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人参皂苷Rb1对C2 C12骨骼肌细胞葡萄糖利用及AMPK信号通路相关基因表达的影响
目的:观察人参皂苷Rb1对胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖利用的影响,并基于AMPK信号通路探讨其可能的作用机制.方法:将C2C12细胞分为正常组、模型组、人参皂苷Rb1组,模型组以0.25 mmol/L棕榈酸,1％小牛血清白蛋白培养16 h诱导IR,人参皂苷Rb1组在模型组的基础上以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量,并应用CCK8试剂盒及光镜观察不同浓度人参皂苷Rb1对C2C12细胞活性及形态的影响,实时荧光定量PCR扩增分析人参皂苷Rb1对C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α基因表达的影响.并应用shRNA沉默AMPKα的表达,构建AMPKα低表达的骨骼肌细胞模型,以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,与不含人参皂苷Rb1的培养液比较,再次验证人参皂苷Rb1对C2C12细胞葡萄糖利用的影响及其与AMPK信号通路的关系.结果:1、3、10、30μmol/L人参皂苷Rb1对C2C12细胞形态及活性无显著影响,而100μmol/L人参皂苷Rb1造成C2C12细胞活性降低及部分细胞死亡.10,30μmol/L人参皂苷Rb1能够促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且人参皂苷Rb1能够上调C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α的基因表达(P<0.05).10、30μmol/L人参皂苷Rb1亦能增加AMPKα低表达的骨骼肌细胞的葡萄糖消耗量(P<0.05),而该作用程度低于其对棕榈酸诱导的C2C12细胞IR的影响,且RT-PCR结果显示人参皂苷Rb1能上调AMPKα低表达的C2C12细胞SIRT-1、PGC-1α 的基因表达.结论:人参皂苷Rb1能够有效促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗,该作用与调节AMPK信号通路有关,但除AMPK信号通路亦有其他作用途径.
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基于 AMPK 的中药有效成分治疗2型糖尿病的研究进展
腺苷酸活化蛋白激酶（ AMP-activated Protein Kinase ，AMPK）在调节细胞和全身代谢中发挥着重要作用，是研究治疗2型糖尿病药物的关键靶点。本文介绍了AMPK的结构及调节方式，并通过检索文献，对通过调节AMPK及其相关信号通路干预2型糖尿病的中药有效成分进行归纳总结。
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泽参颗粒对脂肪变LO2细胞ADPN／AMPK信号通路的影响
目的：以细胞模型为基础，从 ADPN/AMPK/ACC 信号通路探讨中药复方治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的作用机制。方法取对数生长期的细胞，分为6组：正常组，模型组，化泽参颗粒高、中、低剂量组和多烯磷脂酰胆碱组。待细胞贴壁后，除正常组外，将其余各组培养液更换为含有终浓度为40μg/mL油酸（以DMSO溶解）的培养液进行造模。24 h后，将正常组和模型组更换为正常培养液（10％胎牛血清＋90％ RPMI1640培养基），泽参颗粒高、中、低剂量组和多烯磷脂酰胆碱组则更换为含有10％对应药物血清的培养液，24 h 后，以荧光定量PCR 法检测各组细胞中AdipoR2、AMPKα、ACCα、CPT-1 mRNA 的表达情况。结果与模型组比较，泽参颗粒高、中、低剂量组中AMPKα、CPT-1mRNA的表达均有所升高（P＜0．05），而ACCαmRNA表达均下降（P＜0．05）。AMPKαmRNA表达高的是泽参颗粒中剂量组，CPT-1 mRNA表达高的是泽参颗粒低剂量组，而ACCαmRNA 表达低的是泽参颗粒高剂量组。结论泽参颗粒调控Adipo/AMPK/ACC信号通路可能是其治疗NAFLD的作用机制。
关键词： 泽参颗粒 AMPK信号通路 非酒精性脂肪变肝细胞模型 -
吡啶羧酸铬通过AMPK信号通路促进3T3-L1脂肪细胞脂肪酸转位酶CD36的转位
目的 研究吡啶羧酸铬(CrPic)对3T3-L1脂肪细胞脂肪酸转位酶CD36转位的作用及机制.方法 采用3T3-L1脂肪细胞作为模型,通过免疫荧光及Western blot等方法观察CrPic及胰岛素对CD36转位的作用；并在此基础上,探讨CrPic对CD36作用的分子机制.结果 免疫荧光结果显示CrPic和胰岛素可促进3T3-L1脂肪细胞的CD36从胞质转位到胞膜；Western blot 结果表明脂肪细胞胞膜上CD36的含量也增多.给予腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路抑制剂compound C之后,CrPic促进CD36转位的作用消失,但胰岛素的作用却不受影响.结论 CrPic通过AMPK信号通路促进3T3-L1脂肪酸转位酶CD36的转位.
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腺苷酸活化的蛋白激酶在乳腺癌辅助治疗中作用的研究进展
腺苷酸活化的蛋白激酶（ AMP activated protein kinase ， AMPK）是细胞内重要的能量感受器，在调控细胞和机体的能量代谢中起着极其重要的作用。 AMPK与不同类型乳腺癌细胞的存活存在密切而复杂的联系，根据条件的不同，AMPK可能同时存在抗肿瘤或促进肿瘤的作用。文中从AMPK与乳腺癌相关信号通路的关系，AMP与乳腺癌内分泌治疗、乳腺癌化疗、乳腺癌放疗、三阴性乳腺癌治疗及多药物耐药的关系进行综述，并阐述了AMPK相关药物应用。
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糖代谢异常促进肥胖型卵巢癌发生发展的研究进展
研究表明,肥胖与卵巢癌的发生和预后有关,而高血糖状态是营养过剩、超重和肥胖的病理特征,并且是肿瘤发生和不良预后的独立危险因子,高血糖负荷和高血糖指数增加卵巢癌的危险.肥胖和糖代谢异常可能通过激活AMPK和mTOR相关的信号通路参与卵巢癌的发生和发展.因此应用mTOR抑制剂或二甲双胍抑制mTOR信号转导通路活性,在肥胖伴发的上皮性卵巢癌的治疗中将具有重要意义.文章就肥胖型卵巢癌异常糖代谢通路及针对信号通路靶点的靶向治疗作一综述.
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丹参酮ⅡA通过AMPK介导的自噬减轻阿霉素所致H9c2心肌细胞损伤
目的:探讨丹参酮ⅡA对阿霉素(又称多柔比星)所致大鼠H9 c2心肌细胞损伤的影响和机制.方法:以H9c2细胞为研究对象,在有或无AMPK抑制剂dorsomorphin处理下,采用丹参酮ⅡA和(或)阿霉素处理H9c2细胞,应用CCK-8法测定细胞活力,LDH法测定细胞损伤情况,免疫荧光实验分析细胞自噬情况,Western blot检测细胞AMPK的活化情况.结果:与对照组相比,阿霉素处理后H9c2细胞的活力减弱,LDH释放增多,自噬增加,AMPK的活化受抑制(P<0.05);与阿霉素组相比,加用丹参酮ⅡA联合处理能部分恢复H9c2细胞的活力,减少LDH释放,进一步增加自噬,促进AMPK活化(P<0.05);AMPK抑制剂dorsomorphin处理后,丹参酮ⅡA恢复H9c2细胞活力、减少LDH释放和促进自噬的作用减弱(P<0.05).结论:丹参酮ⅡA能减轻阿霉素所致H9c2心肌细胞的损伤,其机制可能与激活AMPK介导的自噬有关.本研究为临床上应用丹参酮ⅡA防治阿霉素心肌损伤提供实验基础和理论依据.
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二甲双胍联合紫杉醇对人乳腺癌细胞凋亡及AMPK信号通路的影响
目的:探索二甲双胍联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞活力和凋亡的影响及其可能的机制.方法:采用不同浓度(2、5、10、20、40和80 mmol/L)二甲双胍作用于体外培养的MCF-7细胞,MTT法检测细胞的活力.采用2 mmol/L二甲双胍和2.4 mg/L紫杉醇单独或联合处理细胞,并加入一磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)信号转导通路抑制剂compound C.实验分为对照组、二甲双胍组、紫杉醇组、联合组和联合+compound C组;流式细胞术检测细胞的凋亡率,采用RT-qPCR和Western blot法检测Bax、Bcl-2和caspase-3的mRNA和蛋白表达量,Western blot检测AMPK和P21蛋白的表达量.结果:不同浓度二甲双胍(2、5、10、20、40和80 mmol/L)显著抑制乳腺癌细胞的活力(P<0.05),且具有一定浓度依赖性.与对照组相比,2 mmol/L二甲双胍和2.4 mg/L紫杉醇单独或联合均可显著抑制细胞活力并诱导其凋亡(P<0.05),显著下调Bcl-2水平(P<0.05),上调Bax和caspase-3水平(P<0.05),促进AMPK和P21蛋白表达.联合使用的效果优于单独使用.加入AMPK抑制剂可削弱此作用.结论:二甲双胍联合紫杉醇可抑制乳腺癌MCF-7细胞活力,诱导其凋亡.此作用与激活AMPK信号转导通路并调节细胞凋亡信号通路有关.
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双脱甲氧基姜黄素对db/db小鼠胰岛素抵抗和糖稳态作用及机制研究
目的 探讨双脱甲氧基姜黄素(BDMC)对db/db小鼠发生2型糖尿病(T2D)的作用及机制.方法 4周龄的db/db小鼠均衡随机分组为:db/db组、RG组和BDMC组,以C57BL/6为WT对照组.于每周检测空腹血糖,6周末置于监测其呼吸交换率和能量消耗变化,检测糖化血红蛋白、胰岛素、血脂含量,行口服糖耐量试验,计算胰岛素抵抗的稳态指数和定量胰岛素敏感性检测指数,Western blot检测肝脏G6Pase、PEPCK和骨骼肌p-AMPK、AMPK、PM-GLUT4、GLUT4、pAS160、AS160蛋白表达水平.结果 BDMC明显下调db/db小鼠升高的体质量、饮食、饮水量和空腹血糖,上调db/db小鼠降低的呼吸交换比率和能量消耗量,且比RG作用更明显;BDMC对db/db小鼠升高的外周血糖化血红蛋白无显著作用,但RG组下调含量;BDMC上调db/db小鼠降低的胰岛素敏感性,下调db/db小鼠升高的血浆胰岛素、胰岛素抵抗的稳态指数和定量胰岛素敏感性检测指数;BDMC下调db/db小鼠升高的TG、TC、LDL-C、HDL-C和FFA;BDMC下调db/db小鼠肝脏高表达的G6Pase和PEPCK蛋白,且优于RG;BDMC上调db/db小鼠骨骼肌低表达的p-AMPK、PM-GLUT4和pAS160蛋白,与RG效应没有明显的差异.结论 BDMC可明显上调骨骼肌AMPK-AS160-GLUT4信号通路及下调肝脏G6Pase和PEPCK减低糖再生,改善db/db小鼠胰岛素抵抗和糖脂代谢减慢,且优于罗格列酮.
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利拉鲁肽改善非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脂肪沉积的机制探讨
目的 探讨利拉鲁肽改善肝脏脂肪沉积的潜在分子机制.方法 8周龄雄性C57BL/6J小鼠标准饲料喂养作为野生对照组(WT组,n=10);ApoE KO小鼠56只,随机分为标准饲料喂养组(ApoE KO组,n=10)、高脂喂养组(HF组,n=10)、高脂喂养+空载腺病毒组(Ad-shGFP组,n=6)、高脂喂养+脂联素RNM腺病毒组(Ad-shAcrp30组,n=10)、高脂喂养+脂联素RNAi腺病毒+利拉鲁肽组(Liraglutide组,n=10)、高脂喂养+脂联素RNAi腺病毒+等渗盐水组(Saline组,n=10).共喂养16周,于14和15周末给予Ad-hGFP组和Ad-hAcrp30组尾静脉分别注射Ad-shGFP和Ad-shAcrp30重组腺病毒(1×1010/ml).Liraglutide组第9周开始腹腔注射利拉鲁肽(1mg/kg,2次/d).16周末测血浆葡萄糖、血脂、脂联素及胰岛素等.取肝脏组织做HE染色及油红O染色.荧光实时定量PCR检测基因mRNA表达、蛋白免疫印迹Western blot检测相关蛋白表达.非正态分布数据采取自然对数转换.组间比较采用方差分析,组内比较采用SNK法.结果 与Ad-shGFP组相比,Ad-shAcrp30组脂肪组织脂联素mRNA、蛋白表达及血浆脂联素水平均降低(均P＜0.01);HF组的空腹血糖(FBG)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)较WT组及ApoE KO组均显著升高(均P＜0.01),给予Ad-shAcrp30后,FBG、TC、TG、FFA进一步升高.Ad-hAcrp30组肝脏TC及TG含量较HF组升高(P值均＜0.05).油红O染色见Ad-shAcrp30组肝内大量脂滴沉积,HE染色示Ad-shAcrp30组肝小叶结构紊乱.与Saline组相比,Liraglutide组体质量、血糖、血脂及ALT均显著降低(均P＜ 0.01);脂肪组织脂联素蛋白表达及血浆脂联素水平均显著升高(均P＜ 0.01);肝脏TG、TC均减少(P值均＜0.05);油红O染色提示肝脏脂滴明显变小,且数量减少;肝脏ACC、FAS表达下调,而磷酸化AMPK蛋白表达增加(P＜ 0.01).结论 利拉鲁肽可以显著改善高脂喂养联合低脂联素血症诱导的代谢紊乱并减轻肝脏脂质沉积.
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糖尿病对卵巢卵泡发育的影响
随着糖尿病患者数量急剧增加,女性糖尿病患者不孕不育及生殖内分泌异常疾病的问题日益严重.研究表明糖尿病患者体内的高血糖水平,异常的胰岛素浓度和瘦素浓度能够阻碍下丘脑和垂体对卵巢的调控或直接作用于卵巢影响卵泡的正常发育和卵母细胞的成熟导致排卵障碍,损伤卵巢的正常功能进而影响妊娠和内分泌稳态.本文结合新的研究进展,深入讨论了糖尿病对卵巢卵泡发育影响的具体机制,为相关疾病的治疗提供新的思路和见解.
