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新决明内脂诱导HepG2细胞内脂质代谢相关基因的差异表达
目的研究新决明内脂与细胞内脂质代谢有关的生物学效应及分子机理.方法首先用动物实验检查该化合物的生物学效应.再用细胞学方法研究该化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用.后用含有10 000个人类基因和ESTs的高密度cDNA微阵列去研究新决明内脂如何改变HepG2细胞的基因表达图谱.结果新决明内脂可减少大鼠的体重增加率,但对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用有限.HepG2肝细胞基因表达图谱结果显示新决明内脂调节了46个与脂质代谢、蛋白代谢、细胞增生与凋亡等功能有关的基因.结论新决明内脂的生理效果可能与一系列与脂质代谢有关的重要基因有关.
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基于杂交的基因差异表达技术在人胃癌研究中的应用
寻找胃癌与正常胃黏膜及癌旁组织的差异基因对全面阐明胃癌发生发展及转移的分子机制具有重要意义.目前,基于杂交的基因差异表达分析技术已广泛用于寻找疾病以及细胞生长发育不同阶段的相关基因.此文就基于杂交的基因差异表达技术的原理、特点以及在人胃癌研究中的应用作一综述.
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人胚肝脂代谢相关基因的表达谱
运用cDNA 微阵列结合荧光半定量聚合酶链反应技术,首次大规模分析人胚发育过程中肝脏脂代谢相关基因的表达情况,比较孕早、晚期人胚肝脂代谢相关基因的表达谱. 抽提孕早、晚期胎儿肝脏组织总RNA,取等量mRNA逆转录标记33P,制成cDNA探针后与人类全基因cDNA微阵列芯片杂交,用相应软件分析杂交信号扫描结果.有差异表达的基因再用实时荧光半定量PCR方法进一步确认.在进入研究的可信基因中,与脂代谢相关的基因共有135条,其中28条有差异表达(2倍以上),随胎龄增长,脂肪酸分解的相关基因呈现上调趋势,脂肪酸和胆固醇合成的相关基因呈现下调趋势,差异范围从0.43～8.3倍.检测15例胚肝组织的脂质含量,发现胆固醇和甘油三酯水平随胎龄增长而逐渐下降.人类胚胎肝脏的胆固醇和甘油三酯的合成率及含量可能随着发育成熟呈现下降趋势.
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恶性星形胶质瘤中转录因子的表达异常
目的研究人类星形胶质瘤中转录因子(TF)的表达异常.方法用cDNA微阵列方法研究人类正常大脑和星形胶质瘤中转录因子的表达.共3个标本:标本1混合了3例三级星形胶质瘤,标本2混合了2例四级星形胶质瘤(胶质母细胞瘤,GBM),标本3为对照,混合了4例正常大脑组织.33p标记的cDNA与带有14 000个cDNA片断的微阵列膜杂交,通过比较肿瘤标本和对照标本的光密度来分析各基因,相差2倍以上被认为表达有差异.结果普查了109个转录因子.GBM标本中转录因子的表达高于三级胶质瘤(表达比率为1.33±0.28和1.10±0.16,P＜0.001).在2个肿瘤标本中共有13个异常表达的转录因子.在三级胶质瘤中有4个上调基因和1个下调基因,在GBM中有6个上调基因和5个下调基因.转录因子ⅡB在2个标本中均下调(三级胶质瘤中为0.21倍,GBM中为0.28倍).有2个因子在2个标本中均上调,它们为HMGI-C(分别为2.17倍和4.13倍),和基本转录因子2(BTF2)63kDa亚单位(分别为2.81倍和2.69倍).结论在三级胶质瘤和GBM中有转录因子的异常表达.TFⅡB、HMGI-C、BTF2 63kDa亚单位是进一步研究的目标.
