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两种方法检测血清低水平乙肝病毒表面抗原比较
目的:比较时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HB-sAg)的符合率.方法:分别用国产TRFIA试剂盒和ELISA试剂盒检测血清标本.结果:在234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0～0.5 ng/ml的临床标本中,两种方法检测HBsAg同时阳性共41例,其中TRFIA检测阳性有46例,ELISA检测阳性有66例,符合率为87.18%.结论:在国产试剂HBsAg中,TRFIA与ELISA相比,特异性较高但灵敏度较低,在临床应用中应注意0.2～0.5 ng/ml的低值.
关键词： 乙型肝炎 病毒表面抗原 时间分辨免疫荧光分析法 酶联免疫吸附试验 -
乙型肝炎病毒前S2抗原联合乙型肝炎两对半定量检测的意义
目的 探讨乙型肝炎病毒前S2抗原和乙型肝炎5项指标联合检测的临床意义.方法 采用ELISA法和时间分辨免疫荧光分析法分别对Pre-S2Ag定性和乙型肝炎5项指标定量检测.结果 244例感染组标本中,PreS2的阳性率为87.7%.在同一HBVFMs模式下,指标含量改变为常见,反映患者免疫力变化.HBVFMs各项指标的低含量存在,经常出在少见模式中,也是模式发生变化的主要人群.结论 PreS2-Ag是反映病毒复制情况比较敏感的指标.乙型肝炎5项指标定量可以检出较低浓度HBsAg,指导乙型肝炎疫苗的预防效果,动态观察病情和疗效的变化.
关键词： 肝炎病毒 乙型 前S2抗原 酶联免疫吸附试验 时间分辨免疫荧光分析法 -
TRFIA测定HCV的假阳性和解决方法
目的 了解时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测HCV的假阳性率,为临床检测HCV提供参考方法.方法 TRFIA法检测了3854份血清标本,筛选HCV结果为弱阳性的28份标本,用酶联免疫吸附试验(EL1SA)复核检测,复查ELISA为阳性的发阳性报告;ELISA法检测结果阴性者,用PCR法再次复查,阴性者发阴性报告.结果 TRFIA法检测HCV的假阳性率为0.441%(17/3854),而用PCR法再次复查后假阳性占总检测标本百分比降至0.415%(16/3854).结论 TRFIA法检测HCV假阳性偶有发生,绝大多数可以通过用ELISA法复检加以纠正.
关键词： 酶联免疫法 时间分辨免疫荧光分析法 HCV -
检测游离β-HCG时间分辨免疫荧光分析法的建立及临床应用
目的 建立一种快速灵敏的时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA),用于定量检测孕妇血清中游离β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的浓度.方法 包被游离β-HCG单克隆抗体,铕(Eu~(3+))标记抗β-HCG单克隆抗体,建立双抗体夹心法游离β-HCG TRFIA,对该试剂的各项指标进行评价.结果 低检测量＜0.06 ng/mL;线性检测范围为0.052～400 ng/mL;分析内和分析间变异系数分别为1.0%～6.4%、3.3%～5.1%;人黄体生成素(HLH)、人促甲状腺素(HTSH)、人促卵泡激素(HFSH)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)与本试剂的交叉反应率分别为0.04%、0.03%、0.05%和0.11%;1 043份孕妇血样用该试剂与进口同类试剂同时检测,2种试剂检测值具有显著相关性(r=0.990,P=0.000);血清样本2～8 ℃储存超过3 d,室温储存1 d或冻融2次,与新鲜样本比较,游离β-HCG浓度显著性增加(P＜0.05).结论 该试剂敏感性高、特异性强、操作简便快捷,具有良好的精密度,可以替代进口试剂用于临床样本的检测.为保证结果 的可靠性,应注意样本的保存条件.
关键词： 游离β人绒毛膜促性腺激素 时间分辨免疫荧光分析法 铕 产前筛查 -
HBsAg阳性的乙肝血清学标志物少见模式与HBV-DNA和肝功能的相关性研究
目的 探讨HBV感染者HBsAg阳性的血清学标志物少见模式与HBV-DNA、肝功能的关系.方法 采用时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)定量测定HBV标志物;采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HBV-DNA含量;采用全自动生化分析仪检测肝功能.结果 HBsAg阳性的少见模式表现为6种模式,以HBsAg(+)HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+)模式检出率高,占58.59%(75/128);在各少见模式中均不同程度地检出HBV-DNA,阳性率介于28%～100%之;HBsAg与HBsAb同时阳性者有119例,检出率达92.97%(119/128);HBeAg阳性组肝功能异常率和HBV-DNA阳性率明显高于HBeAg 阴性组(P＜0.05).结论 在HBsAg阳性的乙肝血清学标志物(HBV-M)检测结果的阳性组合中,除常见的"大三阳"和"小三阳"外,还存在多种其它模式,其中一些已成为常见模式.各种模式均存在病毒的复制.探讨HBV-M各种阳性组合模式及其HBV-DNA、肝功能生化指标检测结果的关系,对了解HBV病毒的免疫学变异,指导临床诊断和治疗,有重要意义.
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正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体浓度相关性研究
目的定量研究正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体(HBsAb)浓度相关性.方法 152例乙型肝炎表面抗原阴性产妇,分娩前24 h抽静脉血;其新生儿收集脐血.用酶联免疫吸附(ELISA)法检测母血HBsAb;用时间分辨免疫荧光分析(TRF)法测HBsAb定性阳性的母血及其相应脐血的HBsAb浓度.结果 ELISA法检测母血HBsAb阳性率为28.95%(44/152);TRF法测母血HBsAb浓度>10 mU/mL者41例(>10 mU/mL为阳性),与ELISA法相符率为93.18%(41/44),测母血HBsAb阳性对应脐血的HBsAb浓度>10 mU/mL者42例.44例母血HBsAb阳性组中,其相应脐血有68.18%(30/44)HBsAb浓度高于母血.结论正常妊娠晚期HBsAb可通过胎盘主动转运至胎儿体内,脐血中HBsAb浓度与母血呈显著正相关,且遵循妊娠晚期IgG胎盘转运的一般规律.
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单纯疱疹病毒IgM抗体（1＋2型）时间分辨免疫荧光分析法的建立
目的：利用时间分辨免疫荧光分析法研制单纯疱疹病毒IgM抗体（1＋2型）检测试剂盒。方法基于“捕获法”原理，在96孔酶标板上包被抗人IgM单克隆抗体，铕标记特异性单纯疱疹病毒1型和2型单克隆抗体作为示踪物，建立单纯疱疹病毒IgM抗体（1＋2型）检测试剂，并对自研试剂盒的各项性能进行评价，与同类试剂盒进行方法学比对试验。结果自研试剂盒的灵敏度与ELISA比较有较大的提高，分析内变异系数≤4．29％，分析间变异系数≤6．15％；血清盘检测结果与该血清盘说明书提供的Gull IFA试剂的测试结果一致；与进口酶免法试剂同时检测293份临床样本，自制试剂盒的临床敏感性达100％，临床特异性达98．88％，Kappa值为0．940（P＜0．001）。结论自研试剂盒灵敏度高、特异性强、精密度好，与商业化的同类产品检测结果一致性好，能满足临床应用的需要。
关键词： 单纯疱疹病毒 IgM抗体 时间分辨免疫荧光分析法 -
乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果分析
目的 探讨乙肝血清标志物(HBVM)与HBV-DNA定量的关系,为临床诊断及治疗提供有价值的判断标准.方法 采用聚合酶链反应和时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)分别对603例乙肝患者血清进行乙肝血清标志物(HBVM)与HBV-DNA定量检测.结果 HBV-DNA定量结果与乙型肝炎病毒血清标志物不同组合间存在一定差异,乙型肝炎"大三阳"病毒检出率为94.4%,明显高于其他各组,有显著性筹异(P值<0.01).结论 乙型肝炎患者HBsAg和HBeAg均为刚性模式HBV-DNA高于HBeAg阴性模式,乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA含量之间存在一定的相关性,进一步探索其规律,能更好指导临床正确治疗.
关键词： 乙型肝炎病毒 乙肝血清标志物 聚合酶链反应 时间分辨免疫荧光分析法 -
孕中期甲胎蛋白中位数的建立及临床应用研究
目的:建立孕14～20周甲胎蛋白(AFP)中位数.并使用唐氏综合征阳性病例进行验证分析.方法:使用AFP时间分辨免疫荧光法试剂检测21 278份正常单胎孕妇血清和21例唐氏综合征(DS)阳性孕妇血清.根据末次月经日期确定样本孕周,采用直接法计算AFP各孕周的中位数.以此为基础,计算阳性病例中倍数(MoM),并进行统计学分析.结果:AFP中位数水平与美国PE公司提供的白种人孕妇数据相比差异有显著性(P=0.000);分析DS病例,其母血AFP MoM值均值与正常孕妇相比差异有显著性(P=0.000).结论:本研究建立的中位数可以区分阳性和阴性病例,能有效应用于风险评估.
关键词： 甲胎蛋白 中位数 时间分辨免疫荧光分析法 产前筛查 血清标志物 -
加样时差及加样时间对时间分辨法检测弱阳性HBsAg标本的影响
目的:探讨加样时差及加样时间对时间分辨法检测弱阳性HBsAg标本的影响.方法:利用30份弱阳性HBsAg患者血清为检测对象,用加样时差和加样时间这2个条件进行实验.结果:30份标本在不同的加样时差所检测的结果不一致,加样时差对弱阳性标本的结果有影响;立即加样与30、45、60 min后加样比较有明显差异(P＜0.005).结论:加样时间及加样时差影响弱阳性HBsAg检测的重复性;在常规检测操作中应将初试中高值阴性标本做复试,且保证复试标本加样优先,以避免漏检弱阳性标本.
关键词： 乙肝表面抗原 时间分辨免疫荧光分析法 弱阳性 -
溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响
目的：探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本，利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例；采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前（0 h）和溶血后0．5、2、18 h的胰岛素浓度；通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义（P＞0．05）；随着溶血时间的延长，胰岛素浓度呈明显下降趋势，0．5、2、18 h检测结果与0 h检测结果相比，比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显，但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响；标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。
关键词： 溶血 胰岛素 时间分辨免疫荧光分析法 -
时间分辨免疫荧光技术检测3项血清指标的临床应用
目的 探讨时间分辨免疫荧光分析法和放射免疫分析法检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离素甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的方法学及临床应用.方法 利用2种方法分别检测对260例甲状腺疾病患者的血清FT3、FT4、TSH进行检测,对甲状腺功能亢进、甲状腺功能低下的诊断标准及临床符合率给以统计分析.同时对血清FT3、FT4、TSH进行精密度、准确度、分析灵敏度、抗干扰情况等方面的分析,并进行相关性比较.结果 2种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05).并且时间分辨免疫荧光法在患者结果可报告范围,精密度,灵敏度,准确度抗干扰试验方面稍优于放射免疫分析法.结论 时间分辨免疫荧光法完全能够替代放射免疫分析法,并且还具有精密度及灵敏度高,抗干扰能力强,可报告范围宽等优点.在甲状腺疾病患者中FT3、FT4、TSH所测结果各有特点,有助于临床鉴别诊断.
