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灵芝粉抗肿瘤及提高机体免疫力作用的研究
目的研究破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉对小鼠移植性肿瘤和机体免疫功能方面的作用.方法分别以500、1000、1500mg/kg的破壁灵芝孢子粉和灵芝精粉,给小鼠经口连续灌胃20天后分别接种S-180、EAC瘤液(1×106个/ml)0.2ml.10天后,取肿瘤并进行NK细胞活性、单核-巨噬细胞功能测定.结果2种灵芝粉均能抑制肿瘤的生长,在同等剂量时,破壁型灵芝孢子粉的作用明显优于灵芝精粉,并能增强NK细胞活性,提高单核巨噬细胞的吞噬能力.结论破壁型灵芝孢子粉在抑制肿瘤作用和增强机体的免疫功能方面优于灵芝精粉.
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灵芝孢子提取物对裸鼠卵巢上皮性癌细胞生长的影响
目的：探讨破壁灵芝孢子提取物对裸鼠卵巢上皮性癌细胞生长的影响。方法建立裸鼠移植性人卵巢上皮性癌模型24只，随机分为对照组、紫杉醇组、灵芝组及灵芝+紫杉醇组，每组6只。比较各组肿瘤体积、平均瘤质量及抑瘤率。结果对照组瘤体体积增大明显，灵芝+紫杉醇组瘤体体积增大慢，差异有统计学意义（p＜0.01）；灵芝组、紫杉醇组、灵芝+紫杉醇组瘤质量低于对照组，其中灵芝+紫杉醇组平均瘤质量低，差异有统计学意义（p＜0.01）。灵芝+紫杉醇组抑瘤率高于紫杉醇组和灵芝组（p＜0.01）。结论灵芝孢子提取物具有抑制裸鼠卵巢上皮性癌细胞生长的作用，并增强化疗药物紫杉醇的作用。
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灵芝孢子治疗裸鼠卵巢癌过程中let-7的表达及意义
目的 研究破壁灵芝孢子提取物对裸鼠卵巢上皮性癌细胞的生长抑制作用、增强化疗药物紫杉醇作用的机制.方法 以人卵巢癌移植瘤为研究对象,以破壁灵芝孢子粉提取物为处理因素,应用实时荧光定量PCR方法检测实验组和对照组瘤体组织中let-7的表达情况.结果 let-7的阳性表达情况:在实验组瘤体组织中呈高表达,在对照组呈低表达;其中灵芝+紫杉醇组表达高,差异有统计学意义(F=9.51,P＜0.05).结论 灵芝孢子通过增强let-7的表达来诱导裸鼠卵巢上皮性癌细胞凋亡,抑制其增殖并增强化疗药物紫杉醇的作用.
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破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定
目的:测定破壁灵芝孢子粉中多糖的含量.方法:采用比色法测定.结果:比色法测定的线性范围为20.32ul/ml～121.92ul/ml,相关系数r=0.9982,平均回收率为100.36%,RSD为2.18%(n=5),重现性(RSD=2.75%)较好.结论:该方法准确、可靠、重现性较好,适用于破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定.
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灵芝孢子粉抗肝纤维化作用的实验研究
目的 观察破壁灵芝孢子粉对CCL4诱导的肝纤维化大鼠的影响.方法 CCL4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察破壁灵芝孢子粉对大鼠肝纤维化形成过程中转化生长因子β1、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响及肝脏组织学变化.结果 破壁灵芝孢子粉明显减少肝脏胶原沉积,可以明显降低TGF-β1、TIMP-1的表达(均P＜0.05).结论 破壁灵芝孢子粉可通过下调TGF-β1、TIMP-1抑制胶原合成及加强胶原分解,从而抑制肝纤维化形成.
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破壁灵芝孢子粉与雌二醇对肝功影响的比较研究
目的:通过比较破壁灵芝孢子粉与雌二醇对肝纤维化生化指标的影响,为治疗肝硬化提供参考.方法:CCl4诱导大鼠肝纤维化动物模型,分别观察破壁孢子粉与雌二醇对大鼠肝纤维化形成过程中血清AST、ALT、HA的影响.结果:AST、ALT、HA在各组间差异均有统计学意义(P＜0.05),进一步多组间两两比较LSD't分析结果显示差异也有统计学意义(P＜0.05).结论:高剂量组的破壁灵芝孢子粉降低效果是好的,其次是雌二醇组,后是低剂量组.
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破壁灵芝孢子粉对肝纤维化的影响研究
灵芝是药食两用菌,灵芝孢子粉不仅是延年益寿的营养食品,同时也具有养血安神,五脏俱归,气充血行之中药功效[1].我们通过灵芝孢子粉对肝功能的影响,证实灵芝孢子粉抗肝纤维化的作用,对于防治肝纤维化有一定的临床意义和应用前景.
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HPLC-ELSD法分析破壁灵芝孢子粉的多糖组成
目的 建立HPLC-ELSD法对破壁灵芝孢子粉中多糖的单糖组成进行分析.方法 采用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(83∶17);体积流量1.0 mL/min;进样量10 μL;柱温30℃;ELSD检测条件为漂移管温度85℃,载气体积流量2.0 mL/min.结果 岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的进样量对数与峰面积对数在一定范围内均呈现出较好的线性关系,回收率均在87.5％～97.4％之间,而且RSD(n=6)均小于2％.结论 该方法准确可靠,分离效果好,可用于破壁灵芝孢子粉多糖的单糖组成分析.
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破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞超微结构影响及抑制作用
目的:观察破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞(A549细胞)超微结构的影响及对生长的抑制作用.方法:选取A549细胞并采用离体实验研究破壁灵芝孢子粉对肺癌细胞的作用.利用透射电镜研究破壁灵芝孢子粉对A549细胞超微结构的影响;利用CCK-8研究破壁灵芝孢子粉对A549细胞生长的抑制作用;利用乳酸脱氢酶(LDH)研究破壁灵芝孢子粉对细胞膜通透性的影响.结果:透射电镜观察显示破壁灵芝孢子粉可进入A549细胞,细胞中线粒体出现肿胀等现象;10 mg/ml破壁灵芝孢子粉可导致大量A549细胞肿胀、崩解.CCK-8检测结果显示破壁灵芝孢子粉导致A549细胞的存活率明显下降.LDH检测显示破壁灵芝孢子粉可使A549细胞的LDH释放量明显增加,且存在浓度依赖关系.结论:破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞具有显著抑制作用.
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破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫性肝损伤模型小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度的影响
目的 探讨破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫性肝损伤模型小鼠血清谷丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝组织炎症程度的影响.方法 雄性Balb/c小鼠随机分成正常组10只,模型组、低剂量破壁灵芝孢子粉组(低灵组)、高剂量破壁灵芝孢子粉组(高灵组),各12只.除正常组外,其余各组用ConA 5mg/kg尾静脉注射,隔天1次,共2周,建立免疫性肝损伤小鼠模型.正常组和模型组小鼠分别用等容量生理盐水灌胃,低灵组及高灵组小鼠分别给予破壁灵芝孢子粉1.0g/kg、2.0g/kg灌胃.4周后检测各组小鼠血清ALT、AST水平及观察肝组织炎症程度.结果 低灵组、高灵组小鼠血清ALT、AST水平明显低于模型组[ALT:(129.62±44.65)U/L、(92.76±33.78)U/L比(201.78 ±62.47) U/L,P＜0.05;AST:(134.38±42.67) U/L、(101.76±34.56)U/L比(223.63±77.31)U/L,P＜0.05];高灵组小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度明显低于低灵组(P＜0.05);低灵组及高灵组小鼠肝细胞变性、坏死及炎症细胞浸润程度比模型组明显减轻(P＜0.05);结论 破壁灵芝孢子粉能改善ConA诱导免疫性肝损伤模型小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度.
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破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能影响的研究
目的 研究破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能的影响.方法 分别以0.125、0.25、0.75 g/kgbw剂量的破壁灵芝孢子粉经口给予ICR清洁级小鼠连续30 d后,测定ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化功能、迟发型变态反应、小鼠抗体生成细胞和溶血素水平、小鼠碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及NK细胞活性.结果 0.25、0.75g/kg·bw剂量的kg·bw破壁灵芝孢子粉能增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、并提高血清溶血素水平;0.25 g/kg·bw剂量的破壁灵芝孢子粉能促进DNBF诱导的小鼠迟发型变态反应、抗体生成细胞的生成,并增强碳廓清能力.结论 破壁灵芝孢子粉具有提高小鼠免疫力作用.
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气相色谱法测定破壁灵芝孢子粉类保健食品中8种残留溶剂
目的：建立直接进样气相色谱法测定破壁灵芝孢子粉类保健食品中8种有机溶剂残留量。方法采用Agilent DB-624（30 m ×0.53 mm，0.3μm）毛细管柱，氢火焰离子化检测器，柱温箱程序升温，对破壁灵芝孢子粉类保健食品中甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、乙酸乙酯、苯、正丁醇、二乙烯基苯的残留量进行检测。结果8种残留溶剂在19 min内得到较好分离。各残留溶剂在0.0034~4.5050 mg·mL-1范围内线性良好，相关系数均大于0.9997。各残留溶剂的回收率在93.00%~117.91%。结论该方法简便、快速、准确，适用于检测破壁灵芝孢子粉中8种有机溶剂的残留。
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石墨炉原子吸收法测定破壁灵芝孢子粉类保健品中的铅
目的 建立破壁灵芝孢子粉保健品中铅的湿法消解-石墨炉原子吸收测定方法,为保健食品质量控制提供检测依据.方法 样品经硝酸-过氧化氢消化体系与硝酸-高氯酸消化体系消解,优化原子吸收分光光度仪的原子化和灰化升温程序,比较1％磷酸二氢铵和1％磷酸二氢铵-0.06％硝酸镁基体改进剂,将佳的基体改进剂加入到样品消化液中,调整石墨炉原子吸收分光光度仪测定的好状态后测定.结果 测定浓度在0.0 μg/L ～ 50.0 μg/L,方法的线性关系良好,相关系数r =0.999 5,检出限为0.14 μg/L,相对标准偏差为4.6％ ～6.5％,样品的加标回收率为98％～110％.结论 该方法具有操作简单、快速简便、灵敏度和准确度高的优点,具有较高的实用性,为有效控制破壁灵芝孢子粉保健品中铅提供了依据,便于推广应用.
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灵芝螺旋藻片免疫调节功能研究
目的:观察灵芝螺旋藻片增强免疫力的功能作用.方法:经口给予0.083、0.83、2.5g/kg BW剂量的灵芝螺旋藻片30d,测定迟发型变态反应、抗体生成细胞数、半数溶血值和单核-巨噬细胞廓清影响试验.结果:灵芝螺旋藻片能提高小鼠的半数溶血值、小鼠抗体生成细胞数,即能增加体液免疫功能,能增强小鼠的迟发型变态反应,及增加细胞免疫功能;能提高小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清能力,增强非特异性免疫功能.结论:御坊堂牌灵芝螺旋藻片具有免疫调节功能作用.
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对灵芝孢子胶囊院内制剂物价制定的研究
灵芝孢子胶囊是由昆明医学院科研中试中心经云南省药监局批准生产的有批文的院内制剂.是以破壁灵芝孢子粉、紫芝灵芝提取物等加工制备的一种粉剂,灵芝孢子胶囊益气养血、安心神,健脾胃、心悸、失眠、头晕、神疲乏力、久咳气喘、胸闷痛.主治肿瘤、冠心病、神经衰弱、肝炎等.滇药制字(Z)20092433A号 .
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化疗联合中药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1表达的影响
目的 探讨磷酰胺(CTX)与破壁灵芝孢子粉联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1蛋白表达的影响,为转移性乳腺癌的分子诊断和临床用药治疗提供实验理论依据.方法 将乳腺癌细胞株MCF-7注入裸鼠体内,建立移植瘤模型.将24只移植瘤接种成功的裸鼠分为CTX模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组和生理盐水对照组,每组6只.观察各组裸鼠的一般情况、体重及移植瘤体积、重量,用免疫组化检测各组移植瘤细胞TMSG-1蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测各组移植瘤癌细胞凋亡情况.结果 CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组能有效抑制裸鼠皮下移植瘤体积及重量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的抑瘤率高于模型组(P<0.01);CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组移植瘤的TMSG-1蛋白表达明显高于对照组和模型组(P<0.05);流式细胞仪定量分析显示模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05).结论 破壁灵芝孢子粉与CTX联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长有显著抑制增殖和促凋亡作用,同时还可以上调TMSG-1蛋白的表达起到抗肿瘤转移作用.
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中药方剂1号对小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响
目的:观察中药方剂1号的免疫调节及抗氧化作用.方法:1、SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、阳性对照组(破壁灵芝孢子粉,1.0 g/kg)及中药方剂1号低(0.35g/kg)、中(0.70g/kg)、高(1.4g/kg)剂量组,灌胃给药1次/d,持续30 d;通过脾脏和胸腺指数、脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、碳廓清等指标考察中药方剂1号的免疫调节作用.2、SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组(D-半乳糖致过氧化损伤)、破壁灵芝孢子粉阳性对照组及中药方剂1号低、中、高剂量组,给药1次/d,持续30 d;检测脑组织SOD活性、MDA及LPO含量,western blotting分析脑组织胞核Nrf2蛋白表达.结果:与对照组比较,中药方剂1号高剂量组和破壁灵芝孢子粉组动物胸腺及脾脏指数显著升高,各给药组淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能均显著提高;中药方剂1号中、高剂量和阳性对照药能显著提高模型小鼠脑组织SOD活性、降低MDA和LPO含量、增加Nrf2蛋白表达,中药方剂1号低剂量能显著减少小鼠脑组织MDA含量,增加Nrf2蛋白含量.结论:中药方剂1号对免疫功能有良好的调节作用,同时可能通过调节脑组织Nrf2蛋白表达及其相关信号通路发挥抗氧化作用.
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破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫调节作用的实验研究
目的 探讨破壁灵芝孢子粉对小鼠的免疫调节作用.方法 分别以600,300,150mg/kgBW剂量的破壁灵芝孢子粉给小鼠连续灌胃30d后,分别测定刀豆蛋白(ConA)诱导的小鼠淋巴细胞转化功能、小鼠的迟发型变态反应、小鼠抗体生成细胞数和溶血素水平、单核-巨噬细胞碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及NK细胞活性.结果 破壁灵芝孢子粉能够增强小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用,提高小鼠的迟发型变态反应程度,促进小鼠的抗体生成细胞增殖,提高小鼠的血清溶血素水平,增强小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬能力.结论 破壁灵芝孢子粉具有增强小鼠免疫力的作用.
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活力胶囊的薄层色谱鉴别
目的 探讨活力胶囊的薄层定性方法.方法 采用薄层色谱法(TLC法)对制剂中人参、黄芪、破壁灵芝孢子粉及黑蚂蚁进行定性分析.结果 TLC法分离效果好,制剂中被测成分色谱分别在与对照品色谱对应的位置上显相同颜色的斑点.结论 TLC法专属性强、快速、简便、重现性好,可作为制剂质量控制的一种有效手段.
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灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和VEGF表达的比较研究
目的:比较灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:采用C57BL/6小鼠左前肢腋下皮下接种建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉各设3、2、1g/kg三个剂量组,连续灌胃给药18天.给药期间观察小鼠体重,记录肿瘤体积变化;末次给药后处死,取肿瘤、胸腺和脾脏,称重并计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数;HE染色观察肿瘤组织病理状况;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达.结果:灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉均有抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的作用,但破壁灵芝孢子粉(3、2g/kg)在提高荷瘤小鼠体重、脾指数、抑制肿瘤生长方面的效果优于灵芝孢子粉;破壁灵芝孢子粉能诱导肿瘤细胞凋亡,降低VEGF蛋白表达.结论:破壁灵芝孢子粉抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的效果优于灵芝孢子粉,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡、降低VEGF表达有关.
