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结肠癌组织中抑癌基因PTENp53的表达意义
目的 探讨抑癌基因PTEN、p53在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌发生发展、临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测PTN和p53基因在59例结肠癌、20例结肠腺瘤、19例正常结肠组织中的表达,并结合患者的临床病理资料进行分析.结果 结肠癌组织中PTEN、突变型p53基因的阳性表达率分别为54.2%、66.1%,结肠腺瘤组织中分别为95%、0,突变型p53基因在正常结肠组织和结肠腺瘤组织中不表达,PTEN基因在正常结肠粘膜和结肠腺瘤组织中几乎全部呈阳性表达.结肠癌组织中PTEN基因的表达与正常结肠黏膜和结肠腺瘤组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05),结肠癌组织中突变型p53的表达显著高于结肠腺瘤以及正常结肠黏膜组织中的表达(P＜0.05).随结肠癌临床分期增加、浸润深度加深、淋巴结的转移、Duck's分期的增加,突变型p53基因的阳性表达率逐渐升高(P＜0.05),PTEN基因的阳性表达率逐渐降低(P＜0.05),PTEN基因与突变型p53基因的表达呈负相关(P＜0.05).结论 PTEN和p53基因的异常表达与结肠癌的发生、发展和病理学特征有关;PTEN、p53基因在结肠癌的发生、发展中起协同作用.
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乳腺癌P53和Ki-67表达的相关性及临床意义
目的 探讨突变型P53和核蛋白抗原Ki-67在乳腺癌组织中的表达及其相互之间的关系,为乳腺癌的诊断、治疗和预后提供可靠的依据.方法 随机收集2012年3月-2015年8月期间于包头医学院第一附属医院就诊的100例女性原发性乳腺癌患者,术后行病理及免疫组化检测乳腺癌组织中P53和Ki-67的表达.结果 100例乳腺癌肿块其P53和Ki-67的阳性表达率分别为56.0％、41.0％.P53和Ki-67间有一定的关联性,P53与Ki-67表达呈正相关(P＜0.05).结论 P53和Ki-67在乳腺癌中的表达既相互独立又相互关联,通过多项指标联合检测,会更准确地判断乳腺癌的预后,同时可以为靶向药物的个体化治疗提供参考依据.
关键词： 乳腺癌 突变型p53基因 核蛋白抗原Ki-67 -
消化道肿瘤P53和Ki-67表达的相关性及临床意义
目的 探讨P53和Ki-67在消化道肿瘤组织中的表达及其相互之间的关系,为消化道肿瘤的诊断、治疗和预后提供可靠的依据.方法 收集2013年3月-2015年3月期间,来该院就诊的87例消化道肿瘤患者,采用免疫组化方法检测消化道肿瘤组织中P53和Ki-67的表达情况,并分析二者的相关性.结果 87例消化道肿瘤肿块其P53和Ki-67的阳性表达率分别为51.7％、42.5％.P53和Ki-67间有一定的关联性,P53与Ki-67表达呈正相关(P＜0.05).结论 P53和Ki-67在消化道肿瘤中的表达既相互独立又相互关联,通过多项指标联合检测,会更准确地判断消化道肿瘤的预后,同时可以为靶向药物的个体化治疗提供参考依据.
关键词： 胃癌 突变型p53基因 核蛋白抗原Ki-67 -
胃癌中VEGF及突变型p53基因表达及临床意义研究
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)及突变型p53(mtp53)基因表达水平与胃癌病理生理学特征之间的关系.方法 采用免疫组化方法(二步法),检测86例胃癌组织及30例癌旁组织及切缘"正常"组织中的VEGF、mtp53表达水平.结果 胃癌组织中VEGF、mtp53基因的表达水平显著高于癌旁组织和切缘"正常"组织(P<0.01).VEGF、mtp53基因表达水平与胃癌患者性别、年龄、组织学类型、细胞分化程度均无明显关系(P>0.05),与浸润程度、淋巴结转移、远处转移状态、P-TNM分期均有密切关系(P<0.01).mtp53基因表达水平与VEGF表达水平呈正相关(P<0.01).结论 VEGF、mtp53基因可能参与了胃癌的发生、进展进程,可以作为胃癌生物学行为恶化的一项指标.
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槲皮素对NB4细胞株p53及蛋白的影响
目的研究治疗白血病的有效药物。方法将槲皮素作用于培养的NB4细胞株，应用RT-PCR及Westem bolt方法，研究不同浓度槲皮素(30、60、90μmol/L)诱导细胞24、48、72、96、120h后，急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株中突变型p53基因及蛋白表达的情况。结果证实其在30～90μmol/L浓度时对突变型p53基因无影响，而对突变型p53蛋白的表达有抑制作用。结论本研究为槲皮素应用于急性早幼粒细胞白血病的研究提供了有效手段。
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槲皮素对体外培养NB4细胞株P53表达的影响
目的为研究治疗白血病的有效药物.方法将槲皮素作用于培养的NB4细胞株,应用RT-PCR及westernblot方法,研究不同浓度槲皮素(30、60、90μm)诱导细胞24、48、72、96、120h后,白血病NB4细胞株中突变型p53基因及蛋白表达的情况.结果证实其30～90μm浓度时对突变型p53基因没有影响,而对突变型p53蛋白的表达产生抑制作用.结论为槲皮素应用于白血病的研究提供了有效手段.
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灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠p53和bcl-2蛋白表达的影响
目的:探讨灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其抑瘤作用机制.方法:采用体内实验法,于无菌条件下抽取传代7d、生长良好的H22荷瘤小鼠腹水,无菌0.9%氯化钠溶液1:3稀释(约含瘤细胞2×106/ml),按0.2ml/只接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制成肿瘤模型,灌胃给药灵芪胶囊11d后,称取小鼠体重,脱椎处死小鼠,取脾脏及胸腺称重并计算胸腺指数和脾脏指数.用免疫组化法检测各组凋亡相关基因突变型p53和bel-2基因的表达.结果:灵芪胶囊在明显抑制肿瘤生长的同时不降低体重,在一定剂量对荷瘤动物的免疫器官指数无明显影响;灵芪胶囊三个荆量组突变型p53基因和bcl-2基因的表达均低于模型组.结论:灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其机制可能与抑制突变型p53基因和bcl-2基因表达有关.
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HBx基因诱发肝细胞癌的实验研究及其机制
目的:在裸鼠体内转入HBx基因的QSG7701细胞株形成移植瘤,并探讨裸鼠成瘤的可能机制.方法:利用已成功构建的高表达HBx基因的pCMVX/QSG7701细胞株作为实验组,以pRcCMV2/QSG7701细胞株和QSG7701细胞株为对照组接种于裸鼠皮下,观察裸鼠能否成瘤.HE染色研究移植瘤的组织形态学特征,以RT-PCR法检测移植瘤组织、pCMVX/QSG7701细胞、pRcCMV2/QSG7701细胞及QSG7701细胞的p53基因和c-Myc基因表达情况.结果:接种pCMVX/QSG7701细胞株的裸鼠在第2周开始出现移植瘤生长,周围器官和组织未发现转移灶.对照组至接种后第35天无移植瘤生长.HE染色证实移植瘤为肝细胞癌组织.移植瘤和pCMVX/QSG7701细胞中突变型p53和c-Myc mRNA的表达量较pRcCMV2/QSG7701细胞和QSG7701细胞明显增高(P＜0.01).结论:HBx基因表达可以直接导致肝细胞癌变;HBx能上调移植瘤和pMVX/QSG7701细胞中突变型p53和c-Myc的表达,并可能通过这一机制导致肝细胞癌变.
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含突变型p53和LMP1双基因重组质粒的构建与鉴定
目的构建一种双基因真核表达载体,使之表达人突变型p53蛋白(p53ml)和EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1),为研究这两个蛋白在鼻咽癌变中的交互作用奠定基础.方法通过基因重组技术,构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53 mt;采用脂质体lipofectAMINETM 2000将此载体转入体外培养的HeLa细胞中,转染后48h,采用免疫细胞化学方法分析突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的表达.结果对重组载体进行限制性内切酶酶切及PCR鉴定分析,结果与预期相符合;转染试验观察到转染细胞中突变型p53基因和LMP1基因的阳性表达.结论成功构建了表达人突变型p53蛋白和EB病毒1MP1的真核载体pLMP1-p53 mt,其研究思路可以为中医体质病机研究提供借鉴.
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肺癌中血管内皮生长因子及突变型p53基因表达及其临床意义研究
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、突变型p53(mtp53)基因表达水平与肺癌病理生理学特征之间的关系.方法采用免疫组化方法(LSAB法),检测120例肺癌组织及相应癌旁组织,40例肺良性病变组织中的VEGF、mtp53表达水平.结果肺癌组织中VEGF、mtp53基因的表达水平显著高于癌旁肺组织和肺良性病变组织(P＜0.01).VEGF、mtp53基因表达水平与肺癌患者性别、年龄、吸烟史、组织学类型均无明显关系(P＞0.05),与原发肿瘤大小、细胞分化程度、淋巴结转移状态、P_TNM分期均有密切关系(P＜0.01).mtp53基因表达水平与VEGF表达水平呈显著正相关(P＜0.01).结论 VEGF、mtp53基因可能参与了肺癌的发生、发展进程,可以作为肺癌生物学行为恶化的一项指标.
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膀胱移行细胞癌mP53和PCNA表达的相关性及临床意义
目的 探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)突变型P53基因(mP53)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相关性及临床意义.方法 应用免疫组化二步法,检测50例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜中mP53、PCNA的表达,结合临床病理资料进行统计分析.结果 50例BTCC mP53阳性表达率66%,PCNA阳性表达率76%;10例正常膀胱黏膜mP53和PCNA的表达均为阴性(P<0.05);mP53和PCNA表达呈正相关(r=0.63,P<0.05);mP53和PCNA阳性表达率在浸润型肿瘤组、G2和G3级肿瘤组、复发组均较高(P均<0.05).结论 mP53和PCNA在膀胱移行细胞癌中表达均增高,二者与BTCC分期、细胞的分级、复发相关,可作为判断BTCC预后的参考指标.
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人突变型p53和EB病毒LMP1转基因小鼠的建立
目的:建立含突变型p53和EB病毒LMP1基因的双转基因小鼠模型,为研究突变型p53和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌前病变中的交互作用提供有力的工具. 方法:通过分子克隆技术构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管;取其产3 wk龄子代鼠进行PCR初选,再通过Southern杂交进一步确证;利用HE染色法观察4 mo龄转基因小鼠不同组织病理变化. 结果:将转基因载体进行了707枚小鼠受精卵的显微注射,然后植入30只假孕母鼠的输卵管中,其中26只母鼠怀孕,移植成功率为86.67%;共出生子代鼠179只;PCR检测显示179只子代小鼠中有9只整合了p53mt和LMP1基因,转基因阳性小鼠比例为5.03%(9/179),Southern杂交结果进一步证实了9只基因组整合了外源基因的首建者小鼠;随机抽取其中的1只转基因阳性小鼠鼻腔黏膜、鼻咽、食管表现炎症,鼻咽黏膜上皮灶性增生. 结论:成功建立整合人突变型p53和LMP1的转基因小鼠,且表现鼻咽黏膜上皮灶性增生,可为鼻咽癌前病变机制的研究提供手段.
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灵芝孢子粉对肺癌小鼠突变型P53蛋白表达的影响及抑瘤作用
目的 探讨灵芝孢子粉对荷Lewis肺癌瘤株小鼠突变型P53基因表达的影响及抑瘤作用。方法 将荷Lewis肺癌瘤株小鼠分别用100％和50％浓度剂量的灵芝孢子粉0.4mL灌胃14 d。停药后处死小鼠，检测瘤重，计算灵芝孢子粉对荷Lewis肺癌的抑瘤率，并采用标记的链白素-生物素辣根过氧化酶复合物法检测瘤组织突变型P53蛋白，结果服用灵芝孢子粉的肺癌小鼠，抑瘤率分别为41.6％和39.9(P＜0.01)；突变型P53蛋白表达阳性细胞显著降低(P＜0.01)。结论 灵芝孢子粉能抑制肺癌小鼠癌基因P53的表达，并有较强的抑瘤作用。
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环磷酰胺诱发的染色体损伤与P53基因表达的关系
目的:探讨环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对染色体损伤与P53基因表达间的关系.方法:以正常人外周血淋巴细胞为材料,用流式细胞仪检测环磷酰胺对突变型P53基因表达的影响,同时以微核(MN)及姐妹染色单体互换(SCE)为指标,进行致突变研究.结果:环磷酰胺用药组突变型P53基因表达率为30.81%,微核率为8‰,姐妹染色单体互换率为9.21±1.08,与对照组比较均有显著差异.结论:环磷酰胺的致突变作用可能与影响P53的基因的表达有关.
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生存素与突变型p53基因表达与食管、胃结合部癌生物学行为的相关性探讨
目的 研究凋亡抑制基因生存素(survivin) 与突变型p53基因表达与食管、胃结合部癌生物学行为的相关性,并探讨其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术,检测82例术前未经化疗的食管、胃结合部癌组织中survivin 和突变型p53 基因的表达情况,并与术后临床病理特征进行相关性比较.结果 82例食管、胃结合部癌组织中, survivin (+)56(68.29%)例,突变型p53 (+)48 (58.54 %)例.survivin 表达与食管、胃结合部癌组织学类型、淋巴管侵润和淋巴结转移相关有统计学意义(P<0.05),survivin 在突变型p53 阳性和阴性患者中阳性率分别为85.42 %(41/48)和44.12 %(15/34),两者间差异有统计学意义(P<0.001).结论 survivin 在食管、胃结合部癌组织中的表达与突变型p53 基因表达密切相关,提示二者可能存在协同作用.survivin 和突变型p53阳性的食管、胃结合部癌可能有较强的侵袭性,预后不良.
