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  • 大肠埃希菌耐药相关基因和可移动遗传元件指标与样本聚类分析

    作者:黄东标;徐素兰;周茂亮;胡晓燕;马拥军;孔海深

    目的 调查多重耐药大肠埃希菌耐药相关基因与可移动遗传元件的相互关系,以及菌株间的亲缘性关系.方法 收集浙江省磐安县人民医院2009年6月-2010年6月临床分离的多重耐药大肠埃希菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)分析β-内酰胺类与氨基糖苷类耐药相关基因以及可移动遗传元件,并对检测结果作指标与样本聚类分析.结果 20株多重耐药大肠埃希菌共检出4种β-内酰胺类耐药相关基因,4种氨基糖苷类耐药相关基因,以及5种可移动遗传元件的遗传标记.指标聚类分析显示,耐药基因TEM、CTX-M-1、aadA5与可移动遗传元件traA、IS26、ISEcpl相关联,耐药基因OXA-1、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、rmtB与可移动遗传元件trbC、IS903相关联.样本聚类分析显示,本院20株耐药大肠埃希菌可分为两个群,并且两群菌株演化明显.结论 多重耐药大肠埃希菌耐药相关基因与可移动遗传元件有关,对菌株进行样本聚类分析可获得菌株亲缘性关系,对控制医院感染意义重大.

  • 耐β-内酰胺类肺炎克雷伯菌常见耐药元件与菌株亲缘性研究

    作者:黄忠强;翁幸鐾;韦雪菱;闫莉梅;吴柳倩

    目的 调查耐β-内酰胺类肺炎克雷伯菌(DRKP)常见耐药元件的携带情况和菌株间的亲缘性.方法 收集2014年1-12月医院住院患者痰液中分离到的30株DRKP,采用PCR分析17种β内酰胺类、6种氨基糖苷类获得性耐药基因以及4种可移动遗传元件遗传标记,并对检测结果作样本聚类分析.结果 30株DRKP对β-内酰胺类(头孢唑林、头孢他啶、头孢呋辛、头孢噻肟等)、氨基糖苷类(庆大霉素、阿米卡星等)药物及环丙沙星均耐药,耐药率均为100.0%,对亚胺培南与美罗培南均敏感,耐药率均为0;每株DRKP均检出β-内酰胺类和氨基糖苷类药物获得性耐药基因及MGEs标记;样本聚类分析提示,30株DRKP有5组呈克隆传播,存在医院感染.结论 β-内酰胺酶blaTEM、blaD HA基因,氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ、aph3'-Ⅰ基因,MGEs标记intⅠ1、IS903在DRKP中流行,是导致该组菌对多种抗菌药物耐药的重要原因,基于获得性耐药基因与可移动遗传元件标记检测结果的样本聚类分析是监控医院感染实用手段.

  • 阴沟肠杆菌分离株五类抗菌药物耐药基因元件分析

    作者:张卉;徐燕;荆兆海;杨平玲;刘霞;王彦;周彦

    目的 调查一组20株阴沟肠杆菌中五类抗菌药物耐药基因元件的携带状况,及菌株间的亲缘关系.方法收集2014年1-12月医院患者痰标本中分离的20株阴沟肠杆菌,12种抗菌药物敏感性试验为K-B法.采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析20种β-内酰胺类耐药基因、17种氨基糖苷类耐药基因、5种喹诺酮类耐药基因、2种氯霉素耐药基因、4种磺胺类耐药基因、7种可移动遗传元件遗传标记.阳性耐药基因测序后直接作BLAST比对.耐药基因检测结果作样本聚类分析(UPGMA法).结果 20株阴沟肠杆菌对β-内酰胺类药物除亚胺培南、美罗培南外均为耐药,对氨基糖苷类与磺胺类药物亦均为耐药. 20株菌共检出4种β-内酰胺酶类耐药基因、6种氨基糖苷类耐药基因、3种喹诺酮类耐药基因、1种氯霉素耐药基因、4种磺胺类耐药基因、4种可移动遗传元件遗传标记,且阳性率较高.样本聚类分析显示:除13号菌株外的其余19株显聚集性.其中4~7号菌株,6~11号菌株,14~16号菌株均为克隆传播.本组菌检出的3个克隆可能为医院感染.结论 本组20株阴沟肠杆菌携带的β-内酰胺类耐药基因、氨基糖苷类耐药基因、喹诺酮类耐药基因、氯霉素耐药基因、磺胺类耐药基因和可移动遗传元件遗传标记是对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、氯霉素、磺胺类产生耐药的重要原因.

  • 侵袭性感染金黄色葡萄球菌耐药基因与荚膜抗原基因研究

    作者:唐朝贵;林涛;陈滢;李前辉;张小云

    目的:调查金黄色葡萄球菌的耐药基因与荚膜抗原基因携带情况及毒力基因的亲缘性,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院住院患者无菌部位体液分离出的金黄色葡萄球菌共15株,以金黄色葡萄球菌的 nuc看家基因PCR检测阳性判定为金黄色葡萄球菌,结合金黄色葡萄球菌的细胞毒素与侵袭毒素基因检测结果作样本聚类分析,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果15株金黄色葡萄球菌共检出β‐内酰胺类耐药基因mecA 8株,阳性率为53.3%,氨基糖苷类耐药基因 aac(6′)/ap h(2″)5株,阳性率为33.3%、ap h(3′)‐Ⅲ2株,阳性率为13.3%,大环内酯类耐药基因ermB 2株,阳性率为13.3%;季胺类消毒剂耐药基因 qacA 2株,阳性率为13.3%,荚膜抗原基因cap57株,cap85株,阳性率分别为46.7%、33.3%。结论15株金黄色葡萄球菌β‐内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类耐药基因和耐药表型相符,但这组菌侵袭性感染的结局不佳比率高。

  • 产AmpC酶肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药机制研究

    作者:郑丹;朱健铭;袁求文;吴正海;朱雪萍

    目的:了解产AmpC酶肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类耐药基因、AmpC型β-内酰胺酶基因,整合子遗传标记的存在状况以及菌株的亲缘关系。方法收集医院住院患者痰液标本中分离的肺炎克雷伯菌20株,头孢西丁三维试验均为阳性,采用聚合酶链反应(PCR)法分析7种氨基糖苷类修饰酶、6种16S rRNA甲基化酶、6种AmpC型β-内酰胺酶基因和3种整合子遗传标记,并对检测结果作样本聚类分析。结果20株产A m pC酶肺炎克雷伯菌均检出氨基糖苷类耐药基因和blaDHA、intⅠ1基因,氨基糖苷类修饰酶基因检出 aac(3)-Ⅱ18株、aac(6')-Ⅰb 10株、ant(3″)-Ⅰ5株,检出阳性率分别为90.0%、50.0%、25.0%,16S rRNA甲基化酶检出 rmtB 2株,检出阳性率为85.0%;样本聚类分析提示,该组菌可分为两个簇群,A簇群中又可分为 A1、A2两个亚簇群,A1亚簇群中可分为A1.1(1、5、7、8、10、12、16、20号株)和 A1.2(6、15)两个子簇群,均为克隆传播;A2亚簇群中可分为A2.1(2、3、4号株)和A2.2(9、11、13、18、19号株)两个子簇群,亦均为克隆传播,B簇群(14、17号株)亦为克隆传播。结论肺炎克雷伯菌耐药表型与基因型结果相符,携带 blaDHA基因导致对 AmpC型β-内酰胺类药物耐药,携带 aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、rmtB基因导致对氨基糖苷类药物耐药,Ⅰ类整合子可能是上述基因的载体,本组菌株存在医院感染的可能。

  • 泛耐药肺炎克雷伯菌耐药基因检测及聚类分析

    作者:马红映;汪丽;虞亦鸣;吕婉飞;邓在春;王翎

    目的:调查三家医院31株泛耐药肺炎克雷伯菌(PDR‐KPN)获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,并分析其亲缘关系。方法收集三家医院2013年1月-12月分离31株PDR‐K PN ;采用聚合酶链反应(PCR)法检测β‐内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类获得性耐药基因以及可移动遗传元件标记基因。对全部耐药基因检测结果作样本聚类分析。结果31株PDR‐KPN每株均检出β‐内酰胺类、氨基糖苷类药物获得性耐药基因,喹诺酮类药物作用靶位 gyrA基因突变阳性率100%;31株blaK PC与ISK pn6均阳性,blaK PC‐ISK‐p n6连锁检测阳性率100.0%。样本聚类分析显示A、B、C三家医院的菌株分为三个簇群。B医院与C医院的菌株有较近的亲缘关系。结论本组菌株携带获得性耐药相关基因导致对相关抗菌药物耐药。指标聚类分析提示菌株之间存在克隆传播。

  • 耐药大肠埃希菌可移动耐药元件研究

    作者:茅孝莹;常燕子;糜祖煌;许小敏;陈琳

    目的:调查耐药大肠埃希菌中可移动耐药元件(可移动遗传元件遗传标记与耐药基因)的携带情况,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院2015年1—12月住院患者痰液标本中分离的耐药大肠埃希菌共32株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析3种可移动遗传元件与16种β-内酰胺类耐药基因并对结果进行了样本聚类分析,以了解菌株的亲缘关系。结果32株耐药大肠埃希菌共检出1种可移动遗传元件遗传标记intⅠ1共27株(84.4%);β-内酰胺类耐药基因总检出率为100.0%,共检出4种阳性基因:blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-群、blaOXA-1群;氨基糖苷类耐药基因总检出率为93.8%,共检出5种阳性基因:aac(3)-Ⅱ、aac (6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、ap h(3′)-Ⅰ。结论耐药大肠埃希菌检出的可移动耐药元件是导致对β-内酰胺类、氨基糖苷类、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药的重要原因,并且耐药表型和基因型一一对应;本组菌中三个不同的克隆有医院感染的可能。

  • 产ESBLs大肠埃希菌功能基因的样本聚类分析研究

    作者:李海英;孙敏;李月阳;王华;张亚妮;崔雅婷;薛海兰

    目的:调查一组产ESBLs大肠埃希菌株间的亲缘性关系。方法收集医院2013年住院患者标本,从中分离到产ESBLs大肠埃希菌共20株,了解其样本聚类分析的聚集性,为消毒隔离提供依据;采用聚合酶链反应(PCR)分析获得性耐药基因并对检测结果作样本聚类分析(UPGMA法)。结果20株大肠埃希菌中,获得性耐药基因共检出6种β‐内酰胺类耐药相关基因、4种氨基糖苷类耐药相关基因、1种消毒剂与磺胺耐药重叠基因、7种可移动遗传元件的遗传标记,2种毒力基因均有检出;β‐内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、消毒剂与磺胺耐药重叠基因、可移动遗传元件遗传标记和毒力基因的总阳性率分别为100.0%、95.0%、80.0%、100.0%和40.0%;样本聚类分析显示,本组20株菌可分A与B两大群,A群又可分A1与A2两小群;A1群13个成员每个菌株均携带blaCTX‐M‐9cluster基因,A2群5个成员或携带blaCTX‐M‐1cluster基因,或不携带blaCTX‐M基因;B群两个成员均携带blaDHA基因。结论本组20株产ESBLs大肠埃希菌的样本聚类分析显示出聚集性,对感染者仍有加强消毒隔离必要性。

  • 基于耐药相关基因耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌亲缘关系分析

    作者:黄东标;李云亭;单小云;周茂亮;胡晓燕;马拥军

    目的 了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药相关基因与可移动遗传元件存在状况和菌株之间的亲缘关系.方法 收集2014年1-12月浙江省磐安县人民医院住院患者标本中分离20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用gyrA测序后BLASTn比对确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)法分析40种β-内酰胺酶获得性耐药基因、两种膜孔蛋白基因、12种氨基糖苷类获得性耐药基因、1种喹诺酮类作用靶位基因、4种喹诺酮类获得性耐药基因、12种可移动遗传元件遗传标记,并对检测结果作样本聚类分析.结果 20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率很高,除未检出喹诺酮类药物获得性耐药基因外,其他基因均有阳性检出;共检出4种β-内酰胺类获得性耐药基因、两种膜孔蛋白基因、两种氨基糖苷类获得性耐药基因、1种喹诺酮类作用靶位基因、8种可移动遗传元件遗传标记,且阳性率较高;样本聚类分析提示20株菌可分为A与B两个簇群;A簇群5株,分别为1、2、3、4、16号株,为克隆传播;B簇群分B1、B2二亚簇群,B1亚簇群12株,分别为5、6、7、8、9、10、11、13、14、17、18、19号株,为克隆传播;B2亚簇群3株,分别为12、15、20号株,亦为克隆传播.结论 肺炎克雷伯菌耐药表型与基因型结果相符,菌株呈3个克隆传播特征,为医院感染.

  • 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药相关基因分析

    作者:王磊;金敏;黄支密;李云亭;周茂亮;黄东标

    目的:探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带,与菌株间的亲缘性。方法收集2014年1-12月住院患者中分离20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,经 gy rA测序比对确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类共57种耐药相关基因与12种可移动遗传元件遗传标记,后对检测结果作样本聚类分析。结果20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌每株均检出β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、喹诺酮类作用靶位基因 gy rA突变以及可移动遗传元件标记;20株菌共检出4种β-内酰胺类耐药基因、4种氨基糖苷类耐药基因、1种16S rRNA甲基化酶基因、1种喹诺酮类耐药基因、6种可移动遗传元件遗传标记,阳性率非常高,且阳性基因可分为6种阳性模式;样本聚类分析发现,20株菌可区分为A、B两个家族,A家族中1号株为孤独株,A1(2和9号株)与A2(10、11、12、13、15、16、17和18号株)子家族均为克隆传播,A3子家族有2株菌;B家族(3、4、5、6、7、8和20号株)亦为克隆传播,并已构成暴发流行。结论本组肺炎克雷伯菌中携带的耐药基因与耐药表表型相对应,样本聚类分析提示本组菌有克隆传播,有的已构成暴发流行。

  • 浙江宁波分离株泛耐药鲍氏不动杆菌常见耐药基因研究

    作者:王珊珊;方晶晶;陶静;江洁曙

    目的:调查泛耐药鲍氏不动杆菌耐药基因存在状况和菌株间的亲缘关系。方法收集2013年1-12月浙江省宁波大学医学院附属医院患者标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌33株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析33种β‐内酰胺类常见耐药基因、3种β‐内酰胺类耐药基因与插入序列连锁检测、14种氨基糖苷类常见耐药基因、1种喹诺酮类常见耐药基因、1种获得性外排泵泵蛋白基因,再对检测结果作样本聚类分析。结果33株泛耐药鲍氏不动杆菌每株均检出β‐内酰胺类、氨基糖苷类药物耐药基因和喹诺酮类药物作用靶位gyrA基因的突变,共检出4种β‐内酰胺类耐药基因:blaT EM、blaA DC、blaOX A‐23群、blaOX A‐51群;5种氨基糖苷类耐药基因:armA 、aac(3)‐Ⅰ、aac(6′)‐Ⅰb、ant(3″)‐Ⅰ、aph3′‐Ⅰ;喹诺酮类药物作用靶位 gyrA基因均存在突变;外排泵泵蛋白基因 adeB检出率高;β‐内酰胺类耐药基因与插入序列连锁检测结果为:32株 blaADC 阳性菌29株blaADC‐ISaba1阳性(连锁检测阳性率90.6%);33株blaOXA‐23群阳性菌株blaOXA‐23群‐ISaba1均阳性(连锁检测阳性率100.0%);33株blaOXA‐51群阳性菌株blaOXA‐51群‐ISaba1均阴性(连锁检测阳性率0.0);样本聚类分析显示,6号株为外簇群不携带 blaTEM 、blaA DC 、adeB等基因,其余为同一簇群(A 簇群),A‐1簇群blaADC‐ISaba1检测阳性,即blaADC由ISaba1介导,A‐2簇群blaADC‐ISaba1检测阴性,即blaADC不由ISaba1介导。结论泛耐药鲍氏不动杆菌菌株聚集现象明显,并存在5个克隆传播,获得菌株之间的亲缘关系对医院感染实时监测和控制意义重大。

  • 耐药大肠埃希菌湖北监利分离株常见耐药基因研究

    作者:陈风;张才仕;秦户远;梁建国;翁幸鐾

    目的 调查一组耐药大肠埃希菌分离株中β-内酰胺类、氨基糖苷类耐药基因与可移动遗传元件遗传标记的携带状况及菌株间的亲缘关系. 方法 收集2016年1-6月医院住院患者痰液标本中分离的耐药大肠埃希菌20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析15种β-内酰胺酶基因、7种氨基糖苷类修饰酶基因、1种16SrRNA甲基化酶基因、4种可移动遗传元件遗传标记;阳性耐药基因测序后直接作BLAST比对,耐药基因检测结果作样本聚类分析(UPGMA法). 结果 20株耐药大肠埃希菌对头孢类、β-内酰胺类复合制剂、喹诺酮类均耐药,对碳青霉烯类均敏感;20株菌共检出4种β-内酰胺酶基因,4种氨基糖苷类修饰酶基因,4种可移动遗传元件遗传标记,且阳性率较高;样本聚类分析显示20株菌中的18株出现了明显的聚集性,出现4个克隆. 结论 20株耐药大肠埃希菌携带的β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因和可移动遗传元件遗传标记是对β-内酰胺类和氨基糖苷类产生耐药的重要原因;本组菌检出的四个克隆高度疑似医院感染,同一克隆菌株携带相同基因.

  • 耐药肺炎克雷伯菌湖北襄阳分离株获得性耐药元件研究

    作者:史莉;孙光成;宋涛;翁幸鐾

    目的 调查耐药肺炎克雷伯菌获得性耐药元件基因的携带情况及菌株间的亲缘关系,为临床治疗提供参考依据.方法 收集2016年1-10月医院住院患者痰液标本分离15株耐药肺炎克雷伯菌,用K-B法测定9种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析35种β-内酰胺类获得性耐药基因,21种氨基糖苷类获得性耐药基因和10种町移动遗传元件遗传标记;阳性耐药基因测序后直接作BLAST比对,耐药基因检测结果作样本聚类分析.结果 15株耐药肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率高;15株菌每株均检出β内酰胺酶基因,总阳性率达100.0%,共检出7种β-内酰胺酶基因,其中仅检出1种β-内酰胺酶基因1株,占6.7%,同时检出2种9株,占60.0%,同时检出3种5株,占33.3%;样本聚类分析可见有一定的聚集性,并可分为A与B二个群;除A群有2个菌株属克隆传播,其余菌株亲缘关系稍远.结论 本组15株耐药肺炎克雷伯菌同时携带β-内酰胺类药物获得性耐药基因、氨基糖苷类药物获得性耐药基因和可移动遗传元件遗传标记,是对β-内酰胺类和氨基糖苷类产生耐药的重要原因.

  • 耐药基因与管家基因的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌亲缘关系研究

    作者:张顺;黄左安;胡珊珊;费秋萍;胡笑蓉;江雪;陈琳;蔡挺

    目的:探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带情况及菌株之间的亲缘关系。方法收集2013年1-12月医院住院患者中分离到的20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用 gy rA与parC基因测序确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析56种获得性耐药基因、12种MGEs标记、膜孔蛋白基因(ompK35、ompK36)以及喹诺酮类作用靶位基因(gyrA、parC),后对检测结果作样本聚类分析。结果20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌共检出6种β-内酰胺类药物获得性耐药基因、2种膜孔蛋白基因、5种氨基糖苷类药物获得性耐药基因、2种喹诺酮类药物作用靶位基因、1种喹诺酮类药物获得性耐药基因、8种可移动遗传元件标记;样本聚类分析提示,10号为孤立株,其余19株呈明显的聚集性(A家族);A家族可分为A1和A2;A1又可分为A1-1和A1-2;A1-1再可分为A1-1-1和A1-1-2小家族;A1-1-1和A1-1-2小家族聚集性更为明显,并分别出现克隆播散。结论获得性耐药基因与管家基因检测结果提供了本组菌株耐药的遗传基础,并且与耐药表型相对应,样本聚类分析是监控医院感染实用手段。

  • 泛耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺类与氨基糖苷类耐药元件研究

    作者:郑丹;翁幸鐾;袁求文;梁莉萍;陈璐茜

    目的:探讨一组泛耐药鲍氏不动杆菌β‐内酰胺类与氨基糖苷类耐药基因与插入序列的携带情况及其亲缘关系,为临床治疗提供参考依据。方法收集2014年1-12月中医院患者痰液标本分离出的20株泛耐药鲍氏不动杆菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析14种β‐内酰胺类耐药基因、5种氨基糖苷类耐药基因、5种插入序列遗传标记,并作了β‐内酰胺类耐药基因blaOXA‐23群、blaOXA‐51群、blaA DC与ISaba1连锁检测,对检测结果作样本聚类分析。结果20株泛耐药鲍氏不动杆菌共检出6种β‐内酰胺类耐药基因、5种氨基糖苷类耐药基因、2种插入序列遗传标记,且阳性率非常高;每株菌均检出至少5种β‐内酰胺类耐药基因和1种氨基糖苷类耐药基因,IS26和ISaba1亦均有检出;β‐内酰胺类耐药基因与 ISaba1连锁检测为blaOXA‐23群与 ISa‐ba1及blaADC与ISaba1连锁检测阳性,blaOXA‐51群与 ISaba1连锁检测为阴性。结论泛耐药鲍氏不动杆菌中携带的耐药基因和耐药表型相对应;携带β‐内酰胺类与氨基糖苷类的耐药基因是该菌对这两大类药物耐药的重要原因,ISaba1是β‐内酰胺类耐药基因重要载体。

  • 泛耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药基因研究分析

    作者:高慧;蔡培泉;郁震;曹娟;糜祖煌;姜秀峰

    目的 了解临床分离20株泛耐药肺炎克雷伯菌(PDR-KPN)耐药基因及可移动遗传元件的携带情况,并进行相关耐药机制分析,为临床合理用药提供依据.方法 对20株PDR-KPN进行10类61种耐药相关基因的PCR法检测,包括A、B、C、D类β-内酰胺酶基因、16SrRNA甲基化酶基因、氨基糖苷修饰酶基因、喹诺酮类作用靶位gyr基因,接合性质粒、整合子、转座子/插入序列遗传标记基因.结果 20株PDR-KPN均同时检出β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药基因及可移动遗传元件标记,共检出8类20种耐药相关基因,分别为A类β-内酰胺酶基因bla TEM、blaSHV、blaCTX-M-1、blaLAP、blaKPC,C类β-内酰胺酶基因blaDHA,16SrRNA甲基化酶基因rmt,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅱ、aac(6)-Ⅰb、ant(3')-Ⅰ、aph3'Ⅰ,喹诺酮类作用靶位gyr第83位基因突变,接合性质粒标记基因traA、trbC,整合子标记基因int Ⅰ 1,转座子/插入序列标记基因tnp513、ISEcp1、IS26、IS903、ISKpn6.结论 20株PDR-KPN均同时存在多种耐药基因及可移动遗传元件介导加速临床耐药及播散.

  • 质粒型AmpC酶DHA基因在耐药肺炎克雷伯菌中的流行研究

    作者:鲁艳;李从荣;刘东华;胡小平;穆海霞

    目的 调查对常用抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌(DRK)获得性耐药基因及相关可移动遗传元件的携带状况及菌株间的亲缘关系.

  • 大肠埃希菌临床连续分离株常见耐药元件检测与分析

    作者:茅孝莹;许小敏;陈琳;常燕子;糜祖煌

    目的 调查一组60株大肠埃希菌临床连续分离株常见耐药元件的携带情况和菌株间的亲缘性.方法收集2015年10月-12月医院住院患者分离的60株大肠埃希菌临床连续分离株,采用K-B法测定12种抗菌药物的敏感性,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析法分析15种β-内酰胺类、6种氨基糖苷类、3种磺胺类耐药相关基因以及4种可移动遗传元件遗传标记,并对检测结果作样本聚类分析.结果 60株大肠埃希菌对氨苄西林、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药率>50%,对其它7种抗菌药物的耐药率<15%,对碳青霉烯类均敏感;60株菌共检出常见耐药元件基因15种,其中43株检出β-内酰胺类耐药基因,检出率为71.7%,33株检出氨基糖苷类耐药基因,检出率为55.0%,40株检出磺胺类耐药基因,检出率为66.7%,42株检出可移动遗传元件遗传标记基因,检出率为70.0%;共检出6种β-内酰胺类耐药基因,4种氨基糖苷类耐药基因, 3种磺胺类耐药基因,2种可移动遗传元件遗传标记基因;样本聚类分析提示本组菌疑似存在8个克隆株,同一克隆内菌株携带着相同耐药元件,存在医院內感染.结论 blaT EM、aac(3)-Ⅱ、sul1、d f rA17、intⅠ1是导致本组菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类和磺胺类药物耐药的重要原因,耐药表型与基因型相符率高.

  • 浙江浦江耐药鲍氏不动杆菌分离株获得性耐药元件研究

    作者:朱葵向;张财富;应华永;金妙玲;兰蕾

    目的:调查鲍氏不动杆菌获得性耐药基因和可移动遗传元件标记的携带情况,以及菌株间的亲缘关系,了解其耐药机制及流行病学情况。方法收集2015年1-12月浙江省浦江县人民医院患者标本中分离鲍氏不动杆菌20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析32种β‐内酰胺类药物获得性耐药基因、15种氨基糖苷类药物获得性耐药基因、10种可移动遗传元件遗传标记,再对检测结果作样本聚类分析(U PGM A法)。结果20株鲍氏不动杆菌共检出4种β‐内酰胺类获得性耐药基因(blaTEM、blaADC、blaOXA‐23群、blaOXA‐66),3种氨基糖苷类获得性耐药基因(aac(3)‐Ⅰ、aac(6′)‐Ⅰ b、ant(3″)‐Ⅰ),5种可移动遗传元件遗传标记(intⅠ1、tnpU、tnp513、ISaba1、IS26);阳性基因检出率高,可分为6种阳性模式;样本聚类分析显示,菌株分为A与B两个群,并均存在克隆传播:A群的1‐2‐4‐5‐7‐9‐17‐19号株,3‐10号株等,B群的16‐18号株,6‐14‐20号株,8‐11‐12‐13号株。结论 鲍氏不动杆菌检出β‐内酰胺类和氨基糖苷类药物的获得性耐药基因是对该二类药物耐药的主要原因,并且这些获得性耐药基因由可移动遗传元件介导,获得菌株之间的亲缘关系对院内感染实时监测和控制医院感染意义重大。

  • 携带blaK PC基因肺炎克雷伯菌的氨基糖苷类耐药元件研究

    作者:张筠;马红映;汪丽;常燕子;邓在春

    目的 调查宁波两家医院24株携带blaK PC基因耐碳青霉烯类抗菌药物肺炎克雷伯菌(CRKP)的氨基糖苷类耐药基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,并分析其亲缘关系.方法 收集两家医院2016年1月 -12月分离出的24株携带blaK PC基因的CRKP菌,采用聚合酶链反应(PCR)法检测氨基糖苷类及可移动遗传元件标记基因,将氨基糖苷类耐药元件检测结果作样本聚类分析.结果 20株菌 rmtB和ant(3")-Ⅰ基因均阳性,1株菌仅 rmtB基因阳性,接合性质粒标记 traA、trbC检出率分别为91.7% 和95.8%,插入序列 IS26、IS903、ISEcp1检出率分别为87.5%、91.7% 和87.5%,样本聚类分析显示菌株分为A与B二群,A群菌株有明显的聚集性.结论 本组CRKP菌株携带氨基糖苷类获得性耐药相关基因导致对氨基糖苷类抗菌药物耐药,指标聚类分析提示菌株之间存在克隆传播.

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