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韧粘素与大鼠野百合碱性肺高压肺血管重建的相关性研究
目前已知,肺血管重建是不同原因肺高压的共同病理特征.韧粘素(tenascin,TN)是一种大分子细胞外基质蛋白,它参与血管的重建过程[1].本研究通过快速竞争性RT-PCR技术及免疫组化和图像分析方法,观测野百合碱性肺高压大鼠肺组织及肺动脉中TN mRNA的动态表达水平和TN蛋白的沉积、分布情况及其与血管平滑肌细胞增殖、迁移的关系,以期阐明TN在肺高压肺血管重建中的作用.材料和方法雄性SD大鼠72只,随机均分为野百合碱(MCT)组和正常对照(CON)组.MCT组大鼠以2%野百合碱液按60 mg/kg剂量在背部脊柱旁皮下注射,CON组同法给予等容生理盐水.分别于注射后第7、14、21、28 d测肺动脉平均压(mPAP).
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一氧化氮逆转高肺血流量所致肺血管细胞外基质重建的实验研究
细胞外基质主要包括胶原、弹力蛋白和纤维连接素等.它们相互作用构成复杂的网状结构,不仅起到细胞结构支架的作用,也可直接或通过对血管平滑肌细胞功能的调节参与肺高压时的肺血管重建.目前研究已发现,在左向右分流型先天性心脏病并发的肺高压中存在着胶原、弹性蛋白及韧粘素的合成增加.
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扩张型心肌病心力衰竭患者血清韧粘素-C的研究
目的 探讨扩张性心肌病伴心力衰竭患者血清韧粘素-C(TN-C)、脑钠肽(BNP)和Ⅲ型胶原前体氨端肽(PC-Ⅲ)的含量及意义.方法 对30例DCM患者和30例健康对照者采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)测定血清TN-C含量,应用免疫放射法(IRA)测定BNP和PC-Ⅲ含量.结果 与正常对照组相比,DCM患者血清TN-C含量显著增高(P<0.001).心力衰竭越重,DCM患者血清TN-C、BNP和PC-Ⅲ含量增加越明显,TN-C与左室射血分数负相关(r=-0.8947,P<0.001)、与BNP(r=0.9522,P<0.001)正相关结论DCM患者血清TN-C明显升高,血清TN-C可反映DCM患者心力衰竭的严重程度.
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韧粘素反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用
目的探讨韧粘素(TN)反义寡核苷酸(ODN)对培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用. 方法采用细胞计数及快速竞争性逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察不同剂量(5、10、20μg/ml)TN反义ODN和正义ODN对体外培养大鼠VSMC的增殖以及TNmRNA表达水平的影响. 结果TN反义ODN可有效抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖,作用呈剂量依赖性(反义组5、10、20μg/ml剂量细胞计数分别为105/ml×(4.99± 0.21)、(4.08±0.14)、(2.85±0.39),对照组为105/ml×(5.95±0.41),(P＜0.05);TN反义ODN亦可下调TN mRNA表达水平(反义组0.32±0.05,对照组为0.52±0.08;P＜0.01);而TN正义ODN则无上述作用. 结论TN反义ODN可能通过下调TNmRNA表达水平而抑制血管平滑肌细胞的增殖.
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韧粘素在IgA肾病患儿肾组织中的表达及其意义
目的:研究IgA肾病(IgAN)儿童肾组织中韧粘素(TN)的分布、表达以及其与疾病活动性和慢性化指标的关系.方法:采用免疫组化ABC法,观察12例IgAN肾组织中TN蛋白分布及表达.结果:①TN在正常肾组织中,肾小球阴性、肾小管间质及血管(动脉)局灶性弱阳性表达.而在IgAN病人主要于ECM积聚处表达明显增加,且其在肾小球表达与肾小管间质表达正相关(r=0.675,P<0.05).②TN表达与IgAN病人慢性化指标正相关(肾小球:r=0.572,P<0.05;肾小管间质:r=0.824,P<0.01),而与活动性指标关系不密切(P>0.05).③TN在肾组织中表达与Scr、尿蛋白排泄量相关,而与性别、年龄、病程、血清总蛋白、白蛋白等临床指标无关(P>0.05).结论:①TN在IgAN病人肾组织中ECM积聚处表达明显增加.②TN蛋白水平在肾小球及肾小管间质表达可作为IgAN慢性化指标.为临床判断IgAN病人病情轻重、预后及治疗提供依据.
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韧粘素在野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心室组织中的表达及意义
目的观察韧粘素(Tenascin,TN)在野百合碱诱导肺动脉高压右心室表达变化,探讨其在心室结构重建过程中的作用.方法72只SD大鼠随机分为模型组和对照组,野百合碱一次性皮下注射法复制肺动脉高压大鼠模型,右心导管法测肺动脉压力,计算右室/(左室+室间隔)[RV/(LV+SP)]值代表右心室肥厚指数,免疫组织化学染色和RT-PCR法检测TN在右心室组织中表达.结果模型组大鼠第14d出现右心室肥大,RV/(LV+SP)(0.282±0.0472),与对照组(0.237±0.0154)相比较有显著性差异(P＜0.05);第21d平均肺动脉压力(mPAP)升高达(26.38±3.86)mmHg明显高于对照组(15.21±1.78)mmHg(P＜0.01).TN mRNA在对照组大鼠右心室组织中微量表达,而模型组大鼠TNmRNA表达水平于用药7天后显著升高(0.36±0.13)与对照组(0.19±0.06)比较有显著性差异(P＜0.01),免疫组织化学染色显示模型组大鼠右心室组织TN合成增加.结论TN在肺动脉高压右心室表达增加,可能在右心室结构重建过程中发挥重要的作用.
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野百合碱诱导大鼠肺高压时韧粘素mRNA
目的观察野百合碱(MCT)所致肺高压大鼠肺组织和肺动脉中韧粘素(TN)mRNA的动态表达水平,探讨其与肺高压肺血管重建的关系.方法 SD大鼠随机分为MCT组和正常对照组(CON),采用野百合碱皮下注射法诱导建立大鼠肺高压模型,并通过快速竞争性RT-PCR技术检测不同时间点(给药后第7,14,21,28天)大鼠肺组织和肺动脉中TN mRNA的表达水平.结果 TN mRNA水平在给药后第7天即有上调,CON组肺组织TN mRNA为 0.29±0.04,MCT组为 0.56±0.08,两组间差异有显著性(P<0.01);CON组肺动脉TN mRNA 为 0.30±0.04,MCT组为 0.57±0.05,两组间差异有显著性(P<0.05).TN mRNA水平上调早于肺动脉压的升高,随压力上升和时间延长TN mRNA继续增高.结论 TN参与了肺高压肺血管重建过程,在肺高压发病中可能具有重要作用.
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扩张型心肌病患者血清韧粘素-C的变化及意义
目的:探讨扩张型心肌病(DCM)伴心力衰竭患者血清韧粘素-C(TN-C)、脑钠肽(BNP)和Ⅲ型胶原前体氨端肽(PC-Ⅲ)的含量及意义.方法:对30例DCM患者和30例健康对照者采血测定血清TN-C、 BNP和PC-Ⅲ含量.结果:DCM患者血清TN-C含量显著高于正常对照组(P＜0.01).心力衰竭越重,DCM患者血清TN-C、BNP和PC-Ⅲ含量增加越明显,TN-C与左室射血分数负相关(r=-0.894 7,P＜0.01)、与BNP(r=0.952 2, P＜0.01)和PC-Ⅲ(r=0.240 4, P＞0.05)正相关.结论:DCM患者血清TN-C明显升高,血清TN-C可反映DCM患者心力衰竭的严重程度.
