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乙型肝炎DNA疫苗研究进展
DNA疫苗也有基因疫苗、核酸疫苗、DNA免疫、基因免疫等各种名称和相关概念.有人将DNA疫苗称为第三代疫苗.第一代疫苗以Jenner用牛痘预防天花为代表,人类从此开始摆脱许多疾病的困扰.第二代疫苗是运用基因重组技术,以特定的基因表达产生的抗原作为疫苗,重组乙型肝炎疫苗就是典型例子.DNA疫苗则是将编码目的抗原的基因与载体重组以后,经不同途径将基因直接转入机体细胞内,利用宿主细胞内的表达加工机构合成抗原,从而激发体液免疫和细胞免疫.近年来,DNA疫苗在打破HBV慢性感染的免疫耐受方面取得了一定的进展,对乙型肝炎及HBV无症状携带状态的临床治疗提供了值得探索的新途径.
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水产品中无色孔雀石绿的悬液芯片检测方法研究
目的 建立水产品中无色孔雀石绿(LMG)的悬液芯片检测法.方法 向聚苯乙烯微球中加入14μg/100μl的LMG抗原,利用碳二亚胺法使抗原与微球偶联构成捕获抗原.加入含LMG的样品,使用1∶800倍稀释的LMG单克隆抗体及藻红蛋白标记的二抗,37℃孵育1h后在悬液芯片仪上检测平均荧光强度值并计算样品中LMG的含量.结果 在10~100ng/ml的线性范围内,所得体系的回归方程为△F=2 035.6c+22.4,r=0.999 8.方法的检出限为0.125 ng/ml,加标回收率在88.7%~93.6%之间,RSD为3.2%~7.6%.结论 该方法的灵敏度高,特异性好,可作为一种高通量检测的新技术用于水产品中无色孔雀石绿残留的分析.
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间接荧光抗体试验在主要寄生虫病监测中的应用进展
间接荧光抗体试验(IFAT)是通过将荧光素与抗人免疫球蛋白或其他第二抗体在不影响抗体免疫特性的情况下,用化学方法结合起来,制备成荧光抗体.当作为检测用的未标记的抗原(或抗体)与待测标本中相应的抗体(或抗原)结合成抗原-抗体复合物时,加入荧光抗体与之结合形成免疫荧光复合物,即可在荧光显微镜下显示亮绿色荧光,从而间接地显示出待测标本中存在着相应抗体(或抗原).IFAT早用于寄生虫病的血清学检测始于上世纪60年代,随着寄生虫抗原制备方法的不断完善和荧光标记技术的成熟以及荧光显微镜的普及,IFAT的用途不断拓展.限于篇幅,本文仅对IFAT在血吸虫病、疟疾和丝虫病监测中的应用进展进行综述.
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环孢霉素A合成抗原的单抗制备技术探讨
目的研究利用自制的合成抗原制备环孢霉素A单克隆抗体的方法.方法利用光化学反应将环孢霉素A与聚-L-赖氨酸偶联为合成抗原,免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,经反复筛选亚克隆获得抗CsA抗体的杂交瘤细胞株,以间接ELISA法进行抗体鉴定.结果获得4株分泌抗CsA抗体的杂交瘤细胞株,其中2株分泌的抗体效价高,有一定特异性.结论该抗原合成和免疫的方法切实可行,但单克隆抗体制备及保存方法有待进一步改进.
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小分子药物人工抗原的合成与鉴定研究进展
近年来,免疫分析技术不断发展,因其高效、快速的优点而被广泛应用于各类残留药物的检测.免疫分析法是以抗原、抗体的特异性识别和可逆性结合反应为基础,以抗体作为生物检测器而建立的一种灵敏、简便、快速的超微量分析方法.在小分子药物残留的分析中,人工抗原的合成是建立免疫分析方法的关键.本文主要介绍小分子半抗原与载体蛋白的偶联方法及合成抗原的鉴定方法,并对偶联比的测定方法进行概述.