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HPLC法测定中药莪术中3种姜黄素的含量
目的:用高效液相色谱法测定中药莪术中3种姜黄素成分即姜黄素(curcumin, I)、脱甲氧基姜黄素(demethoxycurcumin, II)和双脱甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin, III).方法:采用Inertsil ODS-3色谱柱,流动相为甲醇-异丙醇-水-冰乙酸(20∶27∶48∶5),流速为0.5 ml.min-1,检测波长为420 nm.结果:3种姜黄素在0.1～1.9 μg呈良好线性关系,方法回收率为98.2%～101.1%,曾用本法测定了8种莪术样品.结论:本法准确,快速,重现性好,可用于考察研究中药莪术的不同品种以及同属其它中药的质量.
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总姜黄素在不同介质中的稳定性考察
姜黄素(curcumin)及姜黄素类化合物是从姜科植物姜黄Curcuma longa L.的地下根茎中分离得到的一类天然线性二芳基庚酮类化合物,常用作色素和多种食物的调味添加剂,具有广泛的生物活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤,降血脂及抗动脉粥样硬化等,引起人们的广泛关注.姜黄的醇提物和总姜黄素均主要含有3种活性成分:姜黄素(Cur Ⅰ)、脱甲氧基姜黄素(Cur Ⅱ)和双脱甲氧基姜黄素(Cur Ⅲ).这3种酚类色素的结构相近,药理作用相似,但是结构上的微小差别(主要是苯环上的烷氧基)使3种姜黄素类化合物在抗癌、抗氧化等作用方面有较大差异[1].3种姜黄色素单体对内皮细胞生长的抑制作用、抗血管生成作用均以Cur Ⅲ的生物活性强[2,3].
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姜黄中脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响
目的 研究姜黄中脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素对姜黄素稳定性的影响.方法 以pH 10的缓冲溶液为反应介质,将脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素定量加入到姜黄素对照品溶液中,高效液相色谱法测定姜黄素质量浓度的变化,采用动力学方法 建立姜黄素降解速率方程.结果 脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素均对姜黄素产生稳定作用,且呈量效关系.结论 姜黄中脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素为姜黄素天然稳定剂,以姜黄乙醇提取物制备姜黄素制剂,可提高制剂中姜黄素的稳定性.
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总姜黄素3种单体高纯度同时分离方法
目的 研究姜黄色素(curcuminoids,Cur)中姜黄素(curcumin,Cur Ⅰ)、脱甲氧基姜黄素(demethoxycurcumin,Cur Ⅱ)和双脱甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin,Cur Ⅲ)3种单体的分离、纯化工艺.方法 采用以氯仿-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱的柱层析法分离Cur中的3种单体,并采用重结晶法对其进行纯化,通过薄层色谱、熔点测定及高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对3种姜黄素单体的进行检测并计算纯度.结果 可获得3种高纯度的姜黄素单体,HPLC测定结果分别为Cur Ⅰ纯度99.47%、Cur Ⅱ纯度99.64%、Cur Ⅲ纯度98.64%.结论 硅胶柱层析法合理、科学,效率高,可为姜黄素单体的进一步研究与开发应用提供实验依据.
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双脱甲氧基姜黄素滴丸的质量研究
目的 将双脱甲氧基姜黄素制备成滴丸剂型,对滴丸进行质量评价和双脱甲氧基姜黄素的含量测定.方法 采用自制滴丸机制备双脱甲氧基姜黄素滴丸,并对滴丸进行外观检查、重量差异、重复性、溶出度等体外研究.结果 所制的双脱甲氧基姜黄素滴丸各项规定均符合要求,体外测定符合药典规定.结论 该批滴丸的制备工艺稳定,重现性好,为开发双脱甲氧基姜黄素的新型给药系统提供实验依据.
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HPLC法测定通络胶囊中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素的含量
目的建立通络胶囊中多种有效成分的含量测定方法.方法采用HPLC法测定制剂中姜黄素、脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素等有效成分的含量.结果姜黄素在0.02048～0.2048μg范围内线性良好,加样回收率为98.89%,RSD为1.04%;脱甲氧基姜黄素在0.00968～0.0968 μg范围内线性良好,加样回收率为97.86%,RSD为0.51%;双脱甲氧基姜黄素在0.00992～0.0992μg范围内线性良好,加样回收率为98.66%,RSD为1.82%.结论本测定方法简便可行、重复性好,可用于本制剂的质量控制.
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HPLC法测定姜黄、莪术、郁金中三种姜黄色素的含量
应用高效液相色谱法测定不同产地的姜黄、莪术、郁金中3种姜黄色素成分即姜黄素(Ⅰ)、脱甲氧基姜黄素(Ⅱ)和双脱甲氧基姜黄素(Ⅲ)含量.
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双脱甲氧基姜黄素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡的影响
目的:探讨双脱甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin)对黑色素瘤B16-F10细胞增殖与凋亡的影响. 方法:双脱甲氧基姜黄素作用于B16-F10细胞24 h,MTT法检测双脱甲氧基姜黄素对B16-F10细胞的增殖抑制作用. 流式细胞术检测双脱甲氧基姜黄素对细胞周期、细胞凋亡的影响. 在C57BL/6小鼠上面建立黑色素瘤模型,采用静脉给药,观察其对黑色素瘤模型的增殖影响. 用蛋白免疫印迹法检测双脱甲氧基姜黄素在细胞和组织层面对抗细胞凋亡蛋白BCL-1的表达影响. 结果:双脱甲氧基姜黄素可以明显抑制B16-F10细胞的增殖. 双脱甲氧基姜黄素诱导B16-F10细胞凋亡,抑制细胞周期于S期. 采用静脉注射给药,双脱甲氧基姜黄素可以抑制黑色素瘤的生长. 在细胞和组织层面,可以抑制抗凋亡蛋白BCL-1的表达.结论:双脱甲氧基姜黄素可以抑制黑色素瘤B16-F10细胞的增殖,可能与其促进细胞凋亡有关;双脱甲氧基姜黄素诱导黑色素瘤B16-F10细胞凋亡可能与抑制抗凋亡单位BCL-1有关.
关键词： 双脱甲氧基姜黄素 黑色素瘤B16-F10细胞 增殖 凋亡 -
双脱甲氧基姜黄素对db/db小鼠胰岛素抵抗和糖稳态作用及机制研究
目的 探讨双脱甲氧基姜黄素(BDMC)对db/db小鼠发生2型糖尿病(T2D)的作用及机制.方法 4周龄的db/db小鼠均衡随机分组为:db/db组、RG组和BDMC组,以C57BL/6为WT对照组.于每周检测空腹血糖,6周末置于监测其呼吸交换率和能量消耗变化,检测糖化血红蛋白、胰岛素、血脂含量,行口服糖耐量试验,计算胰岛素抵抗的稳态指数和定量胰岛素敏感性检测指数,Western blot检测肝脏G6Pase、PEPCK和骨骼肌p-AMPK、AMPK、PM-GLUT4、GLUT4、pAS160、AS160蛋白表达水平.结果 BDMC明显下调db/db小鼠升高的体质量、饮食、饮水量和空腹血糖,上调db/db小鼠降低的呼吸交换比率和能量消耗量,且比RG作用更明显;BDMC对db/db小鼠升高的外周血糖化血红蛋白无显著作用,但RG组下调含量;BDMC上调db/db小鼠降低的胰岛素敏感性,下调db/db小鼠升高的血浆胰岛素、胰岛素抵抗的稳态指数和定量胰岛素敏感性检测指数;BDMC下调db/db小鼠升高的TG、TC、LDL-C、HDL-C和FFA;BDMC下调db/db小鼠肝脏高表达的G6Pase和PEPCK蛋白,且优于RG;BDMC上调db/db小鼠骨骼肌低表达的p-AMPK、PM-GLUT4和pAS160蛋白,与RG效应没有明显的差异.结论 BDMC可明显上调骨骼肌AMPK-AS160-GLUT4信号通路及下调肝脏G6Pase和PEPCK减低糖再生,改善db/db小鼠胰岛素抵抗和糖脂代谢减慢,且优于罗格列酮.
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采用形态学实验研究双脱甲氧基姜黄素对人血管内皮细胞的诱导凋亡作用
目的探讨双脱甲氧基姜黄素(又称姜黄素-3)对人肺微血管内皮细胞的诱导凋亡作用.方法(1)采用Giemsa染色法观察浓度分别为4μg/ml、8μg/ml和12μg/ml的双脱甲氧基姜黄素诱导内皮细胞凋亡的效果;(2)采用透射电镜观察浓度分别为4μg/ml、8μg/ml的双脱甲氧基姜黄素诱导内皮细胞凋亡的效果;(3)采用丫啶橙荧光染色观察内皮细胞在8μg/ml双脱甲氧基姜黄素诱发凋亡后发生的形态结构改变.结果(1)Giemsa染色实验表明,双脱甲氧基姜黄素作用24h后,4μg/ml组细胞凋亡率为1 5.8%,与阴性对照组(13.2%)比较无明显差异(P＞0.05),8μg/ml组和12μg/ml组细胞凋亡率分别为20.6%和38%,与阴性组比较差异显著(P＜0.01和P＜0.001),凋亡细胞多表现为胞体缩小、变圆,核浓缩,呈紫黑色;(2)透射电镜分析表明,4μg/ml组的内皮细胞形态结构与阴性对照组基本相同,无明显异常改变,8μg/ml组有大量凋亡小体形成,并观察到较多的典型凋亡细胞;(3)丫啶橙荧光染色可较细致地显示细胞凋亡时的多种结构、形态改变,能够发现较早期的凋亡细胞,因而其敏感度可能更高.结论(1)双脱甲氧基姜黄素诱导内皮细胞凋亡作用的有效剂量为8μg/ml;(2)丫啶橙荧光染色是研究细胞凋亡的一种较好的形态学实验方法,同时也适于定量分析.
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双脱甲氧基姜黄素药理作用研究进展
双脱甲氧基姜黄素是姜黄色素重要的活性成分之一,具有广泛的药理作用,本文介绍今年来其药理作用研究概况.
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双脱甲氧基姜黄素的提取、纯化及鉴定
目的由中药姜黄中提取双脱甲氧基姜黄素.方法采用柱层析法由姜黄醇提物中分离双脱甲氧基姜黄素,然后采用重结晶法对其进行纯化;分别采用薄层层析法和高效液相色谱法(HPLC)对分离产物进行纯度鉴定,后采用质谱法测定其分子量.结果(1)薄层层析法检测结果表明,经柱层析法获取的双脱甲氧基姜黄素中无其他色素成分;但HPLC法的检测结果则表明,分离产物中的杂质峰总面积约占8.2%.采用结晶法纯化后,其中的杂质峰总面积降至3.4%.(2)质谱法鉴定结果表明,分离产物的分子量为308,与双脱甲氧基姜黄素的分子量完全一致,证明所获取的产物即双脱甲氧基姜黄素.结论柱层析法与结晶纯化法相结合是分离、纯化双脱甲氧基姜黄素的有效方法.
