首页 > 文献资料
-
抗α1-肾上腺素受体抗体介导大鼠心血管损伤模型的建立
目的建立具有激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体的大鼠模型,并观察该抗体对大鼠血压、心脏、肾脏和血管结构及c-jun等原癌基因mRNA表达的影响.方法用α1肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫Wistar大鼠,监测收缩压及心率及抗α1肾上腺素受体抗体滴度;用光镜和电镜观察心脏、肾脏及主动脉的病理变化,并计算心脏/体重比、肠系膜第三级动脉的管壁/管腔比;用RT-PCR的方法半定量检测心肌组织的α1A,B,D肾上腺素受体、c-jun和c-fos的表达;分离的成年大鼠心肌细胞游离钙离子的变化用激光共聚焦显微镜检测.结果在免疫后2周抗α1肾上腺素受体抗体开始产生,并到实验结束时仍维持较高滴度;在实验过程中,免疫组血压心率与对照组无明显差异,但均显著低于自发性高血压大鼠组.免疫组心脏体重比显著高于正常对照组,但低于自发性高血压大鼠组;在免疫组,肠系膜动脉第三级分支的管壁/管腔比显著高于正常对照组,与SHR组相似.电镜结果显示心肌细胞肥大、线粒体增多,心肌间质胶原纤维增多;主动脉平滑肌细胞线粒体增多,间质胶原纤维增多.在免疫组中,α1A,B肾上腺素受体的表达与正常对照无显著差异,但α1D肾上腺素受体表达显著降低,同时c-jun的表达显著增加,而c-fos表达与正常对照无差异.该抗体可增加心肌细胞内游离钙离子浓度的变化,与加抗体前有显著差异,与去甲肾上腺素作用相似,该作用可被哌唑嗪阻断,而正常IgG无影响.结论通过合成肽免疫的方法可以建立具激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体的大鼠模型;该抗体对正常Wistar大鼠的血压无影响,可能为α1D肾上腺素受体表达下调所致;但该抗体可以引起免疫大鼠心脏、血管及肾脏损害,并可增加心肌细胞游离钙离子的浓度及上调心脏c-jun基因的表达,可能参与高血压心血管重塑.
-
1-(2,6-二甲氧基)-2-(3,4-二甲基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)拮抗α1肾上腺素受体的特性
目的研究DDPH对α1-肾上腺素受体(α1-AR)及其亚型的拮抗作用.方法放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验.结果 DDPH对125I-BE2254与大鼠脑皮质和脾脏α1-AR结合呈竞争性拮抗作用.pKI值在两者间无显著性差别, Hill系数均接近于1.0.在分别稳定表达α1A,α1B或α1D-AR的克隆HEK293细胞中,其拮抗的pKI值α1A和α1D比α1B-AR高约2倍,Hill系数均接近于1.0.并拮抗去甲肾上腺素(NE)介导大鼠主动脉,肾动脉和脾脏收缩的pA2值,在三者间无显著差别,斜率接近1.0.结论 DDPH对α1-AR有竞争性拮抗作用,但其作用对α1-AR亚型无选择性.
-
含哌嗪化合物作为受体配体的研究进展
目的 综述了含哌嗪化合物作为受体配体的研究进展.方法 综合国内外文献阐述了含哌嗪化合物作为多巴胺(DA)受体、5-羟色胺(5-HT)受体、α1肾上腺素受体(α1-AR),黑皮质素-4受体(MC4R)以及σ受体配体等方面的新研究概况.结果与结 论含哌嗪化合物作为相应的受体配体具有广泛的生物活性,是目前研究开发的活跃领域之一,随着研究的不断深入,将有越来越多选择性高、药动学性质好的含哌嗪环药物应用于临床.
-
镁离子与心律失常的研究进展
镁在心血管疾病中具有保护作用,给予镁剂治疗可减少心律失常的发生.但镁不同于其他抗心律失常药,镁通过复合于其他离子通道,改变其方式而发挥作用,且在免疫缺陷中起到第二信使的作用.而α1肾上腺素受体可刺激心肌细胞释放镁离子,介导镁离子转运,但其在心律失常发生、发展中的具体机制尚不清楚.明确镁离子相关发病机制,指导临床治疗甚为重要.
-
糖尿病合并高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体的变化
目的:探讨糖尿病合并高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体(α1-AR)及其三种亚型的变化规律和可能的意义.方法:用Wistar雄性大鼠建立糖尿病合并高血压模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验等方法观察心脏α1肾上腺素受体(a1-AR)及其三种亚型的改变.结果:与正常对照大鼠相比.糖尿病合并高血压大鼠心脏α1-AR大结合容量(Bmax)显著增加(P<0.05),且α1A-AR和α1D-AR均增加.糖尿病合并高血压大鼠左心房α1-AR介导的大收缩反应较对照组降低41%(P<0.05),pD2值不变.α1-AR亚型选择性拮抗剂5-MU、spiperon和BMY7378拮抗NE正性变力效应的pA2值不变.结论:糖尿病合并高血压大鼠心脏α1-AR介导的大收缩反应的降低,其主要与受体后信号转导效应减弱有关,其中以α1A-AR和α1D-AR尤为显著.
-
去甲肾上腺素引起的α1肾上腺素受体三种亚型脱敏过程的差异
将含有α1肾上腺素受体(α1-AR)三种亚型的全长cDNA质粒分别转染到人胚胎肾脏细胞(HEK 293),α1A-,α1B-和α1D-AR在HEK 293细胞株上得到高水平稳定表达(Bmax达pmol/mg水平),用3H-inositol标记和柱层析法测定细胞磷酸肌醇蓄积.观察在去甲肾上腺素(NE)长期作用下α1三种受体亚型介导磷酸肌醇蓄积敏感性降低的差别.结果表明,α1三种受体亚型介导的磷酸肌醇蓄积效应的减弱与NE预温育的时间和浓度呈依赖关系.在激动剂持续作用下α1三种受体亚型发生脱敏的过程不同,其中α1A-AR脱敏发生快,脱敏所需NE的浓度低;α1D-AR脱敏慢,所需NE的浓度高;α1B-AR介于上述两者之间.
-
α1肾上腺素受体在调控快激活延迟整流钾电流中的作用
目的 探讨α1肾上腺素受体在调控快激活延迟整流钾电流(Ikr)中的作用.方法 制 备豚鼠心肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞Ikr.心肌细胞采用α1肾上腺素受体激动剂苯肾上腺素0.1 μmol/L处理后分为五组:A组作为对照;B1、B2、B3和B4组分别以α1肾上腺素受体阻滞剂哌唑嗪1 μmol/L、α1肾上腺素受体α1A亚型阻滞剂5-甲基乌拉地尔1 μmol/L、α1肾上腺素受体α1B亚型阻滞剂氯乙基可乐定10 μmol/L和α1肾上腺素受体α1D亚型阻滞剂BMY-7378 1 nmol/L干预,比较干预前后心肌细胞Ikr的变化.结果 B1组和B2组心肌细胞Ikr降为干预前的0.92±0.07和0.97±0.04,高于A组的0.67±0.03(P＜0.01),而B3和B4组心肌细胞Ikr降为干预前的0.64±0.06和0.73±0.07,与A组相仿(P＞0.05).结论 α1肾上腺素受体激活可降低心肌细胞Ikr;该作用主要通过α1肾上腺素受体和α1A亚型介导.
-
苯肾上腺素对糖尿病大鼠室性心律失常的诱导作用
目的 比较α1肾上腺素受体(α1-AR)激动剂苯肾上腺素对正常及链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠室性心律失常的差异作用,及对两组大鼠左心室肌细胞早期后除极(EAD)的差异作用;并分析两组大鼠左心室α1-AR各亚型的差异表达,解析其可能的物质基础.方法 采用离体心脏心电图及电流钳法,分析α1-AR激动剂(苯肾上腺素,PE)诱导正常和糖尿病大鼠离体心脏心律失常发生率及左心室肌细胞EAD发生率的差异作用.采用Western blot法,比较两组大鼠左心室α1-AR各亚型的蛋白表达.结果 与正常大鼠相比,PE(100μmol·L-1)诱导糖尿病大鼠离体心脏产生室性心律失常的机率明显增加,PE(1000 μmol·L-1)诱导左心室肌细胞产生EAD的机率明显增加;α1A-AR在糖尿病大鼠左心室的表达明显增加.结论 α1-AR激动剂使糖尿病大鼠左心室肌细胞产生高机率的EAD是其诱导高机率室性心律失常的基础.而糖尿病大鼠左心室仅α1A-AR表达明显增加是其物质基础.
-
α1肾上腺素受体拮抗剂对前列腺癌DU-145细胞生长的影响及机理研究
目的 对比观察三类α1肾上腺素受体拮抗剂对激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机理.方法 DU-145细胞培养液中加入不同浓度(0.1、1、10、25、100 μmol/L)多沙唑嗪、特拉唑嗪、坦索罗辛、萘哌地尔,不加药物者为对照组,24、48、72、96 h后行MTT法检测细胞生长抑制率;获得佳浓度及佳作用时间,在此条件下行流式细胞仪分析细胞周期分布及早期凋亡;透射电镜观察细胞形态;检测凋亡相关因子及蛋白表达.结果 25、100 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48～96 h,癌细胞生长抑制率为31.2%～82.5%,与对照组相比差异有统计学意义(P《0.01).25 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48 h,细胞周期分布情况与对照组相比无统计学意义,早期凋亡率分别为10.83 %、14.31%,与对照组相比差异有统计学意义(P《0.01);部分细胞呈现凋亡特征性形态学改变; 细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)呈阳性表达,Fas表达增强,bcl-2表达与对照组比较差异无统计学意义.坦索罗辛、萘哌地尔没有类似作用.结论 喹唑啉基α1肾上腺素受体拮抗剂可能通过Fas系统或直接激活TGF-β1信号通路介导凋亡的发生,从而抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长,临床上有望用于治疗进展期前列腺癌.
-
抗α1肾上腺素受体抗体对大鼠血管结构的影响
目的:研究抗α1肾上腺素受体自身抗体对大鼠血管结构的影响.方法:用α1肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫Wistar大鼠作为该抗体的模型,设自发性高血压大鼠(SHR)及正常Wistar大鼠为对照;用尾套法检测血压和用ELISA法检测抗α1肾上腺素受体抗体滴度,用光镜和电镜观察主动脉和肠系膜第三级动脉病理变化,并计算管壁厚度、管壁/管腔比;免疫组化方法检测主动脉壁的c-jun和c-fos的表达.结果:在免疫后2周,免疫组抗α1肾上腺素受体抗体滴度开始升高,并在整个实验过程中维持在较高水平;在实验过程中,免疫组血压与对照组无明显差异,但均显著低于自发性高血压大鼠组;免疫组主动脉管壁厚度((0.382±0.075)mm)、肠系膜三级动脉管壁/管腔比(0.526±0.209)均显著高于正常对照组(分别为(0.297±0.009)mm,0.379±0.072);电镜结果显示免疫组较正常对照及SHR组主动脉平滑肌线粒体增多,间质胶原纤维增多;免疫组主动脉壁c-jun蛋白表达高于正常对照组,但c-fos的表达与正常对照无异.结论:抗α1肾上腺素受体自身抗体可通过增加平滑肌细胞c-jun的表达而导致血管结构的改变,可能在高血压发病中发挥重要作用.
-
α1肾上腺素受体拮抗剂对前列腺癌细胞生长的影响
目的:对比研究三类α1肾上腺素受体拮抗剂对激素非依赖性前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响. 方法:不同浓度多沙唑嗪、特拉唑嗪、坦索罗辛、萘哌地尔加入PC-3细胞.MTT比色法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及早期凋亡;透射电镜观察细胞形态. 结果:10～100 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用24～96 h,癌细胞生长抑制率为11.6%～82.5%(P＜0.05),25 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48 h,细胞周期分布情况相似,部分细胞呈现凋亡特征性形态学改变,早期凋亡率分别为12.83%、18.61%(P＜0.01);坦索罗辛、萘哌地尔没有类似作用.结论:喹唑啉基α1肾上腺素受体拮抗剂通过诱导凋亡抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长,临床上有望用于治疗进展期前列腺癌.
-
抗α1-肾上腺素受体抗体介导糖尿病大鼠肾损伤的模型建立
目的 建立具有激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体(α1-adrenergic receptor autoantibody,α1-R Ab)大鼠模型,观察该抗体对大鼠肾脏功能24 h尿蛋白(24 h urinary protein,24 h Upro)和血肌酐(serum creatinin,SCr)、肾脏结构及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)表达的影响.方法 Wistar大鼠64只,随机分为4组:①健康鼠空白对照组；②健康鼠α1-R Ab介导组；③糖尿病(diabetes mellitus,DM)鼠无α1-R Ab介导组；④DM鼠α1-RAb介导组.采用腹腔注射链脲佐霉素(streptozotocin,STZ)法复制糖尿病大鼠模型,造模成功后持续观察16周；用α1肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫②、④组Wistar大鼠(注射α1-R Ab,100 μg/100 g体质量,分别在0、4、8、12、16周鼠尾静脉一次性注射)；应用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测α1-R Ab;放射免疫法测定24 h Upro水平,苦味酸法测定SCr水平；免疫组织化学染色法(immunohistochemistry,IHC)检测肾脏组织TGF-β1表达；用光镜和电镜观察肾脏病理变化.结果 ①DM鼠α1-R Ab介导组24 h Upro和SCr水平均明显高于DM鼠无α1-R Ab介导组(均P＜0.01).健康鼠α1-R Ab介导组24h Upro明显升高,与健康鼠空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).②电镜下DM鼠α1-R Ab介导组肾组织微观结构严重破坏,健康鼠α1-R Ab介导组及DM鼠无α1-RAb组可见轻度异常,健康鼠空白对照组未见明显异常.③α1-R Ab介导组DM鼠组肾皮质中TGF-β1的表达较无α1-RAb介导组明显增多,有统计学意义(P＜0.01).结论 α1-R Ab介导的鼠体肾皮质中TGF-β11表达增加,糖尿病大鼠肾脏微血管损伤与α1-R Ab介导的免疫反应有关.
-
前列腺等离子电切组织α1-肾上腺素受体的分布情况研究
目的 了解前列腺无炎症增生组织和合并炎症增生组织α1肾上腺素受体(α1-AR)的分布情况.方法 选取30例良性前列腺增生(BPH)患者,收集经尿道前列腺等离子电切术后前列腺增生组织,采用双免疫组织化学法,观察前列腺增生组织中α1-AR 3种亚型的染色光密度(OD)和切片组织炎症细胞的浸润情况.结果 12例前列腺标本切片未发现炎症细胞浸润,18例前列腺标本切片有炎症细胞浸润.前列腺无炎症增生组织α受体亚型α1A-AR、α1B-AR、α1D-AR的OD值与合并炎症增生组织比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 前列腺无炎症增生组织与合并炎症增生组织的α受体亚型α1A-AR、α1B-AR、α1D-AR含量无差异.
关键词： 经尿道前列腺等离子电切术 α1肾上腺素受体 良性前列腺增生 炎症 -
原发性高血压患者中抗α1肾上腺素受体自身抗体激活大鼠主动脉平滑肌细胞内NF-κB
目的:探讨高血压患者血清中抗α1肾上腺素受体自身抗体(autoantibodies against α1-adrenergic receptor,α1-AAs)拟去甲肾上腺素的激动样效应及胞内信号分子活化机制.方法:培养大鼠主动脉平滑肌细胞.将收集的原发性高血压病人血清进行免疫亲和层析法纯化,ELISA检测其滴度后以1:80刺激细胞,并设立不同的处理组.将α1-AAs刺激大鼠主动脉平滑肌细胞后,经Western blotting及免疫荧光方法分析胞内核因子κB (nuclear factor κB,NF-κB) 信号分子激活及表达状况.结果:Western bltting显示α1-AAs刺激组中胞内核因子NF-κB (p50)表达较空白对照组明显增强,且可被α1受体阻滞剂哌唑嗪和NF-κB拮抗剂PDTC明显抑制(P<0.05).免疫荧光实验中,α1-AAs组荧光强度显著高于空白对照组和α1-AAs+哌唑嗪组(P<0.01).结论:高血压患者血清中α1-AAs能够致大鼠主动脉平滑肌细胞NF-κB活化.
-
特拉唑嗪诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的实验研究
目的 探讨α1 肾上腺素受体拮抗剂特拉唑嗪对激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3细胞凋亡的影响.方法 应用不同浓度特拉唑嗪处理对数生长期的PC-3细胞,以MTT比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期变化,Western-Blot检测凋亡相关蛋白Caspase-7和PARP表达的变化.结果应用15 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L 特拉唑嗪分别处理PC-3细胞24 h及48 h后,随着药物浓度的增加和处理时间的延长,细胞生长受到抑制,凋亡细胞增多,部分细胞形态学结构破坏.Western-Blot法检测显示PC-3细胞凋亡的增加与PARP的降解有关,与Caspase-7的表达无明显关系.结论 特拉唑嗪对PC-3细胞的生长抑制呈剂量依赖关系,并可能通过Caspase-PARP凋亡通路诱导PC-3细胞凋亡.
-
人右网膜动脉的功能性α1-肾上腺素受体亚型
目的：研究人右胃网膜动脉(RGA)中介导收缩的功能性α1-肾上腺素受体(α1-AR)亚型.方法：离体血管收缩功能实验.结果：在RGA中α2-AR选择性拮抗剂育亨宾、α1-AR选择性拮抗剂哌唑嗪及α1A-AR选择性拮抗剂RS17053和5-MU，α 1D-AR选择性拮抗剂BMY7378和α1A-与α1B-AR选择性拮抗剂WB4101拮抗NE引起收缩效应的PA2值分别为6.82±0.28、9.77±0.22、8.42±0.22、8.42±0.22、6.84±0.32和8.88±0.20，斜率分别为1.12±0.40、0.90±0.22、0.93±0.22、0.88±0.18、1.05±0.17、1.15±0.16.α1-AR选择性拮抗剂的pA2值与这些拮抗剂在表达α1A-、α1B-、α1D-AR的细胞株上得出的pKi值之间的相关系数分别为0.95、0.82和0.42.用α1B-、α1D-AR的不可逆选择性拮抗剂氯乙基可乐定(CEC)预处理RGA前后，NE的pD2值分别为5.9±0.5和5.6±0.6，大收缩分别为(8.9±3.2)g和(8.0±3.2)g，差异无显著性.结论：在RGA中NE引起的收缩效应主要由α1A-AR介导，而α1B-AR和α1D-AR均不参与收缩效应.
