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石杉碱甲聚乳酸-乙醇酸纳米粒的制备、表征及其小鼠活体成像脑靶向分布
目的 制备石杉碱甲(HupA)聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒,并研究其分布特性.方法 以PLGA为载体材料,采用乳化溶剂挥发法,正交实验优化HupA-PLGA纳米粒的制备工艺;透射电子显微镜观察纳米粒形态;激光粒度仪测定平均粒径、粒径分布和Zeta电位;HPLC法测定纳米粒的包封率;并通过小动物活体荧光成像实验对纳米粒在小鼠体内的分布特性进行研究.结果 优化条件下制备的纳米粒呈圆形,大小较为均一,平均粒径为(46.49±1.37)nm,多分散指数值为0.31±0.01,Zeta电位为(-38.3±1.56)mV,包封率为(28.45±1.52)％,且工艺重现性好.小动物活体成像实验结果表明该纳米粒可以通过血脑屏障到达脑组织,且具有很好的缓释作用.结论 以PLGA为载体的HupA纳米粒具有较小的粒径、良好的缓释性能并能提高脑内药物浓度水平.
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NgR基因沉默细胞-PLGA移植对脊髓损伤大鼠后肢功能的影响
目的 观察NgR基因沉默细胞-PLGA共移植对脊髓损伤大鼠后肢功能修复的作用.方法 健康成年雌性Wistar大鼠72只,建立脊髓T9半横断损伤模型.随机分为单纯支架组(A组)、骨髓间充质干细胞+施旺细胞+聚乳酸-乙醇酸(PLGA)组(B组)、NgR基因沉默细胞+PLGA组(C组),每组24只.于脊髓缺损处分别植入对应的复合物.造模后1、2、4、6、8周行运动功能检测,4周后行HE染色及免疫荧光观察PKH-26标记的骨髓间充质干细胞的存活和分布情况.结果 斜板实验和改良BBB评分结果提示,下肢运动功能评价B组优于A组(P＜0.01),C组优于B组(P＜0.05);A、B、C组PKH-26阳性细胞数分别为0、(34.43±9.78)、(69.58±8.15)个/高倍视,3组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NgR基因沉默细胞-PLGA共移植能够明显促进脊髓半横断损伤大鼠的脊髓轴突再生,并改善肢体的运动功能.
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药用缓释材料聚乳酸-乙醇酸共聚物的研制
目的:合成药用聚乳酸-乙醇酸高分子缓释材料,用于某些生物药物缓、控释剂型的制备;同时探讨聚合反应条件的影响因素以及优化工艺.方法:在一定的温度和压力下,采用配位-插入聚合法通过交酯开环合成聚乳酸-乙醇酸共聚物缓释材料.结果:本研制合成的聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA75/25和PLGA50/50)经采用多种鉴定手段表征化学结构正确,力学性能良好,玻璃转化温度为33.7℃,分子量为27 000～70 000,分子量分布为1.4～1.6,产品终产率可达70%以上.结论:通过制备工艺条件的控制和优化,在一定范围内,不仅可以得到分子量大小不等和单体比例不同的聚乳酸-乙醇酸缓释材料,而且每批次之间所得分子量重现性良好,合成工艺稳定、可靠.
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聚乳酸-乙醇酸膜在模拟体液中降解的Monte Carlo 模拟
背景:聚乳酸-乙醇酸广泛应于医用植入物与药物缓释载体,由于影响其降解过程的因素较多,使得其失重性能难以模拟.目的:对聚乳酸-乙醇酸膜失重性能进行数值模拟,观察模拟与实际测量的相关性.设计:重复测量.单位:大连理工大学材料科学与工程学院.材料:重均分子量分别为63 000, 115 000和400 000的实验用的聚乳酸-乙醇酸 50/50,70/30 和75/25,购自山东省医用高分子材料重点实验室.1,4-二氧六环为天津化学试剂一厂生产,用作溶剂.方法:实验于2006-04/06在大连理工大学材料科学与工程学院完成.①将聚乳酸-乙醇酸分别按质量比50∶50,70∶30及75∶25溶于1,4-二氧六环,溶液浇铸成10 mm×10 mm×1 mm的聚合物膜.②聚乳酸-乙醇酸膜在37 ℃的Hank's模拟体液(pH 7.4)中浸泡,每周取出1次(质量比为50:50的聚乳酸-乙醇酸为每5天取1次),试样清洗并干燥之后使用凝胶渗透色谱仪测量其数均与重均分子量,计算降解速率.同时使用电子天平测量其失重性能,并与Monte Carlo法改进后实际测量值进行相关性分析.主要观察指标:①不同质量比聚乳酸-乙醇酸的降解速率.②模拟结果与实验值之间的相关系数.结果:①质量比50:50,70:30和75:25的聚乳酸-乙醇酸降解速率分别为0.058 5,0.016 6和0.010 1/d(数均分子量)或者0.061 0,0.017 5和0.008 5/d(重均分子量).②聚乳酸-乙醇酸 50/50,70/30和75/25的模拟结果与实验值之间的相关系数分别为0.973 6,0.987 4 和0.990 3.结论:数值模拟聚乳酸-乙醇酸膜失重性能与实验值符合良好.
关键词： 聚乳酸-乙醇酸 Monte Carlo法 降解 溶蚀 失重性能 -
NgR基因沉默骨髓间充质干细胞/许旺细胞支架复合体的构建
背景:细胞联合移植、NgR基因沉默及聚乳酸-乙醇酸支架为近年来脊髓神经损伤修复的研究热点.目的:探讨NgR基因沉默的骨髓间充质干细胞/许旺细胞在聚乳酸-乙醇酸膜上生长及分化的可行性.方法:将骨髓间充质干细胞、许旺细胞分离、纯化及扩增后,经小分子干扰RNA转染以沉默NgR基因表达,用反转录-聚合酶链反应、Western blot检测两种细胞在转染前后NgR基因/蛋白的表达.在有血清的条件下,按骨髓间充质干细胞组、许旺细胞组及联合组(均以未转染细胞为对照,共6 组)分别接种到聚乳酸-乙醇酸膜上,观察各组细胞的贴附、生长、分化情况.结果与结论:转染小分子干扰RNA后,与转染前相比,实验组NgR基因和蛋白的表达量明显降低(P<0.05).经过培养,在聚乳酸-乙醇酸膜上观察与未转染组相比,NgR基因沉默各组均观测到种植细胞的大量贴附和生长.提示NgR基因沉默有促进骨髓间充质干细胞/许旺细胞贴附、生长的作用.
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复合他克莫司聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复大鼠胫神经缺损
背景:虽然单纯聚乳酸-乙醇酸导管修复大鼠神经缺损可部分恢复大鼠神经功能,但神经直径、再生纤维数量、髓鞘成熟度及功能恢复上均较自体神经移植差.目的:观察复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复大鼠胫神经缺损的可行性.方法:制作SD大鼠右侧胫神经缺损模型,随机分为3组,分别植入自体胫神经、单纯聚乳酸-乙醇酸导管及复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管修复.植入后3,6,12周行坐骨神经功能指数检查、电生理检查、组织学观测、腓肠肌湿质量测量.结果与结论:植入后第6,12周复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管组、自体胫神经组坐骨神经功能指数检查、电生理检查、组织学观测、腓肠肌湿质量测量结果优于单纯聚乳酸-乙醇酸导管组(P < 0.05),自体胫神经组、复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管组比较差异无显著性意义.说明复合他克莫司的聚乳酸-乙醇酸缓释导管桥接修复大鼠胫神经缺损可明显促进断端神经的再生,在晚期功能恢复上取得接近自体神经移植的效果.
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低温快速成型亲水改性复合人工骨支架的性能测定
背景：低温快速成型技术具有支架成型可控性、保持材料生物学活性和易于实现支架材料的三维多孔立体结构等优势，被迅速用于骨组织工程支架的制备。
目的：采用低温快速成型制备聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架，并检测其性能。
方法：采用低温快速成型设备分别制备聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石与聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架，通过电镜观察支架超微结构，以介质(乙醇)浸泡法测定支架孔隙率，采用电子试验机检测支架力学性能；将两种支架材料分别与大鼠成骨细胞共培养，培养12 h采用沉淀法检测细胞黏附率，培养1，3，5，7，9，12 d采用CCK-8法检测细胞增殖。
结果与结论：两组支架孔径均在理想范围内并具有较高孔隙率，但聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架的孔径波动范围大，孔径均值较聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架小且部分有闭塞现象。聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架的细胞黏附率及表面细胞增殖活性高于聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架(P<0.05)，力学性能低于聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架(P<0.05)。表明聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架具有良好的细胞相容性。 -
聚乳酸-乙醇酸微球的生物降解性和生物相容性研究
目的 考察基因重组人干扰素α-聚乳酸乙醇酸微球的生物降解性和生物相容性.方法 以缓冲液为介质,通过光学显微镜观察聚乳酸乙醇酸微球的体外降解;以Wistar大鼠为研究对象,观察给药部位的病理切片,评价微球的体内生物降解和生物相容性.结果 聚乳酸乙醇酸微球在体外,6周降解百分率超过80%,在体内6周可降解完全;给药部位病理切片观察,仅见轻微炎症反应,未见病理变化.结论 聚乳酸乙醇酸微球具有良好的生物降解性和生物相容性.
