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pendrin在慢性鼻-鼻窦炎黏膜中的表达及其与黏蛋白5AC表达的相关性
目的 探讨pendrin在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)中的表达及与黏蛋白5AC(MUC5AC)的相关性.方法 取伴或无息肉的CRS患者上颌窦窦口黏膜各30例分别作为伴息肉CRS组和无息肉CRS组、另取10例单纯性上颌窦囊肿患者的上颌窦口前壁近钩突部位的黏膜作为对照组,采用HE染色观察各组鼻窦黏膜的组织形态学改变,糖原过碘酸雪夫染色(PAS染色)检测各组鼻窦黏膜中总黏蛋白的表达情况,免疫组织化学方法、实时荧光定量PCR法和免疫印迹法检测各组鼻窦黏膜中pendrin和MUC5AC的表达情况.结果 在伴息肉CRS组和无息肉CRS组鼻窦黏膜中均可观察到黏膜增厚,杯状细胞增生,上皮纤毛部分缺失,腺体增生,炎性细胞浸润;pendrin蛋白主要表达于鼻窦黏膜上皮细胞的顶膜,其次为黏膜下腺体细胞;MUC5AC主要表达于鼻窦黏膜上皮的杯状细胞和假复层纤毛柱状细胞,少量表达于黏膜下腺体细胞.伴息肉CRS组和无息肉CRS组鼻窦黏膜中总黏蛋白、pendrin蛋白、MUC5AC阳性表达率(86.7％和80.0％比20.0％、73.3％和70.0％比10.0％、83.3％和76.7％比20.0％)、pendrin的mRNA及蛋白的相对表达水平(1.685±0.111和1.537±0.262比1.012±0.167及2.066±0.188、1.996±0.153比1.000±0.169)、MUC5AC的mRNA相对表达水平(1.861±0.718、1.562±0.428比1.004±0.094)均显著高于对照组(均P＜0.05).pendrin mRNA的表达水平与MUC5AC mRNA表达水平呈正相关(r=0.670,P=0.006和r=0.713,P=0.003).结论 在CRS黏膜中表达上调的pendrin与MUCSAC的表达增加有一定关联,前者可能是CRS中黏液高分泌的重要因子.
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Pendred综合征的临床表型与遗传学机制
耳聋-甲状腺肿综合征(Pendred综合征)是一种以感觉神经性耳聋、甲状腺肿及部分碘有机化障碍为特征的常染色体隐性遗传疾病,缘于编码pendrin的SLC26A4基因突变.Pendrin主要在甲状腺、内耳及肾脏内表达.在甲状腺内,pendrin分布于调节碘外排的甲状腺滤泡细胞游离缘膜.SLC26A4基因突变导致部分碘有机化障碍或许与滤泡腔内的碘离子减少有关.在肾脏内,pendrin则作为氯/碳酸氢盐泵以维持体内酸碱平衡.在内耳,pendrin参与阴离子转运及维持蜗内电位稳定.随着对pendrin研究的不断深入,其在甲状腺激素合成、肾脏内氯离子重吸收及内淋巴组成等方面的作用逐渐被人们所知晓.
关键词： Pendred综合征 pendrin SLC26A4 耳聋 甲状腺肿 -
Pendrin蛋白在甲状腺疾病中的研究进展
碘是甲状腺激素合成必不可少的原料,碘从血液中被转运到甲状腺滤泡中是由转运蛋白介导完成,目前研究表明主要有2个步骤:碘先从血液中转运到甲状腺细胞内,这一主动转运过程是由位于滤泡上皮细胞基底膜上的转运蛋白-钠碘同向转运体(Na+/I- symporter,NIS)催化的,这是甲状腺激素合成的第一步.
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不同碘水平时胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1对胎盘绒毛滋养层细胞钠碘转运体及pendrin mRNA表达的影响
目的 观察不同碘营养水平时胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和转化生长因子βⅠ(TGF-β1)对胎盘绒毛滋养层细胞(HPT-8)钠碘转运体(NIS)及pendrin mRNA表达的影响.方法 体外培养HPT-8细胞,取对数生长期细胞接种于细胞培养瓶,待细胞贴壁后根据加入培养液的不同碘含量(0、5、50、500、5000 μg/L)分为低碘1组、低碘2组、对照组、高碘1组和高碘2组.培养24h后,每组细胞再以原来的碘水平,分别加入IGF-Ⅰ(0.050 mg/L)、TGF-β1 (0.001 mg/L),即碘+IGF-Ⅰ和碘+TGF-β1.继续培养24 h后,提取细胞总RNA,反转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR方法检测HPT-8细胞NIS及pendrin mRNA的表达.结果 HPT-8细胞NIS mRNA的表达:在不同碘水平,单纯加碘时NIS mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=3.612,P＜0.01).其中低碘1组(0.44±0.21)NIS mRNA表达显著低于对照组(1.25±0.77,P＜ 0.01).在相同碘水平时,低碘1组、高碘1组NIS mRNA表达组内比较差异有统计学意义(F值分别为13.632、6.900,P均＜0.01).其中在低碘1组,碘+ IGF-Ⅰ(1.13±0.38)和碘+TGF-β1 (0.81±0.34) NIS mRNA表达高于单纯加碘(0.44±0.21,P＜ 0.01或＜0.05);在高碘1组,碘+TGF-β1 (0.62±0.30) NIS mRNA表达显著低于单纯加碘(1.23±0.91,P＜ 0.01).HPT-8细胞pendrin mRNA的表达:在不同碘水平,单纯加碘时pendrin mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=12.717,P＜0.01).其中低碘1组(0.59±0.15) pendrin mRNA表达显著低于对照组(1.03±0.14,P＜ 0.01),高碘1组(1.29±0.31)高于对照组(P＜0.05).在相同碘水平时,低碘1组、低碘2组、对照组、高碘1组pendrin mRNA表达组内比较差异有统计学意义(F值分别为12.588、4.588、8.679、8.445,P均＜0.01).其中在低碘1组、低碘2组和对照组,碘+IGF-Ⅰ(1.68±0.82、1.51±0.79、1.50±0.51) pendrin mRNA表达均高于单纯加碘(0.59±0.15、0.89±0.22、1.03±0.14,P均＜0.01);在高碘1组,碘+TGF-β1 (0.78±0.20) pendrin mRNA表达显著低于单纯加碘(1.29±0.31,P＜ 0.01).结论 在碘缺乏情况下,HPT-8细胞NIS、pendrin mRNA表达下降,摄碘能力下降;在轻度碘过量时,HPT-8细胞pendrin mRNA表达增加,摄碘能力增强.细胞因子IGF-Ⅰ及TGF-β1对于HPT-8细胞的碘转运能力均有一定的调节作用,即碘缺乏时增加碘的摄入,在碘过量时减少碘的摄入.
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不同碘水平时促甲状腺激素、人绒毛膜促性腺激素、雌二醇对胎盘绒毛滋养层细胞pendrin mRNA表达的影响
目的 观察不同碘营养水平时促甲状腺激素(TSH)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、雌二醇(E2)对体外培养人早孕胎盘绒毛滋养细胞(HPT-8)pendrin mRNA表达,即摄碘能力的影响.方法 采用细胞培养的方法,体外培养HPT-8细胞.取对数生长期细胞接种于六孔培养板,待细胞贴壁后按照加入培养液的含碘量不同(0、5、50、500、5000 μg/L)分为低碘1组、低碘2组、适碘组、高碘1组、高碘2组.培养24 h后,每组细胞再以原来的碘水平,在5种条件下进行培养:单纯碘、碘+ TSH(0.01 mg/L)、碘+HCG(5000 U/L)、碘+E2(0.1mg/L)和碘+HCG(5000 U/L)+ TSH(0.01 mg/L)+E2(0.1 mg/L).继续培养24 h后,提取细胞总RNA,反转录合成cDNA,通过实时荧光定量PCR方法检测HPT-8细胞pendrin mRNA表达水平.结果 在不同碘营养水平,单纯加碘、碘+ TSH、碘+E2、碘+HCG+ TSH+ E2时HPT-8细胞pendrin mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为8.43、9.91、30.37、7.34,P均＜0.01).其中单纯加碘时,低碘1组(1.00±0.11)pendrin mRNA表达显著低于适碘组(1.37±0.19,P＜ 0.01),低碘2组(1.67±0.25)高于适碘组(P＜0.05)；碘+E2时,高碘2组(13.37±6.48)pendrin mRNA表达显著高于适碘组(1.95±0.61,P＜0.01)；碘+HCG+ TSH+ E2时,低碘2组(2.26±1.32)pendrin mRNA表达显著高于适碘组(1.06±0.33,P＜ 0.01).在相同碘营养水平时,低碘1组、适碘组、高碘1组、高碘2组pendrin mRNA表达组内比较差异有统计学意义(F值分别为10.98、11.59、6.70、33.06,P均＜0.01).其中在高碘1组,碘+HCG+ TSH+ E2(1.10±0.26)pendrin mRNA表达低于单纯加碘(1.49±0.41,P＜0.05)；在高碘2组,碘+E2(13.37±6.48)pendrin mRNA表达显著高于单纯加碘(1.33±0.28,P＜ 0.01).结论 轻度碘缺乏条件下,HPT-8细胞处于代偿状态,pendrin mRNA表达增加,摄碘能力增强,重度碘缺乏条件下,HPT-8细胞处于失代偿状态,pendrin mRNA表达下降,摄碘能力下降.HCG和TSH对HPT-8细胞摄碘能力调控的意义不大,E2在重度高碘时,HPT-8细胞pendrin mRNA表达明显增加,摄碘能力增强为明显.三种激素共同作用时,在轻度碘缺乏时上调HPT-8细胞摄碘能力,轻度碘过量时下调HPT-8细胞摄碘能力.
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microRNA-33a靶向pendrin调控支气管哮喘气道黏液高分泌
目的:探讨microRNA-33a(miR-33a)在哮喘患儿及哮喘小鼠中的表达及其对气道黏液高分泌的作用.方法:RT-PCR检测哮喘患儿和健康儿童诱导痰,以及卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠和正常小鼠肺组织中miR-33a的表达;分别鼻滴miR-33a模拟物(miR-33a mimics)及其对照(mimics NC)至哮喘小鼠,ELISA检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)上清中IL-13、TNF-α及黏蛋白MUC5AC的表达,RT-PCR和western blot检测小鼠肺组织MUC5AC和pendrin(SLC26A4)的表达;双荧光素酶报告法验证miRNA-33a的靶基因.结果:哮喘患儿诱导痰及哮喘小鼠BALF中miR-33a表达显著降低(P＜0.05);哮喘小鼠BALF中嗜酸性粒细胞(Eosnophils,EOS)数目显著增加,IL-13、TNF-α和MUC5AC表达显著升高(P＜0.05);miR-33a mimics滴入导致EOS数目减少,IL-13、TNF-α和MUC5AC表达显著降低(P＜0.05),同时小鼠肺组织MUC5AC和pendrin显著下调(P ＜0.05);miR-33a mimics明显抑制pendrin(SLC26A4)野生型报告基因的荧光素酶活性(P＜ 0.05);pendrin(SLC26A4)过表达显著上调miR-33a mimics转染细胞中MUC5AC的表达(P＜0.05).结论:miR-33a通过靶向pendrin抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌.
关键词： microRNA-33a pendrin MUC5AC 气道黏液高分泌 -
碘转运体与甲状腺疾病
目的 探讨3种碘转运体的表达与甲状腺疾病的关系.方法 采用文献回顾的方法对钠碘同向转运体(Na+/I-symporter,NIS)、pendrin和人类顶膜碘转运体(human apical iodide transporter,hAIT)在各种甲状腺疾病的表达及临床相关性加以综述.结果 在正常甲状腺组织中,NIS表达于滤泡细胞基底质膜及侧质膜,pendrin及hAIT表达于滤泡细胞顶膜上.对于NIS的研究表明,在甲状腺癌组织中,NIS表达降低或是定位于胞浆;NIS基因突变是导致先天性甲状腺功能减退症的原因之一.pendrin的表达水平与滤泡功能相关:在Graves病和高功能腺瘤中,pendrin高表达,在甲状腺癌中其表达显著降低;在体外实验中其表达与甲状腺癌细胞系分化程度的相关性各文献报道不一.hAIT蛋白表达在高功能甲状腺组织中与正常组织差异不大,而在低功能甲状腺腺瘤中,其表达仅轻度降低或正常;在甲状腺癌中,其表达显著降低.结论 3种碘转运体表达异常与甲状腺疾病密切相关,但是其致病机理尚不完全清楚,引起3种碘转运体表达异常的原因也有待进一步研究.
