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放线共生放线杆菌显微形态学的研究
目的观察放线共生放线杆菌不同菌落菌株形态特点,探讨其致病的形态学基础.方法粗糙型和光滑型两种菌落形态的细菌固体培养2天～4天应用电子显微镜阴性染色的方法比较观察放线共生放线杆菌菌体表面结构特点.结果粗糙型菌落菌体菌毛丰富;刚刚转变后的光滑型菌落菌体仍可存在菌毛,但这种菌落继续传代菌毛可完全失去.菌毛表现为几种形态,细密或稀疏,也可成束状或网状.粗糙型菌体染色深,不均匀,菌体边缘不规则,视野不干净;多次传代后的光滑型菌落,菌体染色浅且均匀,菌体饱满透明,视野干净.粗糙型可以见到膜泡样的结构,但量很少.结论粗糙型和光滑型菌的菌体形态存在明显的差异,主要表现为菌毛.
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牙周炎的药物治疗进展与回顾
牙周炎一般可分为成年人牙周炎(Adult periodontitis,AP)与青少年牙周炎(Juvenile periodontitis,JP).大量的研究证明,牙周炎的发生主要与G-厌氧菌属及螺旋体等有密切关系,前者如产黑色素普氏菌(以往称产黑色素类杆菌)、牙龈卟啉菌(以往称牙龈类杆菌)、具核梭杆菌、放线共生放线杆菌及二氧化碳嗜纤维菌等.上列微生物可产生内毒素、白细胞毒素及酶类等有害物质使牙周组织破坏吸收,产生炎症[1～3 ].本文拟就牙周炎的药物治疗进展与回顾作一综述.
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放线共生放线杆菌粗糙型与光滑型菌落的主要外膜蛋白
目的:观察放线共生放线杆菌粗糙型与光滑型菌株菌体蛋白表达上的差异.方法:聚丙稀酰胺凝胶电泳观察两型细菌全细胞蛋白及超高速离心提取的细菌主要外膜蛋白差异.结果:全细胞蛋白电泳两型细菌蛋白带无明显差异;提取的主要外膜蛋白电泳粗糙型存在18 、29、45 kDa蛋白带,实验室参考菌株不存在,临床光滑型菌株存在少量.光滑型实验室参考菌株存在的蛋白带在所有实验菌株中均存在.结论:18、29、45 kDa蛋白带可能与放线共生放线杆菌粗糙型菌株相关.
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放线共生放线杆菌的分离、鉴定及耐药谱的测定
目的:探讨放线共生放线杆菌(A.a)分离、鉴定的方法,确定其耐药谱.方法:采用选择性培养基、厌氧培养技术及生化鉴定的方法从临床青少年牙周炎、成人快速进展型牙周炎及青少年严重牙龈炎患者的牙周袋内分离出A.a.在此基础上进行了10种抗生素对所分离的全部A.a菌株及1株标准菌株低抑菌浓度的检测.结果:共分离出24株A.a,其对庆大霉素、四环素、氨苄青霉素、丁氨卡那霉素及青霉素G呈现出不同程度的耐药性,但对罗红霉素、甲硝唑、链霉素、红霉素及头孢唑啉钠敏感.结论:罗红霉素、甲硝唑、链霉素、红霉素及头孢唑啉钠在治疗与A.a相关的牙周病能够发挥作用,本研究为A.a耐药性质粒的提取及鉴定打下了基础.
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放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白的提取及纯化
目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8 mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定.结果:目的包涵体蛋白经过3次4 mol·L-1尿素洗涤,6 mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP.结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体.
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血链球菌与牙周病的关系
牙周病是一种细菌感染性疾病,口腔中的细菌有400多种,大量的研究表明口腔微生态系不仅包括一些可疑的致病菌,如放线共生放线杆菌(A.actinomycetemcomitans)、牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)等,还包括许多"牙周有益菌"[1],有益菌与致病菌之间存在相互拮抗的生态关系,从而有利于保持或恢复牙周的健康状态.血链球菌(S.sanguis)是研究得多的一种"牙周有益菌",实验显示血链球菌具有拮抗牙周可疑致病菌的作用[2,3],机制主要与H2O2的产生有关,本文就近年有关血链球菌的研究状况做一综述.1.血链球菌与不同牙周健康状态之间的关系
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1株伴放线凝聚杆菌的鉴定
伴放线放线杆菌也称放线共生放线杆菌,属于巴斯德菌科,根据DNA同源性研究和16S rRNA序列分析,现划分到凝聚杆菌属,其中人放线杆菌、伴放线放线杆菌、脲放线杆菌与人类疾病有关[1].伴放线凝聚杆菌为革兰阴性苛养菌,在临床标本中较难分离与鉴定.笔者自1例诊断为"急性乳腺囊性增生症及急性感染"的住院患者乳腺脓液中分离出1株伴放线凝聚杆菌,现将其培养及鉴定过程报道如下.
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放线共生放线杆菌培养上清对成骨细胞分化及间隙连接通讯的影响
目的 探讨放线共生放线杆菌(actinobacillus actinomycetemcomitans,A.a)培养上清对成骨细胞分化以及细胞间隙连接通讯的影响.方法 在A.a培养上清中体外培养成骨细胞,中性红检测成骨细胞活性,RT-PCR检测成骨细胞分化标记,免疫组化观察Ⅰ型胶原蛋白表达,利用划痕标记荧光染料示踪(SLDT)法与Western blot检测Connexin43的表达,研究成骨细胞间隙连接通讯的变化.结果 20%以下浓度的A.a培养上清对成骨细胞无明显致死性.RT-PCR结果 显示A.a 培养上清中成骨细胞分化标记的表达降低.免疫组化结果 显示A.a 培养上清中成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达降低.SLDT法结果 显示 A.a 培养上清中成骨细胞荧光染料扩散低于对照组.Western blot检测结果 显示 A.a 培养上清中成骨细胞Connexin43表达降低.结论 A.a培养上清对成骨细胞分化及细胞间隙连接通讯有抑制作用.
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放线共生放线杆菌与牙周疾病
放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一,近年对其研究较多,并取得不少进展,本文着重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性,包括其传播特征、分类、毒性特征、检测方法、与牙周炎的关系及对临床治疗的指导作用.
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放线共生放线杆菌表面相关物质促进骨吸收的动物实验研究
目的:观察放线共生放线杆菌表面相关物质在骨吸收破坏中的作用.方法:用成年健康犬的C8、C7、C6、D6、D7、D8,去髓后将含500 mg/mL的放线共生放线杆菌表面相关物质溶解物过滤除菌后的无菌生理盐水注入根管中,对照组加入等量无菌生理盐水,术后1个月后观察.结果:实验组可见犬牙槽骨尖周骨质吸收,牙周膜纤维排列受到破坏,对照组无明显改变,两组均未见到细菌污染.结论:此物质有极强的骨吸收诱导活性,在细菌未到达组织时其可溶性对尖周组织产生连续的毒性作用.
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放线共生放线杆菌表面相关物质对成骨样细胞 Mc3T3-E1碱性磷酸酶和矿化能力的影响
目的:观察放线共生放线杆菌表面相关物质对Mc3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性的影响.方法:酶动力学方法 .结果:此物质明显抑制细胞的碱性磷酸酶活性,在100mg/L?浓度 7d时与对照组差别显著(P<0.05).结论:此物质在骨吸收过程中起重要作用.
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放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响
目的:观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响.方法:应用细胞计数法和扫描电镜观察法.结果:100mg/L组对人牙周膜成纤维细胞在根面附着有明显抑制作用,表现为正常牙根片上附着细胞数明显少于对照组(P<0.05) ;扫描电镜显示细胞生长数量减少,细胞突起伸展不充分.结论:此物质可抑制人牙周膜成纤维细胞在牙根面上的附着.
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放线共生放线杆菌的分型和基因鉴定方法
放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa) 是革兰氏阴性、兼性厌氧的球杆菌,它在牙周炎患者的牙周袋中检出率较高,有报告 90%'以上青少年牙周炎的牙周损害部位有此菌定居[1],因此, 被认为是与牙周炎,尤其是青少年牙周炎的发生紧密相关的口腔致病菌.但不同病种Aa的类型并不完全相同,说明其致病力存在差别,以下就Aa的几种分型方法和与临床牙周状况间关系加以综述.
