综合影响,为制订钒作业工人的健康保护措施提供依据.方法 整群抽样某钒制品及化工厂工人为研究对象,问卷调查收集人口学信息及钒暴露资料;神经行为核心测试组合(NCTB)法检测神经行为功能;限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(RFLP-PCR)法检测hsp70-hom基因型分布;主成分分析法构建神经行为功能综合指标(NBI).结果 ①钒暴露组在包括平均反应时间、视觉保留、数字跨度倒序、非利手提转捷度、目标追踪正确点数和总打点数及数字译码7个指标及NBI指数上,均以T/C基因型表现差(P＜0.05).②NBI异常的风险,C/C基因型是T/T基因型的1.748倍;而钒暴露组是对照组的3,048倍(P＜0.05);经年龄和文化程度调整后,钒暴露风险降低为1.879倍(P＜0.05),而基因未产生影响;③当基因多态和钒暴露双重因素作用时,钒暴露使NBI异常的风险为2.828倍(P＜0.05),而T/C基因型为4.577倍(P＜0.05);调整文化程度和年龄后,T/C基因型风险增加至7.777倍(P＜0.05),而钒暴露未见影响.④当钒暴露与T/C基因型共存时,对NBI指数存在明显交互作用,交互作用超额危险度为4.12倍,交互作用归因比为0.7,交互作用系数为6.45;经年龄调整后,依次为3.77倍、0.7和7.44;经年龄和文化程度同时调整后,依次为2.49倍、0.75,未得出交互作用系数.结论 具有T/C基因型的文化程度偏低的钒暴露工人尤其需要加强职业防护.
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苯并[α]芘及丁基羟基茴香醚对大鼠学习记忆能力影响研究
目的 探究苯并[α]芘(B[α]P)对海马学习记忆能力的毒性作用及丁基羟基茴香醚(BHA)对此的保护作用.方法 90只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、B[α]P处理组[(2 mg/(kg·d)]、BHA处理组[50 mg/(kg·d)]和B[α]P+BHA联合处理组.按分组及大鼠体质量给予相应剂量灌胃处理(空白对照组、溶剂对照组用等量生理盐水、花生油处理),1次/d,持续90 d.暴露90 d后采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力;处死大鼠,剥离脑组织,检测海马组织丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、ATP酶活性及海马突触体内Ca2+浓度.结果 Morris水迷宫行为学测试结果显示,与其他组相比,B[α]P组逃避潜伏期增加,跨平台次数减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);海马中MDA [(2.46±0.39) nmol/mg prot.]含量及Ca2+浓度[(146.3±16.68) nmol/L]升高,而SOD[( 76.1±11.42) nmol/mg prot.]和ATP酶活性降低(P均＜0.05).B[α]P+BHA联合处理组较B[α]P组各指标改善(P均＜o.05),且与溶剂对照组比较,差异无统计学意义.结论 B[α]P引起的神经行为毒性作用可能与海马ATP酶活性降低及Ca2+浓度增加等氧化损伤有关,而BHA可防止此类损伤.
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老年慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清瘦素水平与机体代谢的相互影响
目的 评价在老年慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期患者中,血清瘦素水平与身体消耗和能量代谢之间的相互作用.方法 纳入2009年6月至2011年6月在四川大学华西医院住院及门诊治疗≥60岁的COPD稳定期患者共92例为COPD组,同时在成都市社区纳入≥60岁的健康老年男性80例作为对照组,测定体质量指数(BMI)、脂肪含量、静息能量消耗、肺功能、血清瘦素和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,对两组人群的各项指标进行统计分析.结果 与对照组相比,COPD组患者男性和女性BMI均降低(P＜0.05),血清瘦素水平亦降低(P=0.000),而两组间的静息能量消耗和炎性因子TNF-α差异并无统计学意义,矫正BMI和脂肪体质量百分比后,两组人群血清瘦素水平差异无统计学意义.而在老年COPD患者人群中,血清瘦素水平与BMI和脂肪含量呈正相关,与血清TNF-α水平无关.结论 老年COPD稳定期患者血清瘦素水平降低与体质量和脂肪含量下降有关,与TNF-α水平无关.
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葎草花粉主要变应原Hum s1的表达、纯化与结构预测
目的 克隆、表达、纯化葎草花粉主要变应原Hum s1,预测、分析其蛋白结构及功能,为评估该重组变应原的诊断及治疗效果奠定基础.方法 采用PCR扩增目的基因Hum s1,并将Hum s1通过Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ位点克隆到pET32a表达载体,转化到克隆菌株E.coli DH5α,用PCR验证重组载体,并将表达载体转化至表达菌株E.coli BL-21,IPTG诱导表达目标基因,利用快速蛋白液相色谱技术纯化融合蛋白,并对表达蛋白的结构与功能进行预测分析.结果 成功构建原核表达质粒pET32a-G2,并表达纯化葎草花粉主要变应原Hum s1,纯度达90％以上.分析其结构含有3个潜在的抗原表位,2个EF-手型结构域,成功构建其三维模型.ELESA试验证明重组蛋白能与葎草花粉过敏患者血清结合,具有免疫学活性.结论 成功构建了葎草花粉变应原Hum s1的原核表达载体,表达并纯化了重组蛋白,并通过生物信息学方法获得了目的蛋白的抗原表位和三维结构模型,为进一步开展重组疫苗研究奠定了基础.
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阿霉素对模式生物斑马鱼中abcb4基因表达的影响
目的 选择斑马鱼作为实验对象,研究阿霉素(doxorubicin,DOX)对其abcb4基因表达的影响,进一步了解abcb4基因在斑马鱼多药耐药机制中可能的作用.方法 分别以2 mL/L二甲基亚砜(DMSO),10 μmol/LDOX及含2 mL/LDMSO的10 μmol/L DOX对斑马鱼胚胎进行药物处理,另以Eggwater处理的胚胎作为对照组.将正常发育的4～16个细胞期斑马鱼胚胎,随机分入以上各组中,药物处理至120 hpf.收集药物处理下的斑马鱼不同时期胚胎运用实时荧光定量PCR和胚胎原位杂交技术,检测abcb4基因在斑马鱼中的表达变化情况.结果 相较于对照组,药物处理的斑马鱼胚胎abcb4基因mRNA表达水平升高(P＜0.05),而abcb5基因mRNA表达情况则无明显变化.通过斑马鱼胚胎原位杂交,均在斑马鱼120 hpf胚胎小肠部位发现有abcb4基因阳性杂交信号,且药物处理的斑马鱼胚胎在脑及心脏部位发现abcb4基因阳性杂交信号.结论 DOX能诱导斑马鱼胚胎abcb4基因表达水平增高,对阐明abcb4基因在斑马鱼多药耐药产生机制中的作用具有重要意义.
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MiR-130a在上皮性卵巢癌铂类敏感与耐药患者血清中的表达及相关机制研究
目的 分析miR-130a在上皮性卵巢癌铂类敏感与耐药患者血清中的表达情况,探讨其耐药的相关机制.方法 选取32例上皮性卵巢癌铂类化疗耐药患者及30例化疗敏感患者,采用实时荧光定量PCR检测受试者血清中miR-130a表达差异,ELISA法检测血清中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BC L-2)表达情况.结果 耐药组患者血清miR-130a和BCL-2表达均高于敏感组,而PTEN表达低于敏感组(P均＜0.05).且随着组织学分级增加及淋巴转移的发生,耐药组患者血清miR-130a表达量显著升高(P＜0.05).结论 MiR-130a可能通过抑制PTEN激活PI3K/AKT信号通路、上调BCL-2抑制肿瘤细胞凋亡参与上皮性卵巢癌铂类化疗耐药的产生,miR-130a有望成为逆转上皮性卵巢癌化疗耐药的基因治疗新靶点.
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基于反向传播神经网络的前列腺癌诊断系统的诊断价值
目的 探讨基于反向传播(BP)神经网络的前列腺癌诊断系统的诊断价值.方法 收集2008年1月至2011年9月四川大学华西医院收治的941例经直肠超声检查并行穿刺活检的前列腺疾病患者的临床病理资料,在MATLAB软件中采用年龄、经直肠超声检查指标和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)构建基于BP神经网络的前列腺癌诊断系统,以穿刺活检结果为“金标准”,分析该诊断系统对前列腺癌的诊断价值.结果941例前列腺疾病患者中,前列腺癌358例(38.04％),非前列腺癌583例(61.96％).BP神经网络对前列腺癌预测的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值分别为78.57％ 、92.94％、87.23％、88.0o％、86.81％.结论基于BP神经网络的年龄、经直肠超声检查联合血清PSA对前列腺癌的诊断价值高,可作为临床辅助诊断前列腺癌的重要手段.
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两种规格国产乌苯美司胶囊的人体生物等效性研究
目的 评价国产变更生产工艺后两种规格的乌苯美司胶囊与日本原研产品的生物等效性.方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS法)测定24例健康男性受试者三交叉单剂口服两种试验制剂T1(10 mg/粒)、T2(30 mg/粒)和原研产品R(30 mg/粒)30 mg后不同时点血浆中乌苯美司浓度,利用WinNonlin6.1软件进行药代动力学参数计算和生物等效性评价.结果 1例受试者因未依从方案服药而被剔除,余下23例受试者口服试验制剂T1、T2和原研产品R 30 mg后,血浆中乌苯美司的峰浓度(Cmax)分别为(2 646.73±454.09) ng/mL、(2 675.91±474.32) ng/mL、(2 432.79±544.32) ng/mL;达峰时间(Tmax)分别为(0.68±0.23)h、(0.76±0.19)h、(0.77±0.26)h;曲线下面积AUC0-t分别为(3 925.23±478.34) (ng·h)/mL、(3 804.62±448.84) (ng·h)/mL、(3 789.30±443.15) (ng·h)/mL;AUC0-∞分别为(3 938.31±479.54) (ng·h)/mL、(3 817.26±450.90)(ng·h)/mL、(3 800.90±444.77) (ng· h)/mL,药物清除率(CL/F)分别为(7.72±0.92) L/h、(7.97±0.98) L/h、(7.99±0.90) L/h,表观分布容积(Vd)分别为(26.08±9.20)L、(25.65±10.22)L、(26.03±10.05)L.T1、T2与R的相对生物利用度F0-t分别为(103.90±9.19)％、(100.77±9.36)％,F0-∞分别为(103.93±9.20)％、(100.79±9.33)％.结论 两种规格的国产乌苯美司胶囊均与日本原研产品具有生物等效性.
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VEGF对大鼠胰岛瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响
目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响.方法 用不同浓度(0、40、80、160 ng/mL) VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用Annexin Ⅴ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验,ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响.结果 不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24 h、48 h、72 h,其细胞活性均无明显变化(P＞0.05).但当VEGF浓度为80 ng/mL和160 ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(P＜0.01).高糖状态下当VEGF浓度为40 ng/mL时,VEGF对胰岛素的分泌具有抑制作用.不同浓度VEGF作用于INS-1细胞后,磺酰脲类受体基因(sulfonylurea receptor,Sur)、内向整流性钾离子通道基因(inwardly rectifying potassium channel 6.2,Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因(glucokinase,GCK)的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2(glucose transporter 2,Glut2)表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势.结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索.
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连续性静脉-静脉血液滤过治疗山羊挤压综合征模型的建立
目的 建立山羊挤压综合征(CS)动物模型,并探讨连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗对肾功能及肾组织病理变化的影响.方法 12只山羊随机分为对照组、CS模型组、CVVH治疗组,每组4只.CS模型组与CVVH治疗组山羊于后肢肌肉注射50％甘油生理盐水溶液10 mL/kg建立CS模型(对照组注射等量生理盐水),1、2、8、12、24 h后检测血清肌酸激酶(sCK)和血肌酐(sCr),以sCK＞1 000 U/L,同时sCr＞2倍对照值判断为造模成功.造模1h后,CVVH治疗组于造模对侧股静脉留置单针双腔导管建立血管通路,采用智能化床旁肾脏替代治疗机进行CVVH治疗.血流量为100 mL/min,置换液流速为35 mL/(kg·h),以前稀释法输入,治疗23 h后(第24 h)处死动物,留取肾组织标本,光镜、电镜下观察肾组织病理组织结构变化;采用免疫组化染色检查caspase12蛋白表达变化及TUNEL染色对细胞凋亡进行检测.结果 造模山羊均于注射甘油后1h内出现酱油色小便,尿量较对照组明显减少.CS模型组与CVVH治疗组造模1h后血清sCr及sCK较对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05),提示造模成功.行CVVH治疗23 h(第24 h),sCK、sCr水平低于CS模型组(P＜0.05).光镜下CS模型组肾组织可见急性肾小管坏死表现,肾间质水肿,肾小球基本正常.电镜下模型组可见小管上皮细胞明显的染色质聚集,线粒体肿胀,内质网扩张等早期细胞凋亡征象,CVVH治疗组表现稍轻.CS模型组及CVVH治疗组caspase12表达高于对照组(P＜0.001),CVVH治疗组caspase12表达低于CS模型组(P＜0.05).TUNEL染色证实CS模型组山羊肾组织细胞凋亡比例明显增高,CVVH治疗组较模型组凋亡比例少.结论 通过肌肉注射50％甘油生理盐水溶液可建立山羊CS模型,早期行CVVH治疗可减缓肾功能恶化,减轻肾小管上皮细胞凋亡程度.
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孕早期血脂对妊娠期糖尿病影响的前瞻性研究
目的 探讨孕早期血脂对妊娠期糖尿病(GDM)发生的影响.方法 采用前瞻性队列研究方法,以成都地区354例单胎初产健康孕妇为研究对象,通过问卷调查收集其孕前相关信息,通过24 h膳食回顾法收集孕妇孕早期膳食数据,并运用营养计算器计算孕妇孕早期膳食总能量,于孕(12±1)周测定孕妇体质量以及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和空腹血糖(FBG)浓度,于孕24～28周进行糖耐量筛查(OGTT)试验及诊断GDM.采用多因素logistic回归方法分析孕早期血脂水平对GDM发生的影响,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析预测GDM的孕早期TG临界值.结果 GDM组孕妇孕早期TG、TC、LDL-C水平均高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组孕早期HDL-C水平差异无统计学意义(P＞0.05).控制混杂因素[妊娠年龄、一级亲属糖尿病家族史、孕前体质量指数(BMI)、孕早期膳食总能量等]后,多因素logistic回归分析显示:TG≥1.59 mmol/L水平组、TG 1.26～＜1.59 mmol/L水平组GDM发生风险分别是TG＜0.94 mmol/L水平组的3.86倍(95％可信区间:1.35～11.08)、2.46倍(95％可信区间:1.05～6.51),提示孕早期TG是GDM发生的危险因素.TG切点值在1.27 mmol/L时,ROC曲线下面积为0.634(95％可信区间:0.574～0.711),约登指数大,GDM筛查的灵敏度和特异度分别为67.1％、58.2％,提示1.27 mmol/L为孕早期TG预测GDM的临界值.结论 孕早期TG水平与GDM发生密切相关,应加强孕早期血脂监测和控制.
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含神经纤毛蛋白-1靶向序列的细胞穿透肽的合成及其与非小细胞肺癌的特异性结合研究
目的 设计一类具有C末端基序的新型肿瘤穿透肽YCCS,并检测其对非小细胞肺癌的靶向结合能力.方法 设计了融合肺癌靶向肽段CS及神经纤毛蛋白-1靶向肽段CRMP-1的新型多肽YCCS,采用Fmoc固相合成法合成多肽,并在多肽上标记荧光素FITC,以神经纤毛蛋白-1阳性的非小细胞肺癌A549、人乳腺癌MDA-MB-231,以及神经纤毛蛋白-1阴性的正常人肺成纤维细胞HBE135-E6E7、正常人肝细胞HL-7702为研究对象,观察荧光标记的多肽与A549细胞的特异性结合能力.结果 成功设计并合成了肿瘤穿透肽FITC-YCCS用于细胞结合研究,荧光细胞结合实验证实,在5 μmol/L浓度下,YCCS多肽能特异性的与非小细胞肺癌A549结合,而基本不与乳腺癌细胞及正常细胞结合.随多肽浓度升高,在20 μmol/L浓度下,YCCS多肽与乳腺癌细胞MDA-MB-231和肝细胞HL-7702出现少量结合.结论 本研究设计的肿瘤穿透肽YCCS在5μmol/L浓度下,可检测到对非小细胞肺癌A549具有特异性结合能力.
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TALENs介导的Nanog基因表达下调对宫颈癌HeLa细胞恶性行为的影响
目的 研究Nanog表达下调对宫颈癌HeLa细胞恶性行为的影响.方法 通过基因编辑工具转录激活样效应器核酸酶(TALENs)介导Nanog下调表达,基因测序分析Nanog的突变情况;挑取单个细胞培养以筛选出Nanog明显下调表达的单克隆HeLa细胞;RT-PCR检测mRNA表达水平;Western blot检测蛋白表达水平;HeLa细胞的集落形成能力、侵袭性及耐药性分别通过集落形成实验、Transwell侵袭实验及药物敏感性实验检测.结果 TALENs成功介导Nanog基因突变并导致其下调表达,Nanog突变的单克隆HeLa细胞NanogmRNA和蛋白表达水平较野生型HeLa细胞均下调表达(P＜0.05).Nanog突变单克隆HeLa细胞相对于野生型HeLa细胞表现出明显减弱的侵袭、集落形成及化疗药物抵抗能力(P＜0.05).结论 Nanog突变减弱HeLa细胞的恶性行为,下调或沉默Nanog表达有望成为一种新型的治疗宫颈癌策略.
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单发甲状腺微小乳头状癌对侧中央区淋巴结转移的危险因素
目的 探讨单发甲状腺微小乳头状癌(papillary thyroid micro-carcinoma,PTMC)对侧中央区淋巴结转移的可能危险因素.方法 回顾性分析2012年4月至2015年5月我科收治的318例病理确诊为单发PTMC并行“甲状腺全切+双侧中央区淋巴结清扫术”患者的临床病理资料,对侧中央区淋巴结转移的危险因素采用x2检验单因素分析及logistic回归多因素分析.结果 单发PTMC中同侧和对侧中央区淋巴结转移率分别为40.57％(129/318)、9.75％(31/318).单因素分析结果显示对侧中央区淋巴结转移与癌灶位于甲状腺下份、甲状腺被膜浸润、同侧中央区淋巴结转移及合并结节性甲状腺肿相关(P＜0.05),多因素分析结果显示癌灶位于甲状腺下份及同侧中央区淋巴结转移是对侧中央区淋巴结转移的独立危险因素(P＜0.05).结论 单发PTMC对侧中央区淋巴结转移率比较低,不应该常规行对侧中央区淋巴结清扫;癌灶位于甲状腺下份或同侧中央区淋巴结有转移者,可考虑行双侧中央区淋巴结清扫.
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中老年人群高尿酸血症与糖脂代谢紊乱及膳食因素的关系研究
目的 探讨中老年人群高尿酸血症和糖脂代谢紊乱及膳食因素之间的关系.方法 随机抽取183例社区卫生服务中心体检人员及241例住院呼吸类疾病患者为调查对象,调查两组人群高尿酸血症、糖脂代谢紊乱的患病情况,并采用半定量食物频率问卷了解非住院组调查对象的膳食状况.结果 ①两组人群中,男性高尿酸血症检出率均高于女性(P＜0.01).②男性、高血糖水平、高胆固醇血症、高甘油三酯血症,畜禽肉类、酒类、能量及脂类的过量摄入可能增加高尿酸血症的患病风险(P＜0.05);蔬果类的适量摄入可能降低高尿酸血症的患病风险(P＜0.01).结论 高尿酸血症与糖脂代谢紊乱及膳食因素关系密切.及早对高危人群进行糖脂代谢监测及膳食干预,对高尿酸血症防治有重要意义.
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中国人心脏瓣膜置换术后低强度抗凝治疗3000例随访1年报告
目的 研究中国人心脏瓣膜置换术后早期低强度抗凝的疗效.方法 对2011年1月至2012年3月间,北京阜外医院成人心脏中心和四川大学华西医院心外科有完整住院资料的3 000例瓣膜置换术后患者随访1年,分析抗凝治疗强度、方法及并发症等指标.结果 共2 657例获随访,随访率88.57％,随访总量1 725.1患者/年(Pty).华法林剂量0.625～12.0(2.68±6.45)mg/d;阜外医院国际标准比值(INR)实测均值为2.01±1.10,华西医院1.86±0.69,两院间实际抗凝强度(INR均值1.8～2.0)相似,差异无统计学意义(P=0.28).抗凝总并发症发生及死亡率分别为5.79％ Pty与0.12％ Pry;其中出血发生及死亡率分别为3.59％ Pty与0.12％Pty;严重性出血发生及死亡率分别为0.29％Pty与0.12％ Pty;栓塞发生及死亡率分别为2.03％ Pty与0.00％Pty,血栓形成发生及死亡率分别为0.29％ Pty与0.00％ Pty.结论 中国人心脏瓣膜置换术后采用低强度抗凝治疗(INR 1.5～2.5),取得了栓塞与血栓并发症发生率无明显增加,出血并发症发生及死亡率明显降低的疗效.国人抗凝治疗强度并无明显地域差别.
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ALDH1、Twist在胃腺癌组织中的表达及临床意义
目的 分析乙醛脱氢酶1 (ALDH1)、Twist在胃腺癌(GAC)组织中的表达及意义.方法 回顾性分析86例GAC患者临床病理资料及随访结果.对86例GAC标本及30例正常对照组织(随机选取其中30例GAC患者术中不含癌组织的切缘组织)采用原位杂交实验检测ALDH1、Twist mRNA表达,采用免疫组化染色法检测ALDH1、Twist、上皮间质转化相关因子E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,分析其与患者临床病理参数、术后生存时间的关系,探讨ALDH1、Twist的表达与上皮间质转化的关系.结果 GAC组织中ALDH1、Twist mRNA和蛋白的表达阳性率分别为57.0％、53.5％和60.5％、58.1％,与对照组之间差异有统计学意义(P＜0.05).ALDH1蛋白的表达与肿瘤的临床TNM分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),Twist蛋白的表达与肿瘤远处转移、淋巴结转移及浸润深度有关(P＜0.05).ALDH1、Twist的表达与E-cadherin的低表达和N-cadherin的高表达存在相关性.单因素分析表明TNM分期、淋巴结转移、远处转移、肿瘤大小、ALDH1和Twist的表达与GAC患者术后5年生存率相关(P均＜0.05).结论 GAC组织中ALDH1、Twist的检测对预测肿瘤侵袭转移、判断预后具有一定价值.
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基于ICF核心组合的芦山地震骨盆骨折伤员的功能评价
目的 探索骨骼肌肉系统ICF核心组合应用于芦山地震骨盆骨折伤员的可行性,为ICF核心组合在地震等自然灾害后骨折伤员中的应用提供初步研究证据.方法 采用骨骼肌肉系统ICF核心组合综合版,对2013年4月20～30日在四川大学华西医院就诊的10例芦山地震骨盆骨折伤员进行功能评价,数据以统计描述的方法进行分析.结果 骨盆骨折是芦山地震后较为严重的损伤,骨折类型复杂,合并伤多.在身体功能评价中,主要为骨盆骨折伤员的睡眠、能量和内在驱力、痛觉以及运动和皮肤修复功能的损伤.在身体结构评价中,主要为骨盆、躯干、下肢和皮肤结构的损伤.在活动与参与评价中,伤员表现为体位转换、行走、护理身体各部等活动的困难.结论 骨骼肌肉系统ICF核心组合能够为芦山地震后的骨盆骨折伤员提供一套相对全面的和系统的评价方法,从身体功能、结构以及活动和参与功能3个方面评估伤员的功能障碍情况.骨骼肌肉系统ICF核心组合如何有效的、针对性的应用于地震等自然灾害后骨盆骨折以及其他骨折伤员的康复评估有待进一步的临床研究.
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TKA术中不同时机使用止血带对患者造成的损伤比较
目的 比较全膝关节置换术(TKA)术中使用或全程使用止血带两种不同时间对患者术后局部炎性反应指标及局部软组织损伤的影响,探讨更适合患者术后恢复的止血带使用时机.方法 纳入2013年10～12月在四川大学华西医院关节外科中心行初次、单侧TKA的膝关节骨关节炎患者60例,随机分为2组,实验组术中仅在使用骨水泥安置假体过程中使用止血带,对照组采用全程使用止血带;于术前及术后1、3、5d分别检测两组患者血清C反应蛋白(CRP),白细胞介素-6、-8(IL-6、IL-8),乳酸,乳酸脱氢酶(LDH),肌酸磷酸激酶(CK)等实验室指标,视觉模拟(VAS)评分进行大腿和膝关节疼痛评估,并测量膝关节周径和活动度等临床指标.结果 两组患者均取得了相同手术效果(术后的膝关节活动度分别为实验组106.3°±8.1°,对照组为107.0°±9.2°,两组均无手术并发症发生).实验组术后第1、3d的CK,术后1、5d的乳酸水平低于对照组(P＜0.05),IL-6、IL-8、CRP等指标差异无统计学意义(P＞0.05),术后第1d实验组膝关节周径肿胀率低于对照组(P＜0.05),大腿和膝关节VAS评分、术后膝关节活动度之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TKA术中仅在安置骨水泥假体过程中使用止血带较全程使用止血带能够减轻炎性反应,减少局部软组织损伤,更加有利于患者术后恢复.
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126例Wilson's病患者临床特点分析
目的 分析总结Wilson's病(Wilson's disease,WD)患者临床特点,减少误诊,改善患者预后.方法 回顾性分析2008年1月至2014年12月我院收治的126例WD患者临床资料(主要包括临床表现、头部及腹部影像学检查),并进行分析总结.结果 126例WD患者中,男女比为75∶51,发病中位年龄21岁.10.3％(13/126)患者有WD家族史,87.3％(109/126)患者表现为神经精神系统症状,14.3％(18/126)患者以肝病为首发表现.126例WD患者血清铜蓝蛋白水平均低于200mg/L,其中铜蓝蛋白水平低于100 mg/L 121例(96.0％);在接受头部MRI检查患者中,92.7％(102/110)有异常;在接受腹部影像学检查患者中,88.9％(97/109)有异常;98.3％(115/117)患者裂隙灯角膜K-F环检查阳性;1例患者肝脏组织穿刺罗丹宁染色阳性.从发病到确诊的时间3d～19年,中位时间8个月,有20例(15.9％)患者曾经被误诊为其他系统疾病.结论 WD临床表现多样,在出现神经系统症状患者伴或不伴肝脏损害时,或临床不明原因的肝功能损害患者,均应考虑到此病的可能性,应进一步检测铜代谢相关指标、角膜K-F环,甚至肝脏组织穿刺活检以鉴别.
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女性生殖系统多原发恶性肿瘤48例临床分析
目的 探讨女性生殖系统多原发恶性肿瘤(MPMN)的临床病理特征、诊治和预后.方法 对2008年1月至2014年12月于四川大学华西第二医院妇产科就诊的48例女性生殖系统MPMN患者的临床病理资料进行回顾性分析.结果 48例患者中,同时性MPMN 42例,异时性MPMN 6例,中位年龄44岁;子宫内膜并发卵巢恶性肿瘤占56.3％(27/48),其中74.1％(20/27)的患者两癌均为子宫内膜样腺癌;47例患者行根治性手术治疗,1例未手术行化疗,47例行手术治疗的患者中40例术后进行化疗或放疗等辅助治疗;随访4～84个月,健在41例,死亡3例,失访4例,随访率90.7％.结论 女性生殖系统的多原发恶性肿瘤以子宫内膜并发卵巢恶性肿瘤为常见,早期诊断,以手术为主的综合治疗,定期复诊,对改善患者预后具有积极作用.
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加速康复外科对结直肠癌患者术后炎性反应及细胞免疫功能影响的随机对照研究
目的 探讨加速康复流程(FT)模式对结直肠癌患者术后炎性反应及细胞免疫功能的影响.方法 采用前瞻性随机对照研究,纳入2014年6～12月期间我院胃肠外科结直肠专业组收治的127例结直肠癌患者,其中采用FT模式管理的患者64例(FT组),采用传统流程管理的患者63例(传统组),比较两组患者术后炎性介质和免疫指标水平,康复指标及并发症发生率.结果 从炎性介质看,术后第1d、第4d及第6d,FT组患者炎性介质[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平均低于传统组(P＜0.05).从免疫指标看,术后第4d及第6d,FT组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平均优于传统组(P＜0.05).从康复指标及并发症看,FT组患者术后首次经肛门排气时间、首次排便时间均短于传统组(P＜0.05);FT组患者平均住院时间和术前等待时间均短于传统组(P＜0.05),但两组患者术后住院时间差异无统计学意义;FT组患者术后并发症总发生率低于传统组(4.69％ vs.14.29％,P＜0.05).结论 FT模式围术期管理能降低结直肠癌患者术后炎性反应,维护细胞免疫稳态,促进术后加速康复.
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复发盆腔器官脱垂的手术治疗
目的 探讨盆腔脏器脱垂(pelvic organ prolapse,POP)初次手术后的复发,以及再次手术治疗情况.方法 回顾性研究华西第二医院2006年1月至2013年1月收治手术治疗127例复发POP患者的临床资料,包括其初始治疗术式、复发情况、再次手术术式及预后.结果 127例复发患者术后随访1～8年,随访125例(2例失访),再次复发3例,其中1例为前盆底网片修补,2例为单纯阴道前后壁修补.结论 初次手术后复发的POP患者,再次手术治疗临床疗效较好.对于复发POP的手术治疗,应根据初始治疗的方式、复发部位、复发程度选用不同的治疗方法.
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儿童间歇性外斜视的临床特点及斜视矫正术后患儿双眼视功能的恢复
目的 探讨儿童间歇性外斜视的临床特点及手术治疗矫正后患者双眼视功能的恢复情况.方法 回顾性分析78例不同类型、不同年龄段儿童间歇性外斜视患者的临床特征,分析其术后双眼视功能恢复情况.结果 所有患者术后1～3 d总的正位率为82.05％(64/78).术后1～3 d 3～7岁组、8～12岁组和13～18岁组患者的手术正位率分别为86.20％(25/29)、82.76％(24/29)和75％(15/20);基本型、分开过强型和集合不足型手术正位率分别为92.59％(25/27)、84.85％(28/33)和72.22％(13/18);不同类型患者术后3个月时的同时视功能、融合功能及远立体视功能与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05);Titmus近立体视术前术后比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 选择合理的手术方式有利于提高患者的手术正位率,而选择合理的双眼视功能检测方法,早期治疗可以明显提高患者双眼视功能,进而达到功能性治愈.
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体检人群尿微量白蛋白肌酐比的临床意义
目的 探讨尿微量白蛋白肌酐比(mALB/Cr)在体检人群中的分布特征及其与相关代谢指标的关系.方法 收集2013年11月至2014年10月我院体检中心体检项目包括尿mALB/Cr的4 184例体检者的体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、腰围、臀围、腰臀比(WHR)、尿mALB/Cr及血糖(GLU)、血脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、肾功能[尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿酸(UA)、血清胱抑素C(Cys-C)、估计肾小球滤过率(eGFR)]、同型半胱氨酸(Hcy)等结果,分析尿mALB/Cr在体检人群中的分布特征,尿mALB/Cr与相关代谢指标的关系,微量白蛋白尿(MAU)发生的独立危险因素.结果 ①4 184例纳入分析的体检者的尿mALB/Cr中位数(四分位间距)为5.7(3.1～11.8)mg/g,其中男性5.4(3.0～11.3) mg/g,女性6.3(3.6～13.2) mg/g,男女性别间差异有统计学意义(P＜0.05).②体检者尿mALB/Cr总阳性率(mALB/Cr≥30 mg/g为阳性)为10.95％,其中男性10.96％,女性10.90％,男女性别间差异无统计学意义(P＞0.05).③尿mALB/Cr中位数与阳性率均随着年龄增加而升高.④按mALB/Cr＜30 mg/g、30～300 mg/g、＞300 mg/g分为正常、微量白蛋白尿、显性白蛋白尿3组,3组体检者间的年龄、BMI、SBP、DBP、腰围、WHR、GLU、HDL-C、TG、SCr、BUN、UA、eGFR、Cys-CR的差异均有统计学意义(P＜0.05).⑤Logistic多元回归分析显示年龄、SBP、WHR、GLU、TG的增加及eGFR的降低是微量白蛋白尿发生的独立危险因素.结论 体检人群中尿mALB/Cr异常率较高,年龄、血压、血糖、血脂升高及肾功能下降均可增加微量白蛋白尿发生的风险,应加强对高代谢综合征及中老年人群的尿mALB/Cr检测.
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经阴道子宫输卵管四维超声造影的不良反应分析及对策
目的 通过分析经阴道子宫输卵管四维超声造影(TV4D-HyCoSy)过程中患者的不良反应,总结归纳适当的应对措施.方法 选择2013年7月至2015年1月在四川大学华西第二医院超声科拟行TV4D-HyCoSy的不孕症患者,采用TV4D-HyCoSy评估输卵管的通畅性,观察记录患者术中的不良反应和采取的措施并进行随访.结果 共纳入163例患者,有154例患者完成检查.造影过程中腹部疼痛的Stacey量表分级为0级1例(0.65％),1级92例(59.74％),2级47例(30.52％),3级14例(9.09％),无4级不良反应.153例患者阴道少量点滴出血,1例患者阴道大量出血.对疼痛的患者采取暂停检查、休息、热敷、吸氧或注射阿托品等措施.阴道少量出血的患者可不用药并严密观察,阴道大量出血时服用止血药.所有患者的不良反应均在检查完成后7d内消失.结论 TV4D-HyCoSy的大部分不良反应患者能够耐受,严重不良反应率低,且能通过适当的治疗或休息后缓解.
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首次接受唑来膦酸治疗对骨质疏松患者血淋巴细胞计数的影响
目的 探究首次使用唑来膦酸治疗骨质疏松症患者白细胞计数的变化,寻找其预测指标.方法 对四川大学华西医院内分泌代谢科2009年10月至2015年2月首次使用唑来膦酸5 mg治疗骨质疏松症的住院患者的临床资料进行回顾性分析,比较所有患者静脉漓注唑来膦酸前及滴注后第3d血常规指标以及相关的影响因素.结果 253例患者入组.男性27例(10.7％),女性226例(89.3％),平均年龄(69.2±8.9)岁,其中女性患者平均绝经年龄为(48.3±3.9)岁,体质量指数(23.1±4.4) kg/m2,骨质疏松症相关病程为8 d～45年.给药后第3d,患者淋巴细胞计数下降(P＜0.001);而白细胞总数有下降趋势,中性粒细胞计数有上升趋势,但差异均无统计学意义(P＞0.05).给药前1,25(OH)2D、给药后3d内高体温与患者淋巴细胞计数下降幅度存在线性相关(标准偏回归系数分别为0.244和0.271,P分别为0.036和0.015).结论 首次采用静脉滴注唑来膦酸抗骨质疏松治疗后会出现淋巴细胞计数降低.用药前1,25(OH)2D水平、用药后发热的高体温对淋巴细胞计数降低有一定的预测价值.
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经食管超声心动图评估主动脉成像切面的临床探讨
目的 探讨经食管超声心动图(TEE)评估主动脉成像切面及其简化的操作流程.方法 纳入337例在我院心脏外科行手术治疗的患者,分别沿“食管中段”“食管上段”“食管下段”“胃底部”4个层面,逐一进行扫查.记录每一切面距离门齿的距离、成像角度等参数.结果 7例患者因TEE探头插入困难而退出,终共有330例患者完整采集主动脉超声图像,其中5例患者因气体干扰,食管上段切面采集困难,术中放置自制气管内水囊辅助而完成图像采集.所有超声切面采集平均耗时(15.6±3.8) min.不同主动脉成像切面中,探头距门齿距离、成像角度及管体指向变化不一,且主动脉壁随成像切面的变化而变化.结论 主动脉的超声评估是心脏外科术中的难点和重点,熟练掌握主动脉解剖及TEE成像规律,掌握灵活多变的检查方式,方能更好地开展术中TEE检查.
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结直肠癌腹水来源的exosome提取方法的比较
目的 比较两种从结直肠癌患者腹水中提取纯化exosome的方法,得出优方法.方法 分别采用蔗糖/重水密度梯度超速离心法和Exo-Quick提取法从结直肠癌患者腹水中提取exosome.利用投射电镜检测形态,Western blot技术检测exosome标记蛋白CD63、CD9,使用Nanodrop进行蛋白定量.结果 两种方法均可提取exosome,蛋白定量显示Exo-Quick提取法提取exosome蛋白浓度更高,单位体积腹水的提取获得率更高.结论 Exo-Quick提取法是一种操作简单、提纯纯度高、提取效率高的提取腹水exosome的方法.
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HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度
目的 建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中华法林对映异构体的浓度.方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral(R) MS-OD(50×2.1 mm,3μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min.采用负离子模式,电喷雾离子源(ESI),以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为(m/z)307.2→160.9和(m/z)228.9→185.1.结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2％～5.8％,批间RSD为2.5％～5.1％;方法回收率(96.1±5.6)％～(105.4±4.7)％,提取回收率80.7％～84.4％,内标基质效应校准后的基质效应RSD＜10％;S-华法林批内精密度RSD为3.7％～5.2％,批间RSD为3.2％～4.8％;方法回收率(98.3±5.1)％～(103.7±3.8)％,提取回收率81.3％～84.6％,内标基质效应校准后的基质效应RSD＜ 10％.低定量限均为0.1μg/mL.结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定.
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热层析成像联合超声检查对乳腺癌功能形态学的初步研究
目的 探讨热层析成像联合超声成像对乳腺癌的诊断效能.方法 对298例有乳腺肿块的患者分别进行乳腺超声与乳腺热层析成像检查,以病理诊断为金标准,判断热层析单独以及联合超声的诊断效能.结果 病理诊断出良性病例196例,恶性病例102例.超声检查诊断良性129例,恶性169例,敏感度99.02％,特异度62.78％,受试者工作曲线下面积0.814;热层析成像诊断良性179例,恶性119例,敏感度83.33％、特异度83.16％,受试者工作曲线下面积0.830;联合诊断良性192例,恶性106例,敏感度83.33％,特异度89.79％,受试者工作曲线下面积0.866;热层析成像检查与超声检查的非劣效性检验差异具有统计学意义(P＜0.001).结论 热层析成像仪对乳腺癌的诊断效能不差于超声检查,热层析成像联合超声检查可提高乳腺癌诊断的特异度和准确度.
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骶部皮毛窦并骶椎管内皮样囊肿致复发性化脓性脑膜炎1例报告
患儿,男,8月,因“发热9d,抽搐2次”入院.入院查体:神清,前囟隆起,张力高,颈阻阳性.血常规:白细胞10.6×109/L,中性粒细胞58.5％,C反应蛋白(CRP)93 mg/L.脑脊液有核细胞数8 200×106/L,中性粒细胞88％,蛋白1 907 mg/L,糖＜0.2 mmol/L.诊断:化脓性脑膜炎.入院后先以头孢曲松100 mg/(kg·d)抗感染,效果差,加用万古霉素60 mg/(kg·d).双瓶血培养及脑脊液报阳:大肠埃希氏菌ESBL(+),对碳青霉烯、氨基糖苷等敏感.
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妇科腹腔镜手术发生严重胃胀气1例报告
患者,女,28岁,体质量53.5 kg,身高166 cm,既往无食道及胃肠道疾病史.在气管插管全麻下进行腹腔镜右卵巢囊肿剥除术.患者术前严格禁饮禁食8h以上,麻醉诱导时面罩辅助通气压力＜15 cmH2O(1 cmH2O=0.98 kPa),气管插管顺利.气管导管套囊充气压力25 cmH2O,气管导管尖端距门齿22 cm,听诊双肺呼吸音清晰对称,气道阻力13 cmH2O.手术开始前患者体位由水平位调整为头低足高位.腹腔内操作开始前,镜头常规扫视腹腔内脏器无异常发现.
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口服替勃龙片引起脑梗塞1例报告
患者,女,45岁,因“潮热3+年,绝经2+年、失眠2+年”于2015年1月29日来我院就诊,行乳腺彩超:右乳腺体层内查见数个弱回声结节,大直径0.4 cm,位于9点距乳头2.2 cm,提示右乳内弱回声结节.阴道彩超:子宫前位,宫体大小2.3 cm×3.2 cm×3.2 cm,内膜居中,厚0.1cm(单层),肌壁回声均匀,未探及明显异常血流信号.双附件未见确切占位.行骨密度检查发现该患者的T-Score≥--1,骨密度正常.
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超声诊断剖宫产瘢痕双孕囊妊娠1例报告
患者,女,27岁,G7P2,两次剖宫产史.停经48 d,阴道少量流血6d,量增加1d,血HCG 59 987.4 IU/mL.超声见:宫腔中下份双孕囊,呈右前左后排列(图1),内分别查见长约0.5 cm及0.4 cm的胎芽,均见原始心管搏动.双孕囊下缘均突向剖宫产瘢痕处,该处肌壁薄处厚约0.22 cm,彩色多普勒示该处血流信号丰富(图2),阻力指数=0.65.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
